CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os estÃgios iniciais da formaÃÃo das lesÃes de cÃrie em humanos estÃo relacionados
diretamente com a presenÃa de Streptococcus mutans no biofilme dental. O tratamento das
doenÃas ocasionadas por biofilmes orais envolve basicamente a remoÃÃo mecÃnica e o uso
de antibiÃticos e agentes anti-sÃpticos os quais podem originar cepas resistentes aos
antimicrobianos tradicionais. A Terapia FotodinÃmica Antimicrobiana (TFDA) apresenta-se
como uma opÃÃo alternativa ao tratamento clÃssico, promovendo a morte bacteriana por
meio da fotossenssibilizaÃÃo dos componentes microbianos. O objetivo dessa dissertaÃÃo
foi avaliar o potencial antimicrobiano da TFDA e sua capacidade de alterar o padrÃo
de expressÃo gÃnica de Streptococcus mutans em biofilmes orais produzidos in vitro
utilizando para tanto um diodo emissor de luz (LED) associado ao
fotossenssibilizador azul de orto-toluidina (TBO). Para tanto biofilmes de .S. mutans
UA159, foram formados sobre discos de hidroxiapatita utilizando um modelo de
banhos de cultura e submetidos a TFDA apÃs 5 dias. O material coletado passou por
um processo de disrrupÃÃo para a dispersÃo das cÃlulas e diluiÃÃo em sÃrie decimal, apÃs
o que foi plaqueado em meio de cultura e incubado em condiÃÃes ideais de
crescimento. Adicionalmente, e expressÃo dos genes de virulÃncia gtfB, gtfC e gbpB
de S. mutans foram avaliados apÃs a extraÃÃo do RNA total, sÃntese de cDNA e
realizaÃÃo da tÃcnica da reaÃÃo da polimerase em cadeia em tempo real utilizando
primers especÃficos. O gene ribossomal 16S foi utilizado com gene de referÃncia..
ReduÃÃes significativas (p<0,05) foram observadas na viabilidade das colÃnias de S. mutans
quanto exposto ao TBO e LED. A expressÃo gÃnica de gtfC em biofilme de S. mutans
foi significantemente reduzida apÃs a realizaÃÃo da terapia fotodinÃmica
antimicrobiana enquanto a expressÃo de gtfB parece ter sido menos influenciada
pela terapia. NÃo houve alteraÃÃes na expressÃo de gbpB em funÃÃo da terapia
fotodinÃmica antimicrobiana. Assim, outros estudos sÃo necessÃrios para avaliar
aÃÃo da terapia fotodinÃmica antimicrobiana em condiÃÃes mais semelhantes
daquelas encontradas no ambiente clÃnico, bem como para favorecer o entendimento
de seus efeitos na expressÃo de importantes genes de virulÃncia de S. mutans. / The early stages of the formation of caries lesions in humans are directly related to the
presence of Streptococcus mutans in biofilm. The treatment of diseases caused by oral
biofilms basically involves mechanical removal and use of antibiotics and antiseptic
agents which may lead to strains resistant to traditional antimicrobials. Antimicrobial
Photodynamic Therapy (PACT) presents itself as an alternative option to conventional
treatment, promoting bacterial killing by photosensitizing of microbial components. The
objective of this study was to evaluate the antimicrobial potential of PACT and its
ability to alter the pattern of gene expression of S. mutans in oral biofilms produced in
vitro using both a LED light (LED) associated with the photosensitizer ortho-toluidine
blue ( TBO). To this end, S. mutans UA159 biofilms were formed on hydroxyapatite
discs using a model of bathing culture and were subjected to PACT after 5 days. The
collected material has gone through sonication for dispersion and dilution of cells in
decimal series. After that, material was plated in rich medium and incubated under
optimum growth conditions. Additionally, expression of virulence gtfB, and gtfC gbpB
genes of S. mutans were evaluated after extraction of total RNA, cDNA synthesis and
realization of the technique of polymerase chain reaction in real time using specific
primers. The 16S ribosomal gene was used as the reference gene. Significant reductions
(p <0.05) were observed in the viability of colonies of S. mutans when exposed to TBO
and LED at the same time. Gene expression of gtfC in S. mutans biofilm was
significantly reduced after the completion of antimicrobial photodynamic therapy,
whereas expression of gtfB seems to have been less influenced by therapy. No change in
the expression of gbpB a function of antimicrobial photodynamic therapy was observed.
Therefore, further studies are needed to evaluate the action of antimicrobial
photodynamic therapy in conditions more like those found in the clinical environment
and to encourage understanding of their effects on the expression of important virulence
of S. mutans genes.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:4005 |
| Date | 10 January 2011 |
| Creators | Eliane dos Santos Pereira |
| Contributors | Iriana Carla Junqueira Zanin, Francisco Cesar Barroso Barbosa |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Biotecnologia (Campus da UFC em Sobral-CE), UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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