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Publico-12862.pdf: 1578570 bytes, checksum: 00bd4765e50bc569a9343e907ae91a61 (MD5) / A leptina, um hormônio protéico secretado pelo tecido adiposo, é responsável pela sinalização do estado nutricional do indivíduo para o sistema nervoso central e, em parte, pela regulação do metabolismo energético, além de estar envolvida em vários processos fisiológicos. A ausência ou resistência a leptina pelo organismo causa obesidade mórbida, diabetes e hipogonadismo. A estrutura terciária da molécula da leptina revela a presença de quatro hélices, cujo padrão é típico das citocinas. A partir da sequência peptídica Ac-[Ser96]-hLEP89-98-NH2 descrita por Martins e colaboradores (2006), foram desenhados uma nova série de dez fragmentos peptídicos derivados da leptina com substituições puntuais de L- para D-aminoácido. Os peptídeos foram sintetizados pelo método da fase sólida manual pela estratégia t-Boc. Os mesmos foram purificados por cromatografia liquida de alta eficiência e caracterizados por cromatografia liquida acoplada a um espectrômetro de massas. Os estudos conformacionais dos peptídeos foram realizados por Dicroísmo Circular em diferentes meios com o objetivo de correlacionar a estrutura com a atividade biológica dos fragmentos. Os efeitos de injeções intracerebroventriculares das soluções dos peptídeos nas variações de consumo alimentar e do peso corporal foram avaliados em ratos Wistar machos. Além disso, o efeito causado pelos fragmentos nas taxas glicêmicas também foram avaliadas, assim como as estabilidades dos compostos contra a ação das proteases presentes no plasma. Dentre os compostos estudados, os melhores resultados foram obtidos com o fragmento Ac-[Ser96, D-Phe92]-hLEP89-98-NH2 que demonstrou ser mais estável em plasma e apresentou atividade biológica (variações de peso e consumo alimentar e efeito hipoglicemiante) eqüipotente àquelas verificadas nos fragmentos [D-Leu4]-OB3 e Ac-[Ser96]-hLEP89-98-NH2, que até então eram os peptídeos mais ativos descritos na literatura. Os estudos conformacionais por Dicroísmo Circular, no entanto não nos permitiu estabelecer correlação direta entre a estrutura e a atividade biológica dos fragmentos. Embora haja a necessidade de refinamentos, esse tipo de abordagem pode oferecer uma interessante base para o desenvolvimento de compostos correlacionados com a leptina com potencial de aplicação em estudos de obesidade humana ou na medicina veterinária. / Leptin, a protein hormone secreted by the adipose tissue, is responsible for signaling the nutritional status of the body to the central nervous system and partly by the regulation of energetic metabolism, as well as being involved in various physiological processes. The absence or resistance of leptin to the organism causes obesity, diabetes and hypogonadism. The tertiary structure of the leptin molecule reveals the presence of four helices, whose pattern is typical of cytokines. Starting from the peptide sequence Ac-[Ser96]-hLEP89-98-NH2 described by Martins and coworkers (2006), we designed a new series of ten peptide fragments derived from the leptin with punctual substitutions of L-to D-amino acid. The peptides were synthesized by the manual solid phase method by employing the t-Boc strategy. They were purified by high performance liquid chromatography and characterized by liquid chromatography coupled to mass spectrometry. In order to correlate structure with biological activity of the fragments conformational studies of the peptides were performed by Circular Dichroism in different solvent media. The effects of intracerebroventricular injections of solutions of the peptides in the variations of food intake and body weight were evaluated in male Wistar rats. Furthermore, the effect caused by the fragments in the blood glucose levels were also assessed, as well as the stabilities of the compounds against the action of proteases present in plasma. Among the compounds studied, the best results were obtained with the fragment Ac-[Ser96, D-Phe92]-hLEP89-98-NH2, which proved to be more stable in plasma and showed biological activity (changes in weight and food intake and hypoglycemic effect) equipotent those observed with the fragments [D-Leu4]-OB3 and Ac-[Ser96]-hLEP89-98-NH2, the most active peptides described in the literature so far. Conformational studies by Circular Dichroism, however did not allow us to establish direct correlation between structure and biological activity of the fragments. Although there is a need for refinements, this approach may offer an interesting basis for the development of compounds correlated with leptin with potential application in studies of human obesity or in veterinary medicine. / TEDE
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unifesp.br:11600/10092 |
| Date | 24 November 2010 |
| Creators | Pereira, Jádson Moreira [UNIFESP] |
| Contributors | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Miranda, Antonio [UNIFESP] |
| Publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UNIFESP, instname:Universidade Federal de São Paulo, instacron:UNIFESP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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