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Desenvolvimento de teste rápido para diagnóstico de Hantavirose humana / Development of rapid test for diagnosis of human Hantavirus

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Previous issue date: 2017-04-12 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Human Hantavirosis is a serious lung disease caused by Hantavírus, pathogen that is
related mainly with wild rodents, insectivorous animals and small mammals (shrews,
moles and bats). In humans, the disease is called Hantavírus Cardiopulmonary
Syndrome (HCPS), which has high mortality rates (~ 50%). In Brazil, 1,871 cases of
HCPS have been confirmed, with 789 deaths between the years 1993 to 2016. The
symptoms in humans are not very characteristic in the initial stage, and very similar
to diseases such as Dengue and Yellow Fever, making it difficult to diagnose, with a
need of fast and accurate diagnostic methods for Hantaviruses. To assist in the
diagnosis of Hantavírus, we aim to develop a quick and simple test based on
immunochromatography. This paper presents results obtained with 3 prototypes of
tests compoused by a nitrocellulose membrane (NC) impregnated in the form of a
line with the recombinant nucleocapsid protein (rN) Hantavírus-specific, as the
capture agent and another parallel line impregnated with protein A, as reaction
control. In the NC edges we have a sample zone composed of cellulose fiber and a
glass microfiber tape containing the anti-IgM antibodies and / or anti-human IgG
conjugated to colloidal gold and at the other end an absorption zone composed of
cellulose fiber. We evaluated 163 samples, among them, positive serum for
Hantavírus, Dengue, Mayaro, Oropouche, Yellow fever, Malaria (P. falciparum)
Malaria (P. vivax), Parvovirus B19, Rubella, HIV, Chikungunya and samples from
health donors. After several evaluations, the prototype for the detection of IgM and
IgG simultaneously, using the C concentration of protein rN, cutoff point 1 and
reading time of the results of 10 minutes was chosen, presenting 100% sensitivity,
99, 3% specificity, 90.9% VPP and 100% VPN. It is expected that the product of this
study helps in the diagnosis of severe cases of Hantavírus improving the prognosis of
patients and reducing the high rates of HCPS fatality, moreover, helping to promote
health by conducting epidemiological studies thereby promoting the construction of
strategies to prevent Hantavírus infection. / A Hantavirose humana é uma doença pulmonar grave causada pelo Hantavírus,
patógeno que está relacionado, principalmente, com roedores selvagens, animais
insetívoros e pequenos mamíferos (musaranhos, toupeiras e morcegos). Em
humanos, a doença é denominada Síndrome Cardiopulmonar pelo Hantavírus
(HCPS), a qual possui altos índices de mortalidade (~50%). No Brasil, foram
confirmados 1.871 casos de HCPS, com 789 óbitos entre os anos de 1993 a 2016. Os
sintomas em humanos são pouco característicos na fase inicial, semelhantes aos de
doenças como a Dengue e Febre Amarela, o que dificulta o diagnóstico. Portanto,
existe a necessidade de métodos de diagnóstico rápidos e precisos para Hantavirose.
Para auxiliar no diagnóstico da Hantavirose, objetivamos desenvolver um teste
rápido e simples, baseado em imunocromatografia. Neste trabalho são apresentados
resultados obtidos com 3 protótipos de testes compostos por uma membrana de
nitrocelulose (NC) com a proteína do nucleocapsídeo recombinante (rN) específica
de Hantavírus impregnada na forma de uma linha, atuando como agente de captura
dos anticorpos na amostra, e outra linha paralela posterior à do antígeno com
proteína A como controle da reação. Numa das extremidades da NC temos a zona
receptora de amostra composta por fibra de celulose e uma fita de microfibra de
vidro contendo os anticorpos anti-IgM e/ou anti-IgG humanas conjugados com ouro
coloidal e, na outra extremidade por uma zona de absorção composta por fibra de
celulose. Foram avaliadas 163 amostras, dentre elas, soros positivos para Hantavírus,
Dengue, Mayaro, Oropouche, Febre Amarela, Malária (P. falciparum), Malária (P.
vivax), Parvovírus B19, Rubéola, HIV, Chikungunya e soros de doadores de sangue
sadios. Após diversas avaliações, o protótipo para detecção de IgM e IgG
simultaneamente, com concentração C de proteína rN na linha teste, ponto de corte 1
e tempo de leitura dos resultados de 10 minutos foi escolhido, apresentando 100% de
sensibilidade, 99,3% de especificidade, 90,9% de VPP e 100% de VPN. Espera-se
que o produto deste estudo auxilie no diagnóstico dos casos graves de Hantavirose
melhorando o prognóstico dos pacientes e diminuindo os altos índices de fatalidade
de HCPS, além disso, auxiliando na promoção à saúde, através da realização de
estudos epidemiológicos promovendo assim a construção de estratégias de prevenção
da infecção pelo Hantavírus.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/7200
Date12 April 2017
CreatorsGuimarães, João Pedro Tôrres
ContributorsBührer, Samira, Figueiredo, Luiz Tadeu Moraes, Bührer, Samira, Figueiredo, Mario Luis Garcia de, Moura, Rodrigo Scaliante de, Cardoso, Ludimila Paula Vaz, Oliveira, Regiane Morillas
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Medicina Tropical e Saúde Publica (IPTSP), UFG, Brasil, Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - IPTSP (RG)
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess
Relation6085308344741430434, 600, 600, 600, 600, -7769011444564556288, 5989919188376747614, -2555911436985713659

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