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Previous issue date: 2018-02-23 / A fotobiomodulação (PBM) estimula a proliferação de diferentes tipos celulares,
incluindo células-tronco. A células-tronco da polpa do dente decíduo esfoliado
(SHEDs) apresentam um potencial de diferenciação maior do que as demais célulastronco
mesenquimais, sendo o foco de diversas pesquisas na área da engenharia
tecidual. Para que as células proliferarem e se diferenciem in vitro é necessário o
desenvolvimento de um microambiente favorável, o qual pode ser fornecido por um
biomaterial que mimetize a matriz extracelular natural, destacando-se para esta
finalidade o ácido poliláctico (PLA) por suas propriedades de biocompatibilidade e
biodegradabilidade, além do baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito
da PBM em diferentes doses na proliferação e viabilidade de SHEDs cultivadas sobre
arcabouços bidimensionais de PLA. As SHEDs foram cultivadas sobre os filmes e
divididas em três grupos: (C) controle não irradiado; (L1) irradiadas com dose de 1
J/cm2; e (L4) irradiadas com dose de 4 J/cm2. As irradiações foram realizadas com
laser diodo InGaAlP, com comprimento de onda de 660 nm e potência de 30 Mw, em
dose única. A viabilidade e a proliferação celular foram avaliadas nos intervalos de 24,
48 e 72 horas após a irradiação, através do ensaio do Alamar Blue, enquanto a
morfologia e a distribuição das células na superfície dos filmes foram avaliadas por
MEV no intervalo de 72 horas. Os dados quantitativos foram submetidos a testes
estatísticos não paramétricos. Os dados do ensaio do Alamar Blue mostraram que os
grupos L1 e L4 exibiram uma maior proliferação celular em comparação ao grupo C,
sendo as diferenças significativas entre L1 e C em 48 e 72 h (p<0,0001) e entre L4 e
C em 24 (p<0,01), 48 (p<0,001) e 72 h (p<0,0001). O percentual de redução do Alamar
blue mostrou-se significativamente maior em L4 em comparação com L1 em 24 e 72
h (p<0,05). A análise das amostras por MEV mostrou que nos grupos irradiados as
células apresentavam uma distribuição mais homogênea ao longo da superfície dos
filmes e uma maior densidade celular em comparação com o grupo C, sendo esta
diferença ainda mais evidente no grupo L4. Conclui-se que a PBM nos parâmetros
estudados, especialmente na dose de 4 J/cm2, estimula a proliferação de SHEDs em
contato com filmes de PLA, constituindo assim uma ferramenta metodológica com
potencial aplicação nas técnicas de engenharia tecidual / Photobiomodulation (PBM) stimulates the proliferation of different cell types,
including stem cells. Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHEDs)
present a greater differentiation potential compared to other mesenchymal stem cells,
being the focus of several studies in the field of tissue engineering. In order for cells to
proliferate and differentiate in vitro it is necessary to develop a favorable
microenvironment, which can be provided by a biomaterial that mimics the natural
extracellular matrix, with polylactic acid (PLA) being distinguished for this purpose due
to its properties of biocompatibility and biodegradability, as well as low cost. The aim
of this study was to evaluate the effect of PBM in different doses on the proliferation
and viability of SHEDs cultured on two-dimensional PLA scaffolds. SHEDs were
cultured on the films and divided into three groups: (C) non-irradiated control; (L1)
irradiated with a dose of 1 J/cm2; and (L4) irradiated with a dose of 4 J/cm2. The
irradiations were performed with an InGaAlP diode laser, with wavelength of 660 nm
and power of 30 Mw, in a single dose. Cell viability and proliferation were evaluated at
24, 48 and 72 h after irradiation by Alamar Blue assay, while cell morphology and
distribution on the surface of the films were evaluated by SEM at 72 hours. The
quantitative data were submitted to non-parametric statistical tests. Data from Alamar
blue assay showed that groups L1 and L4 exhibited greater cell proliferation compared
to group C, with significant differences between L1 and C at 48 and 72 h (p<0.0001)
and between L4 and C in 24 (p<0.01), 48 (p<0.001) and 72 h (p<0.0001). The
percentage of reduction of Alamar blue was significantly higher in L4 compared to L1
at 24 and 72 h (p<0.05). Analysis of the samples by SEM showed that in the irradiated
groups the cells had a more homogeneous distribution along the surface of the films
and a higher cell density compared to the group C, with this difference being even
more evident in the group L4. We conclude that PBM in the studied parameters,
especially with the dose of 4 J/cm2, stimulates the proliferation of SHEDs in contact
with PLA films, thus constituting a methodological tool with potential application in
tissue engineering techniques.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/25329 |
| Date | 23 February 2018 |
| Creators | Macedo, Rômulo Augusto de Paiva |
| Contributors | 67269621420, Moura, Carlos Eduardo Bezerra de, 03597959431, Miguel, Márcia Cristina da Costa, 82134731400, Barboza, Carlos Augusto Galvão |
| Publisher | PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM PATOLOGIA ORAL, UFRN, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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