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OrganogÃnese in vitro em Jatropha curcas L. / Organogenesis in vitro in Jatropha curcas L.

Magda Laiara Bezerra de Lima 28 February 2013 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O pinhÃo manso (Jatropha curcas L.) à considerado uma fonte potencial para a produÃÃo de biocombustÃveis, tendo por base a alta produtividade e qualidade do Ãleo extraÃdo de suas sementes. Entretanto, seu uso à inviabilizado para alimentaÃÃo humana e animal devido à presenÃa de fatores antinuticionais como a curcina e, em especial, os Ãsteres de forbol. A utilizaÃÃo de ferramentas biotecnolÃgicas, como a cultura de tecidos, pode vir a minimizar ou solucionar essas limitaÃÃes. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi propagar in vitro plantas inteiras via cultivo de Ãpices caulinares obtidos a partir de sementes de pinhÃo manso germinadas in vivo e in vitro; determinar a reprodutibilidade de um protocolo de regeneraÃÃo disponÃvel na literatura e definir, atravÃs de estudos histolÃgicos, a origem da planta regenerada in vitro. Para a propagaÃÃo in vitro utilizou-se Ãpices caulinares, como explantes, que foram colocados em meio MS suplementado com as citocininas BAP (6-benzilaminoprina), KIN (cinetina) e 2-iP (2-isopenteniladenina) na concentraÃÃo de 2,0 mg.L-1. O BAP apresentou os melhores resultados no desenvolvimento dos Ãpices caulinares. Este e a giberelina foram utilizados juntos no mesmo meio ou separados, para a induÃÃo do alongamento dos mesmos. O Ãcido indol-3-butirÃco (AIB) foi usado para o enraizamento. A suplementaÃÃo do meio de cultura com BAP foi eficiente no desenvolvimento dos Ãpices caulinares e o alongamento apresentou Ãxito com o uso do GA3 individualmente. O enraizamento com o AIB foi conseguido. A fim de determinar a reprodutibilidade do protocolo de organogÃnese, cotilÃdones de sementes de pinhÃo manso germinadas in vitro foram colocados em meio MS suplementado com BAP e AIB para a induÃÃo da formaÃÃo de partes aÃreas, estas foram alongadas com BAP e enraizadas com AIB. AlÃm disso, os explantes cotiledonares foram colocados com a face abaxial e adaxial em contato com o meio de cultivo a fim de estabelecer a melhor posiÃÃo do mesmo na regeneraÃÃo in vitro. Plantas inteiras de J. curcas L. foram obtidas a partir da utilizaÃÃo do protocolo testado. A melhor posiÃÃo do segmento cotiledonar foi a face adaxial em contato com o meio, onde 56% dos explantes formaram partes aÃreas. A anÃlise histolÃgica foi feita com a coleta de explantes cotiledonares em intervalos sequenciais de 0, 5, 10, 15 e 25 dias de permanÃncia do meio de regeneraÃÃo. O estudo anatÃmico possibilitou o acompanhamento da organogÃnese do pinhÃo manso, no qual cÃlulas parenquimÃticas prÃximas à regiÃo adaxial do explante cotiledonar se dividiram e formaram as partes aÃreas. Os dados obtidos nesse trabalho mostraram que ambos os protocolos utilizados, a partir de Ãpices caulinares e de explantes cotiledonares, foram eficientes no processo de regeneraÃÃo; as anÃlises histolÃgicas sugerem que a regeneraÃÃo ocorre via organogÃnese direta e possivelmente apresenta origem multicelular. / The physic nut (Jatropha curcas L.) is considered a potential source for the biofuel production, because of its high productivity and oil quality extracted from the seeds. However, its use is unfeasible for human and animal food due to antinutritional factors like the curcin protein and specially the secondary metabolites â phorbol esters. The application of biotechnological tools, like tissue culture, can be used to overcome these limitations. In this context, the aim of this work was to propagate whole plants in vitro using shoot cultures obtained from physic nut seeds germinated in vitro and in vivo; to determine the reproducibility of a regeneration protocol available in the literature, and to define through histological studies, the origin of the regenerated plant in vitro. For the in vitro propagation, shoots were used as explants sources, which were placed on MS medium supplemented with the cytokinins BAP (6- benzylaminopurine), KIN (kinetin) e 2-iP (2- isopentenyl adenine), 2,0 mg.L-1. BAP showed the best results in the development of the shoots. This regulator was used alone or in association with gyberelins for the elongation of the shoots. The indole-3-butyric-acid was used for the rooting. The supplementation of the medium culture with BAP was efficient in the development of the shoots and the elongation was superior with the use of GA3 alone. The rooting was achieved with AIB. To determine the reproducibility of an organogenesis protocol, cotyledons from physic nut seeds germinated in vitro were placed on MS medium supplemented with BAP and AIB for the promotion of aerial which were elongated with BAP and rooting with AIB. The cotyledonary explants were placed with the abaxial and adaxial face in contact with the medium to establish the best position of it in the in vitro regeneration. Whole plants of J. curcas L. were obtained using the protocol tested. The best position of the cotyledonar segment was the adaxial face in contact with the medium, where 56% of the explants formed shoots. The histological analysis was made with cotyledonary explants collected in sequential intervals of 0, 5, 10, 15 e 25 days of permanency in the regeneration medium. The anatomical study allowed the accompaniment of the organogenesis in physic nut, where parenchymal cells next to the adaxial region of the cotyledonar explants were divided and formed the shoots. The data obtained from this work showed that both protocols used, from shoots tips and cotyledonar explants, were efficient in the regeneration process; the histological analysis suggests that regeneration occurs via direct organogenesis and possibly presents multicellular origin.
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LÃminas de IrrigaÃÃo versus Coberturas do Solo e AdubaÃÃo BorÃcica na Cultura do Girassol sob as CondiÃÃes EdafoclimÃticas de Russas - Cearà / Interaction between irrigation depths and soil mulches, and boracic fertilizing in sunflower cultivation

Alan Diniz Lima 11 February 2011 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O girassol à integrante de sistemas de produÃÃo de grÃos e biodiesel, tornando-a uma das culturas com potencial de utilizaÃÃo no Brasil em projetos de inclusÃo social. Entretanto, para se otimizar a produÃÃo dessa oleaginosa, torna-se justificÃvel contornar a falta de informaÃÃes referentes à alguns tipos de prÃticas, entre elas: A associaÃÃo entre irrigaÃÃo e formas de coberturas do solo, bem como a adubaÃÃo adequada, dando Ãnfase ao fato de que a cultura à particularmente sensÃvel a deficiÃncia de boro. Em consequÃncia, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da interaÃÃo entre lÃminas de irrigaÃÃo e tipos coberturas do solo, e adubaÃÃo borÃcica na cultura do girassol. O trabalho constou de dois experimentos, implantados num delineamento experimental em blocos casualizados. O experimento 01, desenvolvido no esquema de parcelas subdivididas, consistindo de cinco lÃminas de irrigaÃÃo (25, 50, 75, 100 e 125% da evaporaÃÃo medida no tanque classe âAâ) na parcela e quatro tipos de cobertura do solo (palhada de arroz; palhada de carnaÃba; raspa de madeira e sem cobertura) na subparcela e trÃs repetiÃÃes. O experimento 02, tambÃm em blocos ao acaso, foi constituÃdo de cinco tratamentos e cinco repetiÃÃes, com a aplicaÃÃo de 1, 2, 3, 4 e 5 kg ha-1 de boro, de maneira convencional. Foram procedidos todos os tratos culturais e fitossanitÃrios necessÃrios. As variÃveis avaliadas foram: Altura da planta, diÃmetro do caule, massa de 1000 aquÃnios, massa mÃdia de aquÃnios, potencial de produtividade de aquÃnios, teor de Ãleo dos aquÃnios e potencial de produtividade de Ãleo. Os dados das variÃveis avaliadas foram submetidos à anÃlise de variÃncia pelo teste F, e quando verificado efeito significativo, os de natureza qualitativa foram comparados atravÃs do teste de Tukey e os de natureza quantitativa foram submetidos à anÃlise de regressÃo. No experimento 01, todas as variÃveis analisadas apresentaram inferÃncia estatÃstica frente Ãs lÃminas de irrigaÃÃo, exceto o teor de Ãleo, sendo que a lÃmina de irrigaÃÃo 807,1 mm (125% da ECA) proporcionou uma produtividade mÃxima de 1.634,25 kg ha-1. O potencial de produtividade de Ãleo em kg ha-1 foi afetado significativamente pelas lÃminas de irrigaÃÃo aplicada com valor mÃximo de 675,88 kg ha-1de Ãleo (125% da ECA). O teor de Ãleo mÃdio de aquÃnios encontrado foi de 41,38%. As diferentes coberturas do solo e a interaÃÃo entre lÃminas e coberturas do solo nÃo causaram efeito significativo nas variÃveis estudadas No experimento 02, a altura de planta e o diÃmetro do caule foram influenciados significativamente pelas doses de boro e pela Ãpoca de coleta dos dados, mas nÃo pela interaÃÃo doses de boro versus Ãpoca de coleta. A dose de 4 kg ha-1 de boro maximizou a massa mÃdia de aquÃnios (48,95 g), o potencial de produtividade de aquÃnios (2442,34 kg ha-1) e o potencial de produtividade de Ãleo (1076,58 kg ha-1). O teor mÃdio de Ãleo dos aquÃnios encontrado foi de 43,49%. / The use of sunflower in grain and biodiesel production, makes it potentially important in Brazilian projects of social inclusion. However, to optimize the production of those oilseeds, it is necessary to gather information on certain practices, such as: the association be tween forms of irrigation and soil mulch and the proper fertilization, taking into account the sensitivity of the culture to boron deficiency . That said, this study was aimed at evaluating the effect of the interaction between irrigation and soil mulch cover types, and the effect of boracic fertilization in sunflower cultivation. The work consisted of two experiments, implanted in a randomized complete block design. The experiment 01 was conducted in the split plots scheme consisting of five irrigation dept hs (25, 50, 75, 100 and 125% of class âAâ pan evaporation) in the plot and four types of soil mulch (straw rice; carnauba straw, wood shaving and without cover) as subplots with three replications. The experiment 02, also in blocks, consisted of five treat ments and five repetitions with the application of 1, 2, 3, 4 and 5 kg. ha-1 of boron in the conventional manner. All the required cultivation (and phytosanitary) practices were carried. The evaluated variables were: plant height, stem diameter, weight of 1000 seeds, average weight of achenes, achene yield potential, oil content of grain and oil yield potential. The data from the evaluated variables was subjected to analysis of variance by F test, and when significant effects were detected, the effects of qualitative nature were compared using Tukey's test and those of quantitative nature were submitted to regression analysis. In experiment 01, all variables showed statistical inference in the face of irrigation depths, except the oil content. In the same exp eriment, the water depth 807.1 mm (125% CAE) gave a maximum yield of 1634.25 kg ha -1. The potential for oil yield in kg ha -1was significantly affected by irrigation water applied with a maximum of 675.88 kg.ha-1 oil (125% CAE). The average oil content of the seeds was found to be 41.38%. The different soil mulches and the interaction between irrigation depths and soil mulches caused no significant effect on the evaluated variables in experiment 02. On the other hand, the plant height and stem diameter weresignificantly influenced by the levels of boron and by the time of data collection, but not by the interaction rates of boron amount versus collection time. The dose of 4 kg,ha-1 of boron maximized the average mass of seeds (48.95 g), the potential productivity of seeds (2442.34 kg ha-1) and potential oil yield (1076.58 kg ha-1). The average oil content of seeds was found to be 43.49%.
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Technical and economic feasibility of ethanol production in cashew apple juice from Saccharomyces cerevisiae flocculant / Viabilidade tÃcnica e econÃmica da produÃÃo de etanol a partir do suco de caju por Saccharomyces cerevisiae floculante

Ãlvaro Daniel Teles Pinheiro 05 May 2015 (has links)
nÃo hà / Given the current situation in which it is the global energy sector, biofuels have been gaining more space, earning special attention the ethanol, which has shown growing demands. From this scenario, the objective of this work was to develop a bioprocess technically and economically practicable for ethanol production from cashew apple juice, using yeast Saccharomyces cerevisiae (CCA008) genetically modified containing a flocculent gene (FLO5α). The work was divided in 4 four stages that are linked throughout the study. In the first stage was evaluated the temperature influence (26, 30, 34, 38 and 42ÂC), the inoculum concentration (3, 5, 8 and 10 g.L-1) and the stirring speed (80, 150, 300, 490, 650 and 800 rpm), so it could be determined the best conditions to maximize ethanol production. It was observed that the temperature operating parameter, the initial cellular concentration, substrate concentration and stirring exerted influence on the alcoholic fermentation of the cashew apple juice. The best performance to the fermentative process (98,8 %) happened when the process was conducted at 34 ÂC, under 150 rpm stirring and 5 g.L-1 of initially cell concentration. The second stage was intended to describe the process efficiency in face of the operation parameters evaluated in fermentation. To this end, it was successfully used statistic models to describe the interaction between the initial substrate concentration, temperature, initial cell concentration, stirring and their possible effects on the yield. The model that best fit the experimental data was used to obtain the optimum conditions from the operating variables, indicating the following conditions as great: substrate concentration (S0) of 102 g.L-1, temperature (T) at 34ÂC, inoculum concentration (X0) of 5 g.L-1 and stirring (Agit) of 140 rpm, predicting a 98,80 % of efficiency. In the third stage was studied ethanol production in optimum conditions, being used to implement the scale up process, in which the data obtained in a 1L bioreactor batch were used to predict the fermentation behavior in a 14L bioreactor batch, using the volumetric power consumption as a parameter to scale-up. Using this factor as being of 10,67 kW/m3, it was possible to calculate the fermenter stirring power in a 14 times bigger volume, as well as foresee which stirring would be necessary so the fermentation can occur, similarly as in the lower volume fermenter. Results showed that yield from the 14L bioreactor were satisfactory, having a small difference (96,56 %  0,3 %) between yield from the 1L bioreactor (98,80 %  1,6 %). The fourth and last stage was rated the technical and economic viability of the process. Analyzing results, it is possible to say the industrial process here proponed has shown technical viability, since the value obtained for the process yield (68 L/ton), was close to sugar cane fermentation (61 â 72 L/ton). However, it did not show economic viability since the industrial unity provides negative cash flow (- R$ 93.840.874) in the end of 10 years that was analyzed. So, new studies must be conducted in order to make this process economically viable, this possibility being observed in various scenarios generated in analyzing the sensibility of process, which presents possible economically viable settings. / Diante da conjuntura atual em que se encontra o setor energÃtico mundial, os biocombustÃveis vÃm ganhando cada vez mais espaÃo, merecendo atenÃÃo especial o etanol, o qual apresenta demanda crescente. A partir desse cenÃrio, o objetivo do presente trabalho foi desenvolver um bioprocesso tecnicamente e economicamente viÃvel para produÃÃo de etanol a partir do suco de caju, utilizando levedura Saccharomyces cerevisiae (CCA008) geneticamente modificada contendo gene floculante (FLO5α). O trabalho foi dividido em 4 quatro etapas que se interligam durante todo o estudo. Na primeira etapa foi avaliada a influÃncia da temperatura (26, 30, 34, 38 e 42ÂC), da concentraÃÃo de inÃculo (3, 5, 8 e 10 g.L-1) e da velocidade de agitaÃÃo (80, 150, 300, 490, 650 e 800 rpm) para que as condiÃÃes Ãtimas que maximizam a produÃÃo de etanol, fossem determinadas. Observou-se que os parÃmetros operacionais de temperatura, concentraÃÃo celular inicial, concentraÃÃo de substrato e agitaÃÃo exerceram influÃncia na fermentaÃÃo alcoÃlica do suco de caju. O melhor rendimento para o processo fermentativo (98,8 %) ocorreu quando o processo foi conduzido a 34 ÂC, sob agitaÃÃo de 150 rpm e contendo incialmente 5 g.L-1 de cÃlulas. Na segunda etapa, pretendeu-se descrever o rendimento do processo em funÃÃo dos parÃmetros operacionais avaliados na fermentaÃÃo. Para tanto, utilizaram-se, com sucesso, modelos estatÃsticos para descrever a interaÃÃo entre a concentraÃÃo inicial de substrato, temperatura, concentraÃÃo celular inicial, agitaÃÃo e seus possÃveis efeitos no rendimento. O modelo que melhor se ajustou aos dados experimentais foi utilizado na obtenÃÃo das condiÃÃes Ãtimas das variÃveis operacionais, indicando as seguintes condiÃÃes como Ãtimas: concentraÃÃo de substrato (S0) de 100 g.L-1, temperatura (T) igual a 34 ÂC, concentraÃÃo de inÃculo (X0) igual a 5 g.L-1 e agitaÃÃo (Agit) de 140 rpm, predizendo um rendimento de 98,80 %. Na terceira etapa, realizou-se o estudo da produÃÃo de etanol nas condiÃÃes Ãtimas, sendo as mesmas utilizadas para implementar a ampliaÃÃo de escala do processo, na qual os dados obtidos em biorreator batelada de 1L foram utilizados para predizer o comportamento da fermentaÃÃo em biorreator batelada de 14L, utilizando a potÃncia por unidade de volume como parÃmetro de scale-up. Utilizando tal fator como sendo de 10,67 kW/m3, foi possÃvel calcular a potÃncia de agitaÃÃo do fermentador de volume 14 vezes maior, assim como prever qual agitaÃÃo seria necessÃria para que a fermentaÃÃo ocorresse de forma semelhante à ocorrida no fermentador de menor volume. Os resultados mostraram que o rendimento obtido no biorreator de 14L foi satisfatÃrio, apresentando uma pequena diferenÃa (96,56 %  0,3 %) para o biorreator de 14L em relaÃÃo ao rendimento obtido para o de 1L (98,80 %  1,6 %). Como quarta e ultima etapa, avaliou-se a viabilidade tÃcnica e econÃmica do processo. Analisando os resultados obtidos, à possÃvel afirmar que o processo industrial proposto apresentou viabilidade tÃcnica, uma vez que o valor obtido para o rendimento do processo (68 L/ton), foi prÃximo ao da fermentaÃÃo da cana-de-aÃÃcar (61 â 72 L/ton). Contudo, o mesmo nÃo apresentou viabilidade econÃmica, uma vez que a unidade industrial proporciona um fluxo de caixa negativo (- R$ 93.840.874) ao final dos 10 anos em que foi analisado. Assim, novos estudos devem ser realizados com o intuito de tornar tal processo economicamente viÃvel, sendo esta possibilidade observada nos vÃrios cenÃrios gerados na anÃlise de sensibilidade do processo, o qual apresenta possÃveis configuraÃÃes economicamente viÃveis.

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