Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A mamoneira (Ricinus communis) à uma oleaginosa com valor econÃmico considerÃvel devido à composiÃÃo do Ãleo de suas sementes. No entanto, hà algumas limitaÃÃes no seu uso para alimentaÃÃo humana e animal devido à presenÃa de proteÃnas tÃxicas e alergÃnicas, as quais podem ser solucionadas ou minimizadas atravÃs da engenharia genÃtica. Contudo, essa cultura à recalcitrante para tÃcnicas de cultura de tecidos limitando a geraÃÃo de plantas transformadas e os protocolos existentes nÃo sÃo bem estabelecidos. O objetivo desse trabalho foi avaliar a aplicabilidade de um protocolo de regeneraÃÃo existente na literatura à cultivar Nordestina; determinar a via de regeneraÃÃo e avaliar, atravÃs de tÃcnicas histoquÃmicas, as cÃlulas transformadas por biobalÃstica em torno do meristema. Para este propÃsito, eixos embrionÃrios foram cultivados em meio Murashig and Skoog (MS) suplementado com concentraÃÃes crescentes de tidiazuron (TDZ) (0,1; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 e 10,0 mg.L-1). Observou-se que entre as concentraÃÃes de TDZ avaliadas a que apresentou a melhor resposta foi 0,1 mg.L-1, apresentando, em mÃdia, apÃs 56 dias de incubaÃÃo,7,42 partes aÃreas por explante. Ãcido giberÃlico (0,1 mg.L-1) e Ãcido-indol-3 butÃrico (1,0 mg.L-1) foram utilizados na tentativa de alongar e promover o enraizamento, respectivamente, das partes aÃreas obtidas, contudo, nas concentraÃÃes utilizadas, nÃo evidenciou-se nenhum efeito com estes reguladores de crescimento. AnÃlises histolÃgicas revelaram que as partes aÃreas foram formadas de meristemas prÃ-existentes e neo-formados indicando organogÃnese direta. Observaram-se cÃlulas transformadas pelo menos atà a segunda camada celular. AnÃlises da expressÃo estÃvel do gene gus mostraram expressÃo do mesmo, 19 dias apÃs o bombardeamento. Nas anÃlises histolÃgicas foram observadas cÃlulas transformadas em divisÃo. Como conclusÃo a cultivar Nordestina foi capaz de formar mÃltiplas partes aÃreas em meio contendo TDZ e este protocolo de regeneraÃÃo foi compatÃvel com um protocolo de transformaÃÃo por biobalÃstica / Castor bean (Ricinus communis) is an oilseed crop with considerable economic value because of the composition of its oil seed. However, there are some constraints in your use for human and animal food because of the presence of toxic and allergenic proteins. This problem could be solved or reduced through genetic engineering. However, this crop is recalcitrant to tissue culture techniques, thus limiting the formation of transformed plants, and the protocols existing are not well established. The aim of this work was to test the applicability of the regeneration protocol which has been published for the Nordestina cultivar; to determine the regeneration way and to verify trough histochemical techniques, the transformed cells around the meristem. For this purpose, embryo axes were cultured on Murashig and Skoog (MS) medium supplemented with thiadiazuron (TDZ) (0,1; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 e 10,0 mg.L-1). Between the TDZ concentrations tested, 0,1 mg.L-1 presented the better results after 56 days of incubation with 7,42 shoots per explant. Gibberellic acid (GA3) (0,1 mg.L-1) and indole-3-butyric acid (1,0 mg.L-1) were used for elongation and rooting, respectively, of the shoots obtained, however, in the concentrations used, any effect was evidenced. Histological analysis revealed that the shoots were formed by pre existing or neo formed meristems indicating direct organogenesis. Transformed cells were viewed at least in the second cellular layer. Analysis for stable gus expression showed gus expression 19 days after bombardment. In the histological analysis transformed cells in process of division were observed. In conclusion the Nordestina cultivar formed multiple shoots on medium supplemented with TDZ and this protocol of regeneration was compatible with a protocol for biolistic-mediated transformation
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:2418 |
| Date | 20 February 2009 |
| Creators | Emanoella Lima Soares |
| Contributors | Francisco de Assis de Paiva Campos |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Agronomia/Fitotecnia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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