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Avaliação morfológica, citoquímica e estereológica do útero de camundongos prenhes após estresse induzido por exercício físico extenuante

O exercício aeróbio aumenta o fluxo sanguíneo para o músculo esquelético,
diminuindo esse fluxo em outros órgãos como útero e placenta o que pode
prejudicar a oxigenação e nutrição do embrião. O estímulo do exercício extenuante
pode ser estressor, aumentando a secreção de glicocorticóides através do eixo
Hipotálamo-Hipófise-adrenal e que podem causar complicações durante a gestação,
como as observadas em outras situações como o estresse alimentar e após
infecção. As células Natural Killer uterinas (uNK) correspondem a maior população
de leucócitos deciduais de humanos e roedores. As uNK de camundongos têm sido
muito estudas por meio da citoquímica de lectina DBA (Dolichos Biflorus Agglutinin),
que tem afinidade para N-acetil-D-Galactosamia expressa seletivamente nos
grânulos e membrana plasmática destas células. Esta seletividade propiciou a
caracterização de quatro subtipos de uNK, relacionados aos estágios de
diferenciação destas células. A função mais aceita das uNK é a secreção de INF-y
levando a dilatação das artérias espiraladas uterinas para manutenção da decídua e
nutrição do embrião. Este estudo teve o objetivo de investigar se o exercício
extenuante exerceria efeitos na implantação e integridade embrionária, bem como,
no número, diferenciação, distribuição e padrão de reatividade para lectina DBA das
uNK. Dez camundongos Swiss fêmeas foram mantidos sedentários (grupo 1).
Outros 10 (grupo 2) foram submetidos a natação, do 1º ao 10º dia de gestação (dg),
durante 60 minutos diários, dos quais os últimos 20 minutos se procederam com
halter com massa de 4% do peso corporal, preso a suas caudas, em dias alternados
do 1º ao 5º dg, e de 10% dessa massa do 6º ao 10º dg. Os animais do grupo 3 após
prenhez, foram submetidos a natação da mesma maneira que os do grupo 2, porém
passaram por um programa de treinamento de 3 semanas anterior a prenhez
durante 5 dias/semana, sendo realizado 15 minutos/dia na primeira semana,
aumentando gradativamente em 10 minutos/dia até 60 minutos na segunda semana
e 60 minutos/dia na terceira semana. Todos os camundongos foram anestesiados e
perfundidos com PFA (paraformaldeído) 4% no 10º dg. As taxas de implantação,
viabilidade e reabsorção embrionárias foram avaliadas e os sítios de implantação
destes animais foram coletados e embebidos em parafina para obtenção de cortes
histológicos que foram analisados por lectina DBA e HE (Hematoxilina e Eosina).
Foram quantificados os 4 subtipos de células uNK DBA reativos em 3 áreas da
região mesometrial dos sítios de implantação. Nossos resultados mostraram que o
exercício físico extenuante é capaz de causar diminuição na implantação, viabilidade
embrionária e aumento na perda fetal, bem como, aumento em número e na
diferenciação das células uNK, sem aparente ativação de sua citotoxicidade. O
exercício realizado previamente a prenhez diminuiu estes efeitos, pois restabeleceu
as taxas normais de implantação e o número total de uNK, bem como, aumentou a
viabilidade e diminuiu a perda embrionária, contudo sem impedir completamente os
efeitos deletérios do exercício na gestação. Nossos resultados indicam que esse
modelo de estresse poderá ser útil para estudos futuros da investigação dos
mecanismos neuroimunoendócrinos, envolvidos com parto prematuro e aborto
causado por fatores estressores muitas vezes desconhecidos. / Aerobic exercise increases blood flow to skeletal muscle, decreasing the flow in other
organs such as uterus and placenta, which may impair embryo oxygenation and
nutrition. Furthermore, the continuous exercise can be stressful, changing the
hypothalamic-pituitary-adrenal axis leading to secretion of glucocorticoids that may
cause complications during pregnancy, such as those observed in other situations
such as dietary and infection-mediated stress . Uterine natural killer cells (uNK) are
the largest population of decidual leukocytes from humans and rodents. The mouse
uNK have been extensively investigated by the use of DBA lectin cytochemistry,
which has affinity for N-acetyl-D-Galactosamia selectively expressed in the granules
and plasma membrane of these cells. This selectivity allowed the characterization of
four subtypes of uNK related to their stages of differentiation. The most accepted
function of uNK is the secretion of IFN-y leading to dilation of the uterine spiral
arteries, maintaining the decidua and embryo nutrition. the goal of this study was to
investigate whether strenuous exercise has effect in the embryo implantation and
integrity, as well as, in the number, differentiation, distribution and DBA lectin
reactivity pattern of uNK cells. Ten female Swiss mice were sedentary (group 1).
Other 10 (group 2) were submitted to swimming, from 1st to 10th gestation day (gd) for
60 minutes daily, been the last 20 minutes conducted with a steel caudal dumbbell
with 4% of their body masses, attached in alternately days from the 1st to 5th gd, and
10% of this mass from the 6th to 10th gd. The animals from group 3 after pregnancy
were submitted to swimming in the same way as group 2, but went through a training
program for 3 weeks, 5 days a week, being 15 minutes/day in the first week,
increasing gradually by 10 minutes a day up to 60 minutes in the second week and
60 minutes a day in the third week. All mice were anesthetized and perfused with 4%
PFA at 10°dg. The rates of embryo implantation, viability resorption were evaluated
and the implantatio sites of these animals were collected and embedded in paraffin to
obtain histological sections that were submitted to DBA lectin and H&E. We
quantified the four DBA reactive uNK cells subtypes in three areas of the
mesometrial region of the implantation sites. Our results showed that strenuous
exercise can cause a decrease in implantation embryo viability and increased fetal
loss, as well as increase in number and differentiation of uNK cells, without apparent
activation of its cytotoxicity. The exercise performed prior to pregnancy decreased
these effects, since restored the normal rates of implantation and the total number of
UNK, as well as increased viability and decreased embryonic loss, without
completely prevent the deleterious effects of exercise during pregnancy. Our results
indicate that this stress model established here may be useful for future studies
about the neuroimmunoendocrinology of preterm labor and abortion caused by often
unknown stress factors. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/434
Date02 February 2011
CreatorsRODRIGUES, Kamila Leite
ContributorsPAFFARO JUNIOR, Valdemar Antonio, http://lattes.cnpq.br/4193402330362099, REIS, Adelina Martha, BIZINOTTO, Márcia Cristina
PublisherUniversidade Federal de Alfenas, Instituto de Ciências Biomédicas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess

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