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Localización y organización sub-celular de las proteínas AcrAB-TolC componentes de la bomba de eflujo en Escherichia coli MG1655

El documento digital no refiere asesor / Determina el patrón de localización y organización subcelular de las proteínas componentes de este complejo en condiciones de expresión nativa o artificial. La estrategia empleada, se basa en reemplazar el codón de parada con una proteína fluorescente verde (sfGFP), lo cual permitiría una visualización “in vivo”. Las construcciones generadas, mostraron un patrón de localización subcelular difuso en un fondo genético silvestre. Sorprendentemente, el patrón difuso cambio a polar en un mutante deficiente en el gen tolC. Se verificó la estabilidad de las construcciones, determinando su apropiada funcionalidad y se descartó que se trataran de cuerpos de inclusión. Se evaluaron genes con diferentes grados de homología a acrAB y que ensamblan (o no) con tolC, determinándose que el cambio observado en ausencia de tolC es especifico solo para las proteínas AcrAB. Se observó además que la ausencia de tolC suprime la expresión y localización polar de la proteína Tar (quimoreceptor). Se determinó además que las proteínas AcrAB están asociadas o integradas a la membrana interna tanto en localización difusa como polar. Se determinó que la ausencia de tolC (pero no ΔacrAB) afecta la movilidad, resistencia a antibióticos, capacidad de división celular con morfología aberrante (sólo en M9). Se descubrió que solo tras la adición de FeSO4, se restauran los defectos observados en mutantes ΔtolC. También descubrimos una variación en el perfil de las PBPs, cuando las células aberrantes restauran su fenotipo normal. Este descubrimiento nos permitió establecer una conexión entre las proteínas componentes de la bomba de eflujo AcrAB-TolC con los procesos de división celular, movilidad, resistencia a antibióticos y morfogénesis. / Tesis

Identiferoai:union.ndltd.org:Cybertesis/oai:cybertesis.unmsm.edu.pe:20.500.12672/12157
Date January 2012
CreatorsVega Mendoza, Daniel Edgar
PublisherUniversidad Nacional Mayor de San Marcos
Source SetsUniversidad Nacional Mayor de San Marcos - SISBIB PERU
LanguageSpanish
Detected LanguageSpanish
Typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
SourceUniversidad Nacional Mayor de San Marcos, Repositorio de Tesis - UNMSM
Rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess

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