Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Two robust, fast and sensitive methods for quantification of sulfamethoxazole (SMX), trimethoprim (TMP) and sulfadiazine (SDZ) in plasma using high performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS/MS) was developed and validated. The methods involved liquid-liquid extraction with ethyl acetate using metoprolol and sulfamethoxazole as internal standards (PI). The chromatographic separations were performed using Genesis C18 column 100 x 2.1 mm, 4 microns (sulfadiazine) and Genesis C18 150 x 4.6 mm, 4 microns (SMX+TMP), with elution systems consisting of solutions of methanol/water (35/65, v/v) + 0.5% Formic Acid (sulfadiazine) and methanol/water (45/55, v/v) + 0.5% Formic Acid (SMX+TMP). Calibration curves were linear in the range from 0.05 to 25 mg/mL (sulfadiazine); 0.5 to 100 mg/mL (SMX) and 0.02 to 3.5 mg/mL (TMP). The recoveries corresponding to the analysis of quality controls were 66.8, 59 and 63.4% for sulfadiazine; 67.7, 63.3 and 74.4% for SMX; 74.5, 70.5 and 78.1% for TMP. The recovery values relating to internal standards sulfamethoxazole and metoprolol were 66.2% and 76.8% respectively. The validated bioanalytical methods included evaluation of precision and accuracy being the results within the required limits. The methods were successfully applied in studies of comparative bioavailability of formulations containing a combination of sulfamethoxazole-trimethoprim (suspension containing 40mg of SMX and TMP 8mg per milliliter) and formulations containing sulfadiazine (tablets 500 mg) in healthy volunteers of both sexes / Foram desenvolvidos e validados dois mÃtodos robustos, rÃpidos e sensÃveis para a quantificaÃÃo de sulfametoxazol (SMX), trimetoprima (TMP) e sulfadazina (SDZ) em plasma, utilizando cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia acoplada à espectrometria de massa (LC-MS/MS). Os mÃtodos envolveram extraÃÃo lÃquido-lÃquido, com acetato de etila utilizando metoprolol e sulfametoxazol como padrÃes internos (PI). As separaÃÃes cromatogrÃficas foram realizadas utilizando colunas Genesis C18 100 x 2.1 mm, 4 (sulfadiazina) e Genesis C18 150 x 4,6mm, 4 (SMX + TMP), com sistemas de eluiÃÃo constituÃdos por soluÃÃes de Metanol/Ãgua (35/65, v/v) + 0,5 % Ãcido FÃrmico (sulfadiazina) e Metanol/Ãgua (45/55; v/v) + 0,5% Ãcido FÃrmico (SMX + TMP). As curvas de calibraÃÃo foram lineares, nas faixas de 0,05 a 25 Âg/mL (sulfadiazina), 0,5 a 100 Âg/mL (SMX) e 0,02 a 3,5 Âg/mL (TMP). As recuperaÃÃes correspondentes Ãs anÃlises dos controles de qualidade foram de 66,8, 59 e 63,4 % para sulfadiazina; 67,7, 63,3 e 74,4% para SMX; 74,5, 70,5 e 78,1% para TMP. Os valores da recuperaÃÃo referentes aos padrÃes internos sulfametoxazol e metoprolol foram de 66,2% e 76,8% respectivamente. As metodologias bioanalÃticas validadas incluÃram avaliaÃÃo de precisÃo e exatidÃo intra e interlote, assegurando que estas estavam dentro de limites admissÃveis. Os mÃtodos foram aplicados com sucesso em estudos de biodisponibilidade comparativa de formulaÃÃes contendo a associaÃÃo de sulfametoxazol + trimetoprima (suspensÃo contendo 40 mg de SMX e 8 mg de TMP por mililitro) e de formulaÃÃes contendo sulfadiazina (comprimidos de 500 mg) em voluntÃrios sadios de ambos os sexos.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:5034 |
| Date | 31 October 2011 |
| Creators | DemÃtrius Fernandes do Nascimento |
| Contributors | Maria Elisabete Amaral de Moraes, Maria Bernadete de Sousa Maia, Aline KÃrcia Alves Soares, Gilmara Silva de Melo Santana, Mirna Marques Bezerra |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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