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Previous issue date: 2011-02-23 / A tuberculose prevalece como uma das principais causas de morte no mundo ocasionadas por um ?nico agente infeccioso, o Mycobacterium tuberculosis. A enzima Chiquimato Quinase (MtSK) codificada pelo gene aroK de M. tuberculosis, quinta enzima da via do chiquimato. catalisa a transfer?ncia de um grupo fosfato do ATP para o carbono 3 do grupo hidroxila do chiquimato, formando chiquimato-3-fosfato e ADP. A interrup??o do gene aroK demonstrou que a enzima MfSK ? essencial para a viabilidade do M. tuberculosis. Neste trabalho, apresentamos a purifica??o da enzima MtSK at? a homogeneidade, an?lise por espectrometria de massa, sequenciamento de amino?cidos da por??o N-Terminal, determina??o do estado oligom?rico da enzima em solu??o, cin?tica em estado estacion?rio, espectroscopia de fluoresc?ncia e calorimetria de titula??o isot?rmica. Os resultados encontrados sugerem que a rea??o catalisada pela enzima monom?rica MtSK segue um mecanismo em equil?brio-r?pido aleat?rio para a adi??o dos substratos e uma libera??o ordenada dos produtos, onde a libera??o do chiquimato-3-fosfato ? seguida pela libera??o do ADP, resultando na enzima na sua forma livre. Os resultados de calorimetria demonstraram uma grande diferen?a de calor gerada na associa??o da enzima livre aos seus ligantes, revelando assinaturas termodin?micas de intera??es n?o-covalentes para cada processo de liga??o. Estes resultados ajudaram a compreender melhor o modo de a??o da enzima MtSK e podem subsequentemente serem ?teis para guiar o desenho racional de inibidores relacionados a esta enzima e que possam ser avaliados posteriormente como anti-TB.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/1611 |
| Date | 23 February 2011 |
| Creators | Rosado, Leonardo Astolfi |
| Contributors | Santos, Di?genes Santiago |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de, PUCRS, BR, Faculdade de Medicina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 7620745074616285884, 500, 600, -8624664729441623247 |
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