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Previous issue date: 2014-06-09 / A dengue ? a mais importante arbovirose da atualidade, sendo transmitida pela picada do mosquito Aedes aegypti. A aus?ncia de uma vacina profil?tica torna o controle da dengue pautado principalmente no controle do inseto vetor. Todavia os crescentes relatos de resist?ncia e os danos ambientais causados pelos inseticidas qu?micos t?m tornado urgente ? busca por alternativas seguras. Foram preparados 21 extratos brutos (EB) de sementes de plantas da Caatinga. Como extrator foi utilizado o fosfato de s?dio 50mM pH 8.0. Os extratos foram utilizados em bioensaios Aedes aegypti, ensaios de toxicidade e submetidos a uma caracteriza??o parcial para identificar a presen?a de mol?culas bioativas. As an?lises inseticidas foram realizadas por probit e as diferen?as entre os grupos foram constatada por Student?s t-test e ANOVA. Todos os extratos apresentaram atividade larvicida para L1 e L4 e, com exce??o do extrato de G. americana, levaram ao ?bito 100% das larvas (48h). Os EB de M. urundeuva, P. viridiflora, E. velutina, A. cearenses e E. contortisiliquum apresentaram os melhores resultados larvicidas. Do mesmo modo, todos os EB foram repelentes para a postura das f?meas gr?vidas. Os EB de D. grandiflora, E. contortisiliquum, A. cearenses, C. ferrea e C. retusa foram capazes de atrair as f?meas para a posturas quando em baixas concentra??es. Na concentra??o atrativa o EB de E. contortisiliquum foi capaz de levar a ?bito 52% das larvas L1 em 48 h, enquanto que o EB de A. cearenses resultou na morte de 100% dessas larvas em 24h. Os extratos de A. cearenses, P. viridiflora, E. velutina, M. urundeuva e S. brasiliensis tiveram atividade pupicida, enquanto que os extratos de P. viridiflora, E. velutina, E. contortisiliquum, A. cearenses, A. colubrina, D. grandiflora, B. cheilantha, S. spectabilis, C. pyramidalis, M. regnelli e G. americana tiveram a??o adulticidas. Todos os extratos apresentaram toxicidade para C. dubia e os EB de E. velutina e E. contortisiliquum n?o interferiram na viabilidade dos fibroblastos. Considerando todos os ensaios biol?gicos os extratos de A. cearenses, P. viridiflora, E. contortisiliquum, S. brasiliensis, E. velutina e M. urundeuva foram considerados os mais promissores. Em todos os extratos foram identificadas pelo menos duas prote?nas com potencial. O EB de E. contortisiliquum foi selecionado para ser fracionando, j? que n?o apresentou atividade pupicida, indicando que seu mecanismo de a??o larvicida e adulticida resultou da ingest?o de compostos ativos pelos insetos. Al?m disso, esse extrato apresentou o maior teor de prote?na (22 mg/mL) e a maior atividade inibit?ria para as tripsinas das larvas de A. aegypti. Como observado para o EB, as fra??es proteicas de E. contortisiliquum, tamb?m apresentaram atividade larvicida, mas n?o foram pupicida, com destaque para F2 que apresentou maio atividade larvicida e menor toxicidade ambiental do que o EB de origem. A redu??o na atividade proteol?tica das larvas alimentadas com o EB e as fra??es de E. contortisiliquum sugeriu que inibidores de tripsina seriam os respons?vel pela atividade larvicida. Embora o aumento na purifica??o de um inibidor de tripsina de E. contortisiliquum (ITEc) tenha resultado na perda da atividade larvicida, foi constatado que sua aus?ncia reduziu a efic?cia das fra??es, indicando que o ITEc contribui, mas n?o ? suficiente para a atividade larvicida do EB de E. contortisiliquum. Tamb?m n?o foi verificada atividade larvicida e adulticida na fra??o rica em vicilina, e nem evid?ncias da contribui??o dessa mol?cula para a atividade inseticida desse extrato. Os resultados mostram o potencial dos extratos salinos de sementes de planta da Caatinga e, em especial do EB e da F2 de E. contortisiliquum, no controle da popula??o de A. aegypti e indicam que a efic?cia desses extratos deve resultar da a??o conjunta de diferentes compostos ativos, inclusive de natureza proteica, que atuando em diferentes mecanismos s?o capazes de comprometer a viabilidade dos insetos e retardar o surgimento de resist?ncias. / Dengue fever, currently the most important arbovirus, is transmitted by the
bite of the
Aedes aegypti
mosquito. Given the absence of a prophylactic vaccine, the
disease can only be controlled by combating the vector insect. However, increasing
reports of resistance and environmental damage caused by insecticides have led to the
urgent search for new safer
alternatives.
Twenty
-
um
plant s
eed extracts from the
Caatinga
were prepared
, tested and
characterized
. Sodium phosphate (
50
mM pH 8.0)
was used as extractor. All extracts showed larvicidal
and
ovipositional deterrence
activity
.
Extracts of
D.
grandiflora,
E. contortisiliquum, A. cearenses
,
C. ferrea
and
C.
retusa
were able to attract females for posture when in low co
ncentration
. In the
attractive concentrations, the CE of
E. contortisiliquum
and
A. cearenses
were
able to
kill 52%
and 100% of the larvae
respectively
. The extracts of
A. cearenses
,
P.
viridiflora, E. velutina,
M. urundeuva
and
S. brasiliensis
were also pupicides, while
extracts of
P. viridiflora, E. velutina,
E. contortisiliquum
,
A. cearenses, A. colubrina,
D.
grandiflora
,
B. cheilantha
,
S. spectabilis, C. pyramidalis,
M. regnelli
e
G. americana
displayed adulticidal activity.
All extracts were toxic to
C. dubia
zooplankton
.
The EB
of
E. velutina
and
E. contortisiliquum
did not affect the viability of fibroblasts
.
In all
extracts were identified at least two potential insecticidal proteins such as enzyme
inhibitors, lectins and chitin
-
binding proteins and components of secondary metabolism
.
Considering all bioassays
, the extracts from
A. cearenses, P. viridiflora, E.
contortisiliquum
,
S. brasiliensis,
E.
velutina
and
M. urundeuva
were considered the
most promising
.
The
E. contortisiliquum
extracts was the only one who did not show
pupicida activity, indicating that its mechanism of action larvicide
and adulticidal
is
related only to the ingesti
on of toxic compounds by insect
,
so it was selected to be
fragmenting.
As observed for the CE
, th
e protein fractions of
E. contortisiliquum
also
showed larvicidal activity, highlighting that F2 showed higher larvicidal activity and
lower en
vironmental toxicity than the CE
source.
The reduction in the proteolytic
activity of larvae fed with crude extra
ct and fractions of
E. contortisiliquum
suggest
ed
that the trypsin inhibitors (
ITEc) would be resp
onsible for larvicidal activity
. However
the increase in the purification of this inhibitor resulted
in loss of larvicidal activity
, but
the absence
of
trypsin inhibitor
reduced the
effectiveness of the fractions
, indicating that
the ITEC contributes to the larvicidal activity of this extract. Not been observed
larvicidal activity and adulticide in rich fraction vicilin, nor evidence of the contribution
o
f this molecule for the larvicidal activity of the extract. The results show the potential
of seeds from plant extracts of Caatinga as a source of active molecules against insects
A. aegypti
at different stages of its development cycle, since they are comp
osed of
different active compounds, including protein nature, which act on different
mechanisms should result in the death of insec
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/19653 |
| Date | 09 June 2014 |
| Creators | Barbosa, Patricia Batista Barra Medeiros |
| Contributors | 20007256434, http://lattes.cnpq.br/4231925509338101, Medeiros, Caroline Addison Carvalho Xavier de, 00830788433, http://lattes.cnpq.br/2982271986555450, Rocha, Hugo Alexandre De Oliveira, 76111830449, http://lattes.cnpq.br/4651814546820796, Dantas, Iron Macedo, 36555150491, http://lattes.cnpq.br/6446119209274157, Paiva, Patr?cia Maria Guedes, 36565431434, http://lattes.cnpq.br/2885145995086459, Uchoa, Adriana Ferreira, Ximenes, Maria de F?tima Freire de Melo |
| Publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Norte, PROGRAMA DE P?S-GRADUA??O EM BIOQU?MICA, UFRN, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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