CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O pinhÃo manso (Jatropha curcas L.) à considerado uma fonte potencial para a produÃÃo de biocombustÃveis, tendo por base a alta produtividade e qualidade do Ãleo extraÃdo de suas sementes. Entretanto, seu uso à inviabilizado para alimentaÃÃo humana e animal devido à presenÃa de fatores antinuticionais como a curcina e, em especial, os Ãsteres de forbol. A utilizaÃÃo de ferramentas biotecnolÃgicas, como a cultura de tecidos, pode vir a minimizar ou solucionar essas limitaÃÃes. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi propagar in vitro plantas inteiras via cultivo de Ãpices caulinares obtidos a partir de sementes de pinhÃo manso germinadas in vivo e in vitro; determinar a reprodutibilidade de um protocolo de regeneraÃÃo disponÃvel na literatura e definir, atravÃs de estudos histolÃgicos, a origem da planta regenerada in vitro. Para a propagaÃÃo in vitro utilizou-se Ãpices caulinares, como explantes, que foram colocados em meio MS suplementado com as citocininas BAP (6-benzilaminoprina), KIN (cinetina) e 2-iP (2-isopenteniladenina) na concentraÃÃo de 2,0 mg.L-1. O BAP apresentou os melhores resultados no desenvolvimento dos Ãpices caulinares. Este e a giberelina foram utilizados juntos no mesmo meio ou separados, para a induÃÃo do alongamento dos mesmos. O Ãcido indol-3-butirÃco (AIB) foi usado para o enraizamento. A suplementaÃÃo do meio de cultura com BAP foi eficiente no desenvolvimento dos Ãpices caulinares e o alongamento apresentou Ãxito com o uso do GA3 individualmente. O enraizamento com o AIB foi conseguido. A fim de determinar a reprodutibilidade do protocolo de organogÃnese, cotilÃdones de sementes de pinhÃo manso germinadas in vitro foram colocados em meio MS suplementado com BAP e AIB para a induÃÃo da formaÃÃo de partes aÃreas, estas foram alongadas com BAP e enraizadas com AIB. AlÃm disso, os explantes cotiledonares foram colocados com a face abaxial e adaxial em contato com o meio de cultivo a fim de estabelecer a melhor posiÃÃo do mesmo na regeneraÃÃo in vitro. Plantas inteiras de J. curcas L. foram obtidas a partir da utilizaÃÃo do protocolo testado. A melhor posiÃÃo do segmento cotiledonar foi a face adaxial em contato com o meio, onde 56% dos explantes formaram partes aÃreas. A anÃlise histolÃgica foi feita com a coleta de explantes cotiledonares em intervalos sequenciais de 0, 5, 10, 15 e 25 dias de permanÃncia do meio de regeneraÃÃo. O estudo anatÃmico possibilitou o acompanhamento da organogÃnese do pinhÃo manso, no qual cÃlulas parenquimÃticas prÃximas à regiÃo adaxial do explante cotiledonar se dividiram e formaram as partes aÃreas. Os dados obtidos nesse trabalho mostraram que ambos os protocolos utilizados, a partir de Ãpices caulinares e de explantes cotiledonares, foram eficientes no processo de regeneraÃÃo; as anÃlises histolÃgicas sugerem que a regeneraÃÃo ocorre via organogÃnese direta e possivelmente apresenta origem multicelular. / The physic nut (Jatropha curcas L.) is considered a potential source for the biofuel production, because of its high productivity and oil quality extracted from the seeds. However, its use is unfeasible for human and animal food due to antinutritional factors like the curcin protein and specially the secondary metabolites â phorbol esters. The application of biotechnological tools, like tissue culture, can be used to overcome these limitations. In this context, the aim of this work was to propagate whole plants in vitro using shoot cultures obtained from physic nut seeds germinated in vitro and in vivo; to determine the reproducibility of a regeneration protocol available in the literature, and to define through histological studies, the origin of the regenerated plant in vitro. For the in vitro propagation, shoots were used as explants sources, which were placed on MS medium supplemented with the cytokinins BAP (6- benzylaminopurine), KIN (kinetin) e 2-iP (2- isopentenyl adenine), 2,0 mg.L-1. BAP showed the best results in the development of the shoots. This regulator was used alone or in association with gyberelins for the elongation of the shoots. The indole-3-butyric-acid was used for the rooting. The supplementation of the medium culture with BAP was efficient in the development of the shoots and the elongation was superior with the use of GA3 alone. The rooting was achieved with AIB. To determine the reproducibility of an organogenesis protocol, cotyledons from physic nut seeds germinated in vitro were placed on MS medium supplemented with BAP and AIB for the promotion of aerial which were elongated with BAP and rooting with AIB. The cotyledonary explants were placed with the abaxial and adaxial face in contact with the medium to establish the best position of it in the in vitro regeneration. Whole plants of J. curcas L. were obtained using the protocol tested. The best position of the cotyledonar segment was the adaxial face in contact with the medium, where 56% of the explants formed shoots. The histological analysis was made with cotyledonary explants collected in sequential intervals of 0, 5, 10, 15 e 25 days of permanency in the regeneration medium. The anatomical study allowed the accompaniment of the organogenesis in physic nut, where parenchymal cells next to the adaxial region of the cotyledonar explants were divided and formed the shoots. The data obtained from this work showed that both protocols used, from shoots tips and cotyledonar explants, were efficient in the regeneration process; the histological analysis suggests that regeneration occurs via direct organogenesis and possibly presents multicellular origin.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:6555 |
| Date | 28 February 2013 |
| Creators | Magda Laiara Bezerra de Lima |
| Contributors | Francisco de Assis de Paiva Campos, Cristina Paiva da Silveira Carvalho, Arlete Aparecida Soares |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Agronomia/Fitotecnia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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