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Analise histopatologica e estudo da expressão de PCNA, p53, AgNOR e de metaloproteinases de matriz no basaloide escamoso da cavidade oral

Cotrim-Zuniga, Ana Paola 03 September 2001 (has links)
Orientador : Ricardo Della Coletta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T17:20:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cotrim-Zuniga_AnaPaola_M.pdf: 4226359 bytes, checksum: 5a85df88e82572be6c9ea59dcdd47a85 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Carcinoma Basalóide Escamoso (CBE) é uma variante pouco comum, porém muito agressiva do Carcinoma Espinocelular (CEC) que acomete preferencialmente o trato aerodigestivo superior. Relatamos 2 casos de CBE comparando seu potencial de proliferação e invasividade com CEC indiferenciados com igual localização e estado TNM, de pacientes com mesma idade e sexo. A classificação dos tumores foi feita pela análise das caracteristicas histopatológicas com auxilio das colorações de hematoxilina e eosina (HE), ácido periódico de schiff (PAS), alcian blue e reação de imunohistoquímica demonstrando a presença de laminina. A atividade de proliferação foi estudada pelos métodos quantitativos e morfológicos de AgNORs (região organizadora nucleolar arginofílica), análise imunohistoquímica da expressão de PCNA (antígeno nuclear de proliferação celular) além da determinação do índice mitótico e o potencial de invasão foi avaliado pela reação em cadeia de polimerase - transcriptase reversa (RT -PCR) para metaloproteinases de matriz (MMPs). A presença de mutações de p53 foi também verificada por imunohistoquímica. As características histológicas foram semelhantes as previamente descritas. Os índices de AgNOR e PCNA foram significativamente mais altos nos casos de CBE comparando com os casos de CEC. Imunohistoquímica.para a proteína p53 mostrou uma maior quantidade de células positivas, além de uma coloração mais intensa nos CBEs que nos CECs. RT-PCR mostrou maior expressão de MMP-1, MMP-2 e MMP-9 nos CBEs. Esses resultados sugerem que os CBEs apresentam um comportamento mais agressivo que os CECs indiferenciados / Abstract: Basaloid squamous carcinoma (BSC) is an uncommon aggressive variant of squamous cell carcinoma (SCC) with a predilection for the head and neck. In the English literature, approximately 40 cases of BSC have been described in the oral cavity. In this study, clinicopathol99ic features of 2 cases of BSC affecting the buccal mucosa are discribed. Additionally, we compared the proliferative and invasive potential of BSC cells with poorly-differentiated SCC, matched for age, sex, site and TNM status. Proliferative activity was studied by the argyrophilic nuclear organizer region (AgNOR) method and immunohistochemical quantification of proliferating cell nuclear antigen (PCNA). The invasive potential was evaluated by semi-quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) for matrix metalloproteinases (MMPs). Alterations of p53 and the presence of laminin were also investigated by immunohistochemistry. The tumors showed many clinical and histopathologic similarities to cases previously reported. The AgNOR and PCNA indices were significantly higher in both cases of BSC than in SCC. Immunostaining for the p53 protein showed a higher percent of positive cells, and more intense staining in the BSC than in the SCC tissues. RT-PCR studies clearly demonstrated that the expression of MMP-1, MMP-2, and MMP-9 were higher in cells from BSCs than from SCCs. Taken together, the data described here are compatible with the concept that BSC has a more aggressive biologic behavior than the conventional SCC / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental
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Relação entre estadiamento, características histopatológicas, proliferação celular e prognóstico de carcinoma espinocelular de língua

Carvalho, Ana Luísa Saraiva Homem de January 2005 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar a correlação entre parâmetros clínicos (TNM), graduação histopatológica, número de AgNORs por núcleo e expressão de Ki-67 na zona de invasão com o prognóstico de carcinoma espinocelular de língua. Foram selecionados dez casos de carcinoma espinocelular de língua e divididos em dois grupos: bom prognóstico (ausência de metástases á distância e/ou regionais, sobrevida livre de doença) e mau prognóstico (presença de metástases, recidiva, óbito). O material de biópsia foi submetido às técnicas de hematoxilina/eosina, de impregnação pela prata para evidenciação das NORs e de detecção imunohistoquímica do antígeno de proliferação nuclear Ki-67. Concluiu-se que T4 por si só já é um indicador de mau prognóstico e que nos tumores de grau II, a proliferação celular pode refletir o prognóstico do tumor.
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Relação entre estadiamento, características histopatológicas, proliferação celular e prognóstico de carcinoma espinocelular de língua

Carvalho, Ana Luísa Saraiva Homem de January 2005 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar a correlação entre parâmetros clínicos (TNM), graduação histopatológica, número de AgNORs por núcleo e expressão de Ki-67 na zona de invasão com o prognóstico de carcinoma espinocelular de língua. Foram selecionados dez casos de carcinoma espinocelular de língua e divididos em dois grupos: bom prognóstico (ausência de metástases á distância e/ou regionais, sobrevida livre de doença) e mau prognóstico (presença de metástases, recidiva, óbito). O material de biópsia foi submetido às técnicas de hematoxilina/eosina, de impregnação pela prata para evidenciação das NORs e de detecção imunohistoquímica do antígeno de proliferação nuclear Ki-67. Concluiu-se que T4 por si só já é um indicador de mau prognóstico e que nos tumores de grau II, a proliferação celular pode refletir o prognóstico do tumor.
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Relação entre estadiamento, características histopatológicas, proliferação celular e prognóstico de carcinoma espinocelular de língua

Carvalho, Ana Luísa Saraiva Homem de January 2005 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar a correlação entre parâmetros clínicos (TNM), graduação histopatológica, número de AgNORs por núcleo e expressão de Ki-67 na zona de invasão com o prognóstico de carcinoma espinocelular de língua. Foram selecionados dez casos de carcinoma espinocelular de língua e divididos em dois grupos: bom prognóstico (ausência de metástases á distância e/ou regionais, sobrevida livre de doença) e mau prognóstico (presença de metástases, recidiva, óbito). O material de biópsia foi submetido às técnicas de hematoxilina/eosina, de impregnação pela prata para evidenciação das NORs e de detecção imunohistoquímica do antígeno de proliferação nuclear Ki-67. Concluiu-se que T4 por si só já é um indicador de mau prognóstico e que nos tumores de grau II, a proliferação celular pode refletir o prognóstico do tumor.
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A genetica da hipertensão arterial modifica a resposta na replicação de celulas renais induzida por diabetes experimental

Silveira, Lilia Aikawa da 29 June 2001 (has links)
Orientador: Jose Butori Lopes de Faria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T22:41:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_LiliaAikawada_M.pdf: 13028926 bytes, checksum: 60007686a1ea56bb40f0135ab7b921dd (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Com a finalidade de estudar se a genética da hipertensão modifica os eventos celulares renais observados no diabetes mellitus experimental, estudou-se a replicação celular renal e sua regulação por um inibidor de quinase dependente de ciclina (CDK), o p27Kipl,em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) em fase pré-hipertensão e seus controles geneticamente normotensos, os ratos Wistar Kyoto (WKY), com diabetes mellitus induzido por estreptozotocina. A injeção de estreptozotocina foi administrada nos animais com 4 semanas de idade e os estudos realizados apóslO dias de duração do diabetes. A replicação celular foi estimada pela incorporação de bromodeoxiuridina (BrdU), um análogo da timidina que liga-se ao DNA na fase de síntese, através da técnica de imunohistoquímica...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: To mvestigate if the genetics of hypertension modifies the renal cell events in experimental diabetes mellitus we studied the renal cell replication and its regulation by a cyclin-dependent kinase (CDK) inhibitor, p27KiPI, in pre-hypertensive spontaneously hypertensive rats (SHR) and their genetically normotensive counterparts, Wistar Kyoto (WKY) rats with streptozotocin induced diabetes mellitus. Animals received streptozotocin mjection at 4 weeks of age and the experiments were performed after 10 days of duration of diabetes. The number of replicating cells was assessed by incorporation of bromodeoxyuridIDe(BrdU), a thymidme analogue that incorporates to DNA m S phase, using immunohistochemistry technique...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Valor prognostico dos marcadores de imuno-histoquimica e biologia molecular nos pacientes com hepatoblastoma na infancia

Aguiar, Simone dos Santos 12 May 2003 (has links)
Orientador: Silvia Regina Brandalise / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:28:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aguiar_SimonedosSantos_M.pdf: 8033437 bytes, checksum: 0ffdc5bfb94dfb7c6122cb59ab652e06 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O hepatoblastoma é um tumor embrionário raro (1:1.000.000 nacimentos) , representando o tumor hepático mais freqüente em crianças com idade menor que 3 anos. A importância da histopatologia e o prognóstico do hepatoblastoma é conhecida na literatura , sendo o tipo histológico fetal puro o de melhor prognóstico. Com o desenvolvimento da imuno-histoquímica (llI) e da biologia molecular , nova compreensão dos hepatoblastomas pode ser delineada através de expressões protéicas específicas , cuja relação com o subtipo histopatológico precisa ainda ser elucidada. Objetivos: Este trabalho procurou verificar a associação entre os achados histopatológicos e os marcadores de IH ao diagnóstico e no momento cirúrgico, após o uso de quimioterapia (QT) , com a sobrevida global e livre de eventos, dos pacientes portadores de hepatoblastoma na infância. Material e Métodos: Foram analisados os espécimes do tumor hepático de 21 pacientes, com revisão do diagnóstico histológico por pelo menos dois patologistas experientes. Para a pesquisa da expressão do PCNA , do Ki-67 , do p53 ,da ~-Catenina ,do c-erb-B2 e da glicoproteína P , foi utilizada a técnica de IH . As determinações destas expressões protéicas foram realizadas ao diagnóstico, e no momento cirúrgico, após o 40 ciclo de QT. A análise da expressão do p53 também foi rea1i7~da pela técnica de FISH em 8 pacientes. Quatorze pacientes eram do sexo feminino e 7 do masculino , com idade média ao diagnóstico de 13 meses. Resultados:A expressão do PC NA foi positiva em 100% dos casos avaliados ao diagnóstico, sendo negativo em apenas um paciente no momento cirúrgico. Nos tumores do tipo histológico fetaVembrionário o valor da positividade do PCNA variou de 27% a 52,2% ao diagnóstico, e de 8,2% a 90% no momento cirúrgico . Nos tumores do tipo fetal puro, esta variação foi de 20% a 75,2% ao diagnóstico e, no momento cirúrgico de 4,8% a 29,4%. A ~-CateDiDa apresentou expressão positiva em 59% dos casos ao diagnóstico e 87% no momento cirúrgico.Ao diagnóstico, a expressão do Ki-67 variou de 7% a 43,6% , tornando-se negativo no momento cirúrgico em 84% dos casos. Em 15 pacientes, a positividade do Ki-67 ao diagnóstico estava associada com sobrevida livre de eventos em 12 anos de 66,7% (p=O,OI). A expressão do p53 por IH foi avaliada em 17 casos, sendo negativa em 16 deles. A expressão gênica do p53 pela técnica de FISH foi avaliada em 8 casos, sendo positiva em 5 . Apenas 1 caso apresentou resultados positivos para o p53 nas duas técnicas empregadas. Ao diagnóstico a GpP foi positiva em 2 casos. A expressão negativa da GpP em 10 pacientes, no momento cirúrgico, está associada à sobrevida global em 12 anos de 70% (P=0,67). Os pacientes com expressão positiva do c-erb-B2 ao diagnóstico tiveram sobrevida global de 87,5% em 8 anos , enquanto aqueles com expressão negativa deste marcado r obtiveram sobrevida global de 33,3% (p=0,02). Conclusões. A expressão positiva do c-erb-B2 , ao diagnóstico, teve valor prognóstico, determinando taxas de sobrevida em 8 anos de 87,5 (p=O.02). A expressão positiva do Ki-67 ao diagnóstico, também se associou com melhor prognóstico, determinando taxas de sobrevida global em 12 anos de 66,7% (P=0,01). A expressão dos demais marcadores não se correlacionou com o prognóstico destes pacientes. O subtipo histológico fetal puro teve importância prognóstica , sendo variável independente de risco (p=O.02) / Abstract: Hepatoblastoma is a rare embrionary tumor (1:1.000.000/ new births) , being the most frequent liver tumor in children under the age of 3 years . The pathology prognostic value is well determined in the literature . Tumors with fetal type have the best prognosis. With the advances of immunohistochernical (IR) and biology markers , a new comprehension about this tumor still need to be known. Objectives: The present study investigated the relationship between the pathology results and IH findings , at the moment of diagnosis and surgery after the 4th cycle of chemotherapy (CREMO) with the overall survival rates (OS) and event free survival (EFS) of pediatric hepatoblastoma patients (pts). Patients and Methods: Twenty one pediatric hepatoblastoma's specimens had the hystological subtype reviewed at least for 2 experimented pathologysts. To evaluate the protem expression for PCNA, Ki-67 , p53 , ~-Catenin, c-erb-B2 and Glycoprotem P (GpP) IR techniques were performed at the moment of diagnosis and after CREMO (surgery time). The p53 analysis was also done by FISH m 8 pts. Fourteen pts were female and 7 male , with the median age at diagnosis of 13 months . ResuIts . One hundred per cent ofthe pts had overexpression ofPCNA at the moment of diagnosis , being negative in just one pt at surgery time .Considering tumors with hystological fetal/embryonal type , the PCNA labeling index ranged ftom 27% to 52.2% at diagnosis , and ftom 8.2% to 90% at surgery .In those eases with the fetal type , this positivity was ftom 20% to 75.2% at diagnosis , and ftom 4.8% to 29.4% at surgery . Overexpression of ~-Catenin at the moment of diagnosis was deteeted in 59% ofthe pts and in 87% ofthem at surgical time. Ki-67 ranged ftom 7% to 43.6 % and remained nega tive after CREMO, in 10 pts (84%) . The overexpression of Ki-67 at the moment of diagnosis determined an event ftee survival (EFS) of66.7% in 12 years (p= 0.01). One out 21 pts (4.7%) presented p53 over expression by IH , eonfumed by FISH . Controversially, among 57.1 % of pts with nega tive p53 by IR , the overexpression by FISH analysis was defined as positive. Considering GpP positivity at diagnosis , it was detected in 2 pts , being nega tive after CREMO mIO pts. Pts with overexpression of GpP at surgery time had an OS rate of 80% versus 70% for the pts with this negative expression (p=O.67) .So the overexpression ofGpP was not a worse prognosis prediet factor . Finally the overexpression of c-erb-B2 at diagnosis was related with an OS of 87.5% at 8 years , while for those pts with negative expression the OS rate was 33.3% (p=O.02). Conclusion. The overexpression of c-erb-B2 at diagnosis is related to better survival rates in those pts with hepatoblastoma (p=O.02). The overexpression of Ki-67 at diagnosis is a good prognostic factor by determining an OS rate of 66.7% in 12 years (p=O.OI).The overexpression of remaining markers did not correlate with the OS neither EFS rates .According to histology , pts with fetal type had better prognosis (p=O.02) / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente
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Estudo imunohistoquimico das citoqueratinas, do indice de proliferação celular e da resposta inflamatoria na paracoccidioidomicose bucal

Kaminagakura, Estela 29 April 2004 (has links)
Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:53:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kaminagakura_Estela_D.pdf: 2395331 bytes, checksum: 0a1f7bb59a9515dc8659979817aecfb8 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A paracoccidioidomicose (Pmicose) é uma micose sistêmica, comum na América Latina, com apresentação clínica variável. Na sua forma crônica, freqüentemente envolve a mucosa bucal com lesões múltiplas de aspecto moriforme. Microscopicamente, caracteriza-se por hiperplasia pseudoepiteliomatosa (HPE) e resposta inflamatória granulomatosa, além de acúmulos de neutrófilos no epitélio e no conjuntivo. Os objetivos deste trabalho foram descrever, através da imunohistoquímica, a expressão de citoqueratinas (CKs) e a proliferação celular da HPE, assim como a distribuição das células inflamatórias nos tecidos epitelial e conjuntivo. Adicionalmente, foi descrito um caso clínico de Pmicose bucal. HPE foi evidente nos 28 espécimes de Pmicose bucal oriundas da mucosa jugal, lábio, gengiva e palato duro avaliados quanto à expressão de CKs (AE1/AE3, 34j3E12, CK1, CK5, CK6, CK7, CK8, CK10, CK14, CK16, CK18 e CK19) e proliferação celular (Ki-67). Na camada basal, os resultados foram semelhantes para todas as CKs, nos casos de mucosa bucal normal (MBN) e HPEs. As diferenças observadas na camada suprabasal entre a MBN e a Pmicose estão descritas a seguir. Na Pmicose, CK1 e CK10 não foram expressas nas camadas espinhosa e superficial do lábio, gengiva e palato duro; CK14 foi expressa na camada suprabasal da mucosa jugal e lábio; CK6 foi mais freqüentemente expressa apenas na camada espinhosa do lábio, gengiva e palato duro, entretanto a expressão de CK16 foi menor nas camadas espinhosa e superficial da gengiva e palato duro. O índice de proliferação celular foi determinado utilizando-se a marcação imunohistoquímica para Ki-67 e quantificado com o auxílio do analisador de imagem Kontron 400. Os índices de proliferação foram de 7,7 (:t3,6) e 28,2 (:t9,8) para a MBN e HPE, respectivamente. Assim sendo, na HPE a proliferação celular mostrou-se aumentada, resultando no aumento da espessura e diminuição da queratinização. Para comparação, também foram incluídos 13 casos de displasia epitelial bucal de grau moderado, os quais revelaram índice médio de proliferação de 46,0 (:t14,0). Quanto ao infiltrado inflamatório, nos granulomas organizados predominaram as células CD68+, com os linfócitos CD4+ distribuídos na periferia. Nas áreas não granulomatosas, houve equilíbrio entre células CD4+ e CD8+. Linfócitos B (CD20+) estavam esparsamente distribuídos no tecido conjuntivo inflamado. Células dendríticas (8100+) foram observadas no epitélio, assim como no tecido conjuntivo subepitelial e na periferia dos granulomas organizados. Neutrófilos (CD15+) predominaram nos microabscessos intraepiteliais e nas ulcerações. Adicionalmente, descreve-se um caso clínico de Pmicose que apresentou uma lesão crônica, ulcerada e solitária, com aspecto clínico similar ao carcinoma espino celular em rebordo alveolar / Abstract: Paracoccidioidomycosis (Pmycosis) is a common systemic mycosis in Latin America, with variable clinical presentation. The chronic form frequently involves the oral mucosa, showing multiple moriform like lesions. Microscopically, oral Pmycosis is cha_acterized by pseudoepitheliomatous hyperplasia (PEH), and granulomatous inflammatory response, besides polimorphonuclear (PMN) accumulation in the epithelium and connective tissue. This work describes, by immunohistochemistry, cytokeratins (CKs) expression and cellular proliferation in PEH, as well as the distribution of inflammatory cells in the epithelial and connective tissues. Additionally, a clinical case of oral Pmycosis is described. PEHs were evident in ali 28 oral Pmycosis specimens from the buccal mucosa, lip, gingiva and hard palate used to study CKs expression (AE1/AE3, 34_E12, CK1, CK5, CK6, CK7, CK8, CK10, CK14, CK16, CK18 and CK19) and cell proliferation (Ki-67). In the basal cell layer, the results were similar for ali CKs, in normal oral mucosa (NOM) and PEHs. Differences found in the suprabasal layer of NOM and PEH are described below. In Pmycosis, CK1 and CK10 were not expressed in spinous and superficial layers of the lip, gingiva and hard palate. CK14 was positive in suprabasallayer of the buccal mucosa and lip. CK6 was more frequently expressed in spinous layer of the lip, gingiva and hard palate, nevertheless CK16 expression was decreased in the spinous and superficial layers of the gingiva and hard palate. Cellular proliferation index was determined by Ki-67 immunostaining and quantification with the aid of an image analyzer system (Kontron 400). The proliferation index was 7.7 (:t3.6) and 28.2 (:t9.8) for NOM and PEH, respectively. Therefore in PEH, epithelial proliferation was increased, resulting in a thicker and parakeratotic epithelium. Proliferative index of moderate oral dysplasia, included for comparison was 46.0 (:t14.0). Organized granulomas showed a predominance of CD68+ cells, with CD4+ cells at the periphery. Similar number of CD4+ and CD8+ cells were found in non granulomatous areas. B Iymphocytes (CD20+) were sparsely distributed throughout the connective tissue. Dendritic cells (S100+) were found in the epithelium, sub-epithelial connective tissue and periphery of organized granulomas. PMN (CD15+) predominated in areas of intraepithelial microabscesses and ulcerations. Additionally, a clinical case of Pmycosis is described that showed a solitary chronic ulcerated lesion, similar to a spinous cell carcinoma of the alveolar ridge / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia
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Analise da produção e atividade da enzima Acido Graxo Sintetase (FAS) em fibroblastos de Fibromatose Gengival Hereditaria (FGH) e de gengiva normal (GN)

Almeida, Juliana Pereira 18 February 2004 (has links)
Orientador: Edgard Graner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:57:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_JulianaPereira_M.pdf: 1647818 bytes, checksum: 1c96341fa46efec38b67cc72afef04e4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Fibromatose Gengival Hereditária (FGH) é uma doença genética rara, caracterizada por um crescimento lento e progressivo do tecido gengival. Sua causa não é conhecida até o momento, entretanto, evidências indicam que uma elevada síntese de proteínas da matriz extracelular, associada à redução da sua degradação e a uma maior proliferação dos fibroblastos gengivais são importantes na patogenia. A Ácido Graxo Sintetase (FAS) é a enzima anabólica responsável pela produção de ácidos graxos, sendo expressa em grandes quantidades em células com alto potencial proliferativo, como as células endometriais durante a fase proliferativa do ciclo menstrual e as células de diversas neoplasias malignas. A inibição da atividade desta enzima em células tumorais leva a um bloqueio do ciclo celular que culmina com a morte por apoptose. Com o objetivo de verificar se o aumento do crescimento celular observado nas células de FGH está associado com a expressão ou atividade de FAS, oito linhagens de fibroblastos de FGH e oito de Gengiva Normal (GN) foram utilizadas neste estudo. Algumas linhagens de FGH apresentaram um potencial proliferativo significantemente maior do que os fibroblastos de GN, o que foi demonstrado através de curvas de proliferação e dos índices de positividade para as proteínas nucleares Ki-67 e PCNA. Através de experimentos de western blot, estas mesmas linhagens exibiram grandes quantidades da enzima FAS e de receptor de andrógeno (RA). A inibição da atividade de FAS, com o bloqueador natural cerulenina, provocou uma redução da proliferação tanto dos fibroblastos de FGH como dos de GN. Além disso, o tratamento destas células com DHT resultou em um aumento na expressão do RA e de FAS em linhagens de FGH e GN. Estes resultados mostram que a enzima FAS é sintetizada por fibroblastos normais e de FGH e é essencial para a proliferação destas células. Além do mais, a produção de FAS nestas linhagens pode ser regulada por andrógenos / Abstract: Hereditary Gingival Fibromatosis (HGF) is a rare genetic condition clinically manifested by a slow and progressive growth of the gingival tissue. The exact biochemical and genetic mechanisms underlying this disease are not known. However, HGF is characterized by an abnormal accumulation of collagen and other extracellular matrix molecules associated with a decrease in the activity of matrix metalloproteases. Moreover, enhanced proliferation of gingival fibroblasts has also been described as important for the HGF pathogenesis. Fatty Acid Synthase (FAS) is the major anabolic enzyme involved in the endogenous production of saturated fatty acids. It is expressed in large amounts in highly proliferative cells such as in the endometrium during its proliferative phase and cancer cells. The specific inhibition of FAS in tumor cells leads to an inhibition of the cell cycle progression and apoptosis. In order to verify if the increased proliferation of the HGF cells is associated with the expression and activity of FAS, eight primary cultures of HGF fibroblasts and seven of fibroblasts from clinically normal gingiva (NG) were analyzed in this study. Proliferation curves and immunocytochemistry for Ki-67 and PCNA demonstrated that some HGF cell lines have a significantly higher proliferation than the NG fibroblasts. By using protein lysates and western blot experiments, high amounts of FAS and androgen receptor (AR) were detected in the HGF cell lines with the highest proliferative potential. The inhibition of FAS activity with cerulenin promoted a strong reduction in the proliferation of both HGF and NG fibroblasts. In addition, the treatment of HGF and NG cells with DHT enhanced AR and FAS protein levels. Taken together, these results show that FAS is synthesized by normal and HGF fibroblasts under an androgen-dependent control and is important for the proliferation of these cells / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia
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Avaliação longitudinal da velocidade de proliferação das células da mucosa bucal de indivíduos expostos e não exposto ao tabaco e que cessram o hábito tabágico / Longitudinal evaluation of the proliferation rates of cells from the oral mucosa in subjetics exposed and not exposed to tabaco and have ceased the smoking habit

Maraschin, Bruna Jalfim January 2013 (has links)
OBJETIVO: O primeiro objetivo deste trabalho foi avaliar, através da citopatologia e da técnica de AgNOR, as taxas de proliferação celular da borda de língua e assoalho de boca de indivíduos que abandonaram o hábito tabágico e de indivíduos que nunca fumaram, ao longo de um ano. O segundo objetivo foi avaliar a influência da condição de higiene bucal na velocidade de proliferação da mucosa bucal de sujeitos não expostos ao tabaco e ao álcool. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 99 indivíduos. As coletas foram realizadas em borda de língua e assoalho de boca, em um momento inicial (baseline), após em média 6 meses (6 meses) e após 12 meses (12 meses). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=44): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS (FO-UFRGS), que nunca fumaram, e que ingeriam até 2 doses (28g) de álcool por semana. Grupo de indivíduos que abandonaram o tabagismo (GAT) (n=22): indivíduos em acompanhamento no Grupo de Apoio ao Fumante do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (GAF-HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico, alcoolistas ou não. Grupo de Tabagistas (GT) (n=33): indivíduos em acompanhamento no GAF-HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo do acompanhamento, alcoolistas ou não. As amostras foram sujeitadas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 3 AgNORs (pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. Os dados da condição de higiene bucal (perda dentária, sangramento gengival e profundidade de sondagem) foram obtidos nos registros dos prontuários disponíveis na FO-UFRGS. RESULTADOS: Na coleta baseline, os grupos expostos ao fumo (GAT e GT) apresentaram os valores da velocidade de proliferação celular maiores quando comparados aos indivíduos do GC. Ao longo do tempo, os indivíduos do GAT apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular em ambos os sítios analisados, até atingir valores semelhantes aos do GC. Os resultados deste estudo, ainda, sugerem que a variação individual de mAgNOR dos indivíduos do GC, ao longo de um ano de acompanhamento, é de no máximo 23% para o sítio borda de língua, e de 18% para o sítio assoalho de boca. Indivíduos com mais de 3 dentes perdidos apresentam valores superiores de mAgNOR quando comparado com sujeitos com menos de 3 dentes perdidos, no sítio borda de língua (p<0.01). CONCLUSÕES: Indivíduos não expostos ao tabaco e ao álcool apresentam a contagem de AgNOR similar ao longo de 12 meses de acompanhamento, com variações pouco significativas. A partir dos resultados deste estudo pode-se concluir que a cessação do hábito tabágico reduz a velocidade de proliferação celular da mucosa bucal. / OBJECTIVE: The primary aim of this study was to assess, through cytopathology and AgNOR staining technique, the cell proliferation patterns of the border tongue and floor of mouth of pattern who abandoned the smoking habit, over a year. A secondary aim was to investigate the influence of oral health status on cell proliferation rates in the oral mucosa of individuals not exposed to tobacco and alcohol. METHODS: The initial sample comprised 99 individuals. Samples were collected from border tongue and floor of the mouth at initial moment (baseline), after 6 (6 months) and 12 months (12 months). The subjects were divided into three groups, according to the following criteria: Control Group (CG), n = 44: individuals who presented at the clinic of the School of Dentistry, Federal University of Rio Grande do Sul, seeking dental treatment, who never smoked and who drank up to 2 servings (28g) of alcohol per week. Abandonment of Tobacco Group (ATG), n=22: individuals in monitoring at the HCPA Group of Smokers, who smoked at the baseline time, and over time cease the smoking habit, alcoholics or not. Smokers Group (SG), n = 33: individuals in monitoring at the HCPA Smoking Support Group, who smoked at baseline, and that did not stop the smoking habit during the research, alcoholics or not. The samples were subjected to the AgNOR technique and quantified by three calibrated examiners. Mean AgNORs per nucleus (mAgNOR) and the percentage of cells with more than three AgNORs per nucleus (pAgNOR>3) were calculated from the first 50 well-arranged, non-overlapping nucleated cells. Oral health data (missing teeth, gingival bleeding and probing depth) were collected from each patient’s record. RESULTS: At baseline collection the exposed groups to tobacco (ATG and SG) had higher proliferation rate, compared to the CG. Over time, individuals of ATG showed a reduction in cell proliferation in both sites analyzed, reaching values similar to the CG. The present findings show that that individuals not exposed to carcinogens maintain a relatively steady cell proliferation rate in the oral mucosa, with up to 23% of variation in the border of tongue and 18% in the floor of the mouth. Furthermore, it was observed that individuals, not exposed to tobacco and alcohol, with more than three missing teeth presented significantly higher mAgNOR in the border of the tongue (p<0.01). CONCLUSIONS: Individuals not exposed to tobacco and alcohol maintain the count of AgNOR similar over 12 months, with a scarcely variation. More over the smoking habit cassation decreases the proliferation rate of oral mucosa over 1 year of follow-up.
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Avaliação longitudinal da velocidade de proliferação das células da mucosa bucal de indivíduos expostos e não exposto ao tabaco e que cessram o hábito tabágico / Longitudinal evaluation of the proliferation rates of cells from the oral mucosa in subjetics exposed and not exposed to tabaco and have ceased the smoking habit

Maraschin, Bruna Jalfim January 2013 (has links)
OBJETIVO: O primeiro objetivo deste trabalho foi avaliar, através da citopatologia e da técnica de AgNOR, as taxas de proliferação celular da borda de língua e assoalho de boca de indivíduos que abandonaram o hábito tabágico e de indivíduos que nunca fumaram, ao longo de um ano. O segundo objetivo foi avaliar a influência da condição de higiene bucal na velocidade de proliferação da mucosa bucal de sujeitos não expostos ao tabaco e ao álcool. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 99 indivíduos. As coletas foram realizadas em borda de língua e assoalho de boca, em um momento inicial (baseline), após em média 6 meses (6 meses) e após 12 meses (12 meses). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=44): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS (FO-UFRGS), que nunca fumaram, e que ingeriam até 2 doses (28g) de álcool por semana. Grupo de indivíduos que abandonaram o tabagismo (GAT) (n=22): indivíduos em acompanhamento no Grupo de Apoio ao Fumante do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (GAF-HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico, alcoolistas ou não. Grupo de Tabagistas (GT) (n=33): indivíduos em acompanhamento no GAF-HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo do acompanhamento, alcoolistas ou não. As amostras foram sujeitadas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 3 AgNORs (pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. Os dados da condição de higiene bucal (perda dentária, sangramento gengival e profundidade de sondagem) foram obtidos nos registros dos prontuários disponíveis na FO-UFRGS. RESULTADOS: Na coleta baseline, os grupos expostos ao fumo (GAT e GT) apresentaram os valores da velocidade de proliferação celular maiores quando comparados aos indivíduos do GC. Ao longo do tempo, os indivíduos do GAT apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular em ambos os sítios analisados, até atingir valores semelhantes aos do GC. Os resultados deste estudo, ainda, sugerem que a variação individual de mAgNOR dos indivíduos do GC, ao longo de um ano de acompanhamento, é de no máximo 23% para o sítio borda de língua, e de 18% para o sítio assoalho de boca. Indivíduos com mais de 3 dentes perdidos apresentam valores superiores de mAgNOR quando comparado com sujeitos com menos de 3 dentes perdidos, no sítio borda de língua (p<0.01). CONCLUSÕES: Indivíduos não expostos ao tabaco e ao álcool apresentam a contagem de AgNOR similar ao longo de 12 meses de acompanhamento, com variações pouco significativas. A partir dos resultados deste estudo pode-se concluir que a cessação do hábito tabágico reduz a velocidade de proliferação celular da mucosa bucal. / OBJECTIVE: The primary aim of this study was to assess, through cytopathology and AgNOR staining technique, the cell proliferation patterns of the border tongue and floor of mouth of pattern who abandoned the smoking habit, over a year. A secondary aim was to investigate the influence of oral health status on cell proliferation rates in the oral mucosa of individuals not exposed to tobacco and alcohol. METHODS: The initial sample comprised 99 individuals. Samples were collected from border tongue and floor of the mouth at initial moment (baseline), after 6 (6 months) and 12 months (12 months). The subjects were divided into three groups, according to the following criteria: Control Group (CG), n = 44: individuals who presented at the clinic of the School of Dentistry, Federal University of Rio Grande do Sul, seeking dental treatment, who never smoked and who drank up to 2 servings (28g) of alcohol per week. Abandonment of Tobacco Group (ATG), n=22: individuals in monitoring at the HCPA Group of Smokers, who smoked at the baseline time, and over time cease the smoking habit, alcoholics or not. Smokers Group (SG), n = 33: individuals in monitoring at the HCPA Smoking Support Group, who smoked at baseline, and that did not stop the smoking habit during the research, alcoholics or not. The samples were subjected to the AgNOR technique and quantified by three calibrated examiners. Mean AgNORs per nucleus (mAgNOR) and the percentage of cells with more than three AgNORs per nucleus (pAgNOR>3) were calculated from the first 50 well-arranged, non-overlapping nucleated cells. Oral health data (missing teeth, gingival bleeding and probing depth) were collected from each patient’s record. RESULTS: At baseline collection the exposed groups to tobacco (ATG and SG) had higher proliferation rate, compared to the CG. Over time, individuals of ATG showed a reduction in cell proliferation in both sites analyzed, reaching values similar to the CG. The present findings show that that individuals not exposed to carcinogens maintain a relatively steady cell proliferation rate in the oral mucosa, with up to 23% of variation in the border of tongue and 18% in the floor of the mouth. Furthermore, it was observed that individuals, not exposed to tobacco and alcohol, with more than three missing teeth presented significantly higher mAgNOR in the border of the tongue (p<0.01). CONCLUSIONS: Individuals not exposed to tobacco and alcohol maintain the count of AgNOR similar over 12 months, with a scarcely variation. More over the smoking habit cassation decreases the proliferation rate of oral mucosa over 1 year of follow-up.

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