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Identificação de novos microrganismos com potencial probiótico e atividade contra enteropatógenos bacterianos / Identification of new microorganisms with probiotic potential and activity against bacterial enteropathogens

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-09-14T20:45:25Z
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Previous issue date: 2017-06-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão / The use of food for probiotic bacteria has recently been considered a possibility of
prevention against the installation or attenuation of several infectious processes. Species
belonging to the genera Bifidobacterium and Lactobacillus predominate in the
gastrointestinal microbiota and are widely used in functional foods. In general, a selection
of new probiotic strains for use in humans has as its source a human intestinal flora and
breast milk. Thus, the objective of this study was to isolate and identify new species with
potential probiotic from samples of breast milk and feces of infants exclusively breastfed,
in addition to evaluating their probiotic potential. Samples of breast milk from two
different lactation periods (colostrum and transitional milk) and samples of fecal material
from infants were used. Isolation was used using MRSC and for Beerens for Lactic-Acid
Bacteria and Bifidobacterium spp. respectively. Probiotic potential was assessed by
physical pH and bile salt tolerance tests. Verified its ability to adhere to mucin and human
intestinal cells (HT-29) and inhibit adhesion of different diarrheogenic strains of E. coli.
The identification of the promising isolates was performed through the 16S rDNA region.
Five isolates had acid-bile resistance, with CLM0109 insulation having 90.2% and 64.6%
resistance, pH 3.0 and pH 2.0, respectively. These isolates have an ability to adhere to
mucin and HT-29 cells, the isolate FEB0308 showed the highest level of adherence to
HT-29 cells. The adhesion assay demonstrated that all isolates were absorbed by adhesion
of diarrheogenic E. coli (DECs). Antimicrobial susceptibility analysis showed that 3
isolates showed resistance to one or two antibiotics (kanamycin and streptomycin). The
molecular analysis allowed identifying the isolates as belonging to the species
Lactobacillus casei. The results show that the five isolates present probiotic potential
especially for use in the prevention and treatment of infections caused by DEC and
demonstrate that milk and stool samples from infants can act as a source of potential
probiotic bacteria. / O uso de alimentos contendo bactérias probióticas foi recentemente considerado uma
possibilidade de prevenção contra a instalação ou atenuação de diversos processos
infecciosos. Espécies pertencentes aos gêneros Bifidobacterium e Lactobacillus
predominam na microbiota gastrintestinal humana e são amplamente utilizadas em
alimentos funcionais. Em geral, a seleção de novas cepas probióticas para uso em
humanos, tem como fonte a microbiota intestinal humana e o leite materno. Dessa forma,
o objetivo deste estudo foi isolar e identificar novas estirpes com potencial probiótico a
partir de fezes de lactentes amamentados exclusivamente com leite materno, além de
avaliar seu potencial probiótico. Foram utilizadas amostras de material fecal de bebes
alimentados exclusivamente com leite materno. O isolamento foi realizado utilizando-se
ágar MRSC e ágar Beerens para bactérias ácido-lácticas (BAL) e Bifidobacterium spp.
respectivamente. O potencial probiótico foi avaliado pelos testes de tolerância ao pH
gástrico e sais biliares. Além disso, foi verificado sua capacidade de aderir à mucina e as
células intestinais humanas (HT-29), bem como a capacidade de inibir adesão de distintas
linhagens diarreiogênicas de E. coli além de sensibilidade a antimicrobianos. A
identificação dos isolados promissores foi realizada através da região 16S rDNA. Cinco
isolados apresentaram resistência ácido-biliar, com destaque para o isolado CLM0109
que apresentou 90.2% e 64.6% de resistência a pH 3.0 e pH 2.0 respectivamente. Estes
isolados tiveram a capacidade de aderir à mucina e células HT-29, o isolado FEB0308
apresentou o maior nível de aderência a células HT-29. O ensaio de inibição da adesão
demonstrou que todos os isolados foram capazes de inibir adesão de E. coli
diarreiogênicas (DECs). Além disso, a análise de sensibilidade a antimicrobianos
demonstrou que 3 isolados apresentaram resistência a um ou dois antibióticos
(canamicina e estreptomicina). A análise molecular identificou os isolados como
Lactobacillus casei. Concluímos que os cinco isolados apresentam potencial probiótico
especialmente para uso na prevenção e tratamento de infecções causadas por DEC e
demonstra que as amostras fecais de lactentes alimentados exclusivamente com leite
materno, podem funcionar como fonte de bactérias com potencial probiótico.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede/1929
Date09 June 2017
CreatorsMENDES, Hermínio Benítez Rabello
ContributorsMONTEIRO NETO, Valério, BOMFIM, Maria Rosa Quaresma, DRUMMOND, Regna Maria Nardi, GUERRA, Rosane Nassar Meireles, ABREU JUNIOR, Afonso Gomes, MONTEIRO, Cristina de Andrade
PublisherUniversidade Federal do Maranhão, PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM REDE - REDE DE BIODIVERSIDADE E BIOTECNOLOGIA DA AMAZÔNIA LEGAL/CCBS, UFMA, Brasil, DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA/CCBS
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFMA, instname:Universidade Federal do Maranhão, instacron:UFMA
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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