Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto de distintas concentraciones de Suero
Fetal Bovino (SFB) y Ácido Ascórbico (AA) sobre la diferenciación osteogénica de Células Madre
Mesenquimales (CMM) bovinas. Las CMM fueron aisladas desde médula ósea de fetos bovinos,
mediante adherencia al plástico y posteriormente cultivadas en los distintos tratamientos. El medio
DMEM fue suplementado con dexametasona (100 nM), β-glicerofosfato (10 mM), más
concentraciones variables de AA y SFB; 0 mM AA - 0% SFB (T1); 0,1 mM AA - 10% SFB (T2);
0,01 mM AA - 10% SFB (T3); 0,001 mM AA - 10% SFB (T4); 0,1 mM AA - 5% SFB (T5); 0,1 mM
AA - 2% SFB (T6). La diferenciación fue analizada al día 21 de cultivo mediante cuantificación de
la expresión de los genes osteo-específico Osteocalcina (OCN), pluripotencia (NANOG) y del
control endógeno gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) utilizando PCR cuantitativo.
La actividad de Fosfatasa Alcalina (FA) fue cuantificada mediante espectrofotometría. El depósito
de minerales fue evaluado mediante tinción Von Kossa. En T2 se expresaron los mayores
(P<0,05) niveles de ARNm de OCN (33,7 veces la expresión del T1). Los niveles de ARNm de
NANOG disminuyeron (P<0,05) en todos los tratamientos suplementados con AA y SFB. La
actividad de FA aumentó en CMM suplementadas con SFB y AA a excepción de T4. Se observó
una alta intensidad en la tinción Von Kossa en T2. En conclusión, el SFB participa parcialmente en
la diferenciación osteogénica, mientras que la suplementación de una alta concentración de AA
aumenta la capacidad de diferenciación de las CMM bovinas hacia el linaje osteogénico / Financiamiento: Proyecto Fondecyt No. 11100205
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/131544 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Cortés Araya, Yennifer Alejandra |
| Contributors | Peralta Troncoso, Oscar, Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias, Departamento de Fomento de la Producción Animal, Reyes Solovera, Mónica de los, Fernández Garay, María Soledad |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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