Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:26:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1
324993.pdf: 1370922 bytes, checksum: 69633f5130beb0a82d0fc07ff88f3382 (MD5)
Previous issue date: 2013 / Os cultivos de camarão, tanto nas fazendas quanto nas larviculturas, são susceptíveis à ocorrência de mortalidades causadas por micro-organismos patogênicos, tais como vírus, bactérias e fungos. A grande maioria dos estudos sobre os mecanismos de defesa dos camarões enfocam principalmente a problemática ocorrida nos viveiros de cultivo com animais juvenis e adultos. Por outro lado, tais estudos são ainda escassos nas fases larvais e pós-larvais, mas são igualmente importantes, uma vez que enfermidades nesses estágios podem gerar perdas econômicas consideráveis para as larviculturas. Assim, o presente estudo teve como objetivo ampliar o conhecimento sobre a ontogenia do sistema imune durante o desenvolvimento de Litopenaeus vannamei, a espécie de camarão mais cultivada no mundo, através da avaliação da expressão de genes associados ao seu sistema imune utilizando RT-qPCR. Foram analisados 17 genes, de diferentes categorias funcionais, em subestágios de desenvolvimento: ovos fertilizados (0-4h e 7-11h pós-desova), Náuplios (I e V), Protozoeas (I e III), Misis (I e III) e Pós-larvas (2, 9 e 17). Todos os genes avaliados mostraram-se expressos no estágio de Pós-larva, o qual é o mais próximo de camarões juvenis. Os genes associados à defesa antiviral (Lv-Sid 1, LvDcr2 e Lv-Ago 2, LvDcr1, LvSVC1 e Lv-Ago 1), reconhecimento de micro-organismos (LvDscam), antioxidante (Lv-PRX), sinalização intracelular (fatores de transcrição LvDorsal e LvRelish) e apoptose (LvIAP) foram ubiquamente expressos de ovo a pós-larvas. Enquanto a expressão de genes envolvidos no sistema pró-fenoloxidase (LvproPO-1), a homeostasia (LvHHAP), coagulação (LvClot) e peptídeos antimicrobianos (Litvan PEN2, Litvan PEN3 e LvSty-II) não foi detectada em todos os subestágios. De maneira interessante, a expressão de genes de uma mesma família gênica (Litvan PEN2 e Litvan PEN3) não ocorreu simultaneamente em um mesmo subestágio de desenvolvimento. Por outro lado, os genes associados à defesa antiviral (LvDcr1/2, Lv-Ago 1/2 and Lv-Sid-1), fatores de transcrição (LvDorsal e xii LvRelish), defesa antioxidante (Lv-PRX) e apoptose (LvIAP) foram mais expressos no Ovo 0-4h em comparação ao Ovo 7-11h, sugerindo uma contribuição materna. A expressão de genes associados ao sistema imune nas fases larvais e pós-larvais de L. vannamei ressalta a importância de se conhecer o estabelecimento dos diferentes mecanismos de defesa ao longo do seu desenvolvimento. Assim, o presente estudo vem contribuir, de maneira original e pioneira, com informações a respeito da ontogenia de moléculas do sistema imune, especialmente àquelas associadas à defesa antiviral. Conhecimentos desta natureza poderão contribuir, em um futuro próximo, para o desenvolvimento de ferramentas biotecnológicas que servirão para avaliar as condições de saúde de animais nos cultivos (larviculturas e fazendas), bem como para orientar à seleção genética de camarões mais resistentes à infecções microbianas e virais.<br> / Abstract : Shrimp farms and hatcheries are susceptible to mortalities events caused by pathogenic microorganisms, such as virus, bacteria and fungi. The great majority of studies related to the defense mechanisms of shrimp are focused in problems that occur mainly in juvenile and adult shrimp farming. Moreover, studies in the shrimp larval and post-larval stages are very limited but are equally important, since diseases can generate considerable economic losses in those stages. Thus, the present study was aimed to expand the knowledge on the ontogeny of the immune system during the development of Litopenaeus vannamei, the most cultivated shrimp species in the world, through the evaluation of gene expression associated with the immune system using RT-qPCR. The stages examined in this work included the fertilized egg (0h and 7h post spawns), nauplius (I and V), protozoea (I and III), Mysis (I and III) and postlarval (PL2, PL9 and PL17). As result, it was observed that all analyzed genes were expressed in the post-larval stage, which is the previous stage to juvenile shrimp. While genes associated to antiviral defense (LvDcr1, LvDcr2, Lv-Ago 1, Lv-Ago 2, Lv-Sid-1 and LvSVC-1), microorganisms recognition(LvDscam), antioxidant defense (Lv-PRX), intracellular signaling (transcription factors LvDorsal and LvRelish) and apoptosis (LvIAP) were constitutively expressed from egg to postlarvae; genes involved in the prophenoloxidase system (LvproPO-1), homeostasis (LvHHAP), coagulation (LvClot) and antimicrobial peptides (Litvan PEN2, Litvan PEN3 and LvSty-II) were not detected in all stages. Interestingly, the expression of the same gene family (Litvan PEN2 and Litvan PEN3) did not occur simultaneously during the development. In addition, genes associated with antiviral defense (LvDcr1, LvDcr2, Lv-Ago 1, Lv-Ago 2 and Lv-Sid 1), transcription factors (LvDorsal and LvRelish), antioxidant defense (Lv-PRX) and apoptosis (LvIAP) were more expressed in egg 0h compared to egg 7h, which suggests a maternal contribution. The expression of genes associated with the immune system in larval and postlarval stages of L. vannamei highlights the importance of understanding the establishment of different defense mechanisms throughout the organism development. Thus, the present study aims to contribute in an original and pioneering way, with information about the ontogeny of molecules of the immune system, with especial attention given to molecules associated with antiviral defense. Such knowledge can contribute in the near future for the development of biotechnological tools to evaluate the health of animals in culture (hatchery and farm), as well as the genetic selection of shrimps more resistant to microbial and viral infections.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsc.br:123456789/122838 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Quispe Gaspar, Ruth Liliám |
| Contributors | Universidade Federal de Santa Catarina, Perazzolo, Luciane Maria, Rosa, Rafael Diego da |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 87 p.| il., grafs., tabs. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSC, instname:Universidade Federal de Santa Catarina, instacron:UFSC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0024 seconds