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Previous issue date: 2002 / No presente estudo, abordagens moleculares foram utilizadas para o
diagnóstico gênero-específico da malária em pacientes submetidos a tratamento,
nos municípios de Monte Negro e Campo Novo no Estado de Rondônia.
Avaliamos o limite de detecção de DNA através das técnicas de PCR simples,
hemi nested PCR (HNPCR) e hemi nested PCR em um único tubo
(STHNPCR) em ensaios realizados com diluição seriada de sangue de pacientes
infectados com Plasmodium falciparum. Comparamos a sensibilidade dos testes
utilizando duas metodologias de extração na preparação das amostras
sanguíneas para serem processadas através da PCR: o Chelex e a Saponina.
Com o Chelex, a PCR simples mostrou um limite de detecção de 700
parasitos/μl, enquanto que com a Saponina o limite de detecção foi de 70
parasitos/μl. A HNPCR e a STHNPCR apresentaram limites semelhantes de
detecção sendo de 7 parasitos/μl através da extração do Chelex e de 0,007
parasitos/μl pela Saponina. Para os experimentos subsequentes, foi
selecionada a extração pela Saponina, em vista da obtenção de melhores resultados. As amostras sanguíneas de 30 pacientes em tratamento para malária
foram estudadas através da microscopia ótica, PCR simples e HNPCR. De cada
paciente foram coletadas duas amostras em ocasiões diferentes. A 1º coleta foi
realizada no 4º e 8º dia de tratamento antimalárico, enquanto que a 2º amostra foi
coletada 48 horas após. Todos os pacientes deram resultados negativos tanto
para microscopia ótica quanto para PCR simples. O percentual de positividade da
HNPCR manteve-se em torno de 50% nas duas coletas pós-tratamento, sendo
capaz de detectar o DNA do parasito mesmo em pacientes que se tornaram
assintomáticos. Não foi demonstrado associação significativa entre a presença de
manifestações clínicas e a positividade pela HNPCR. Os resultados desta
pesquisa sugerem que abordagens sensíveis como a nested PCR poderão ser
úteis no monitoramento da parasitemia e resposta clínica de indivíduos em
tratamento específico, nas situações de oligoparasitemia e na intercepção da
cadeia de transmissão epidemiológica da doença
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/4986 |
| Date | January 2002 |
| Creators | de Albuquerque Montenegro, Rosana |
| Contributors | Charifker Schindler, Haiana |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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