CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Pesquisas cientÃficas buscando a utilizaÃÃo de antÃgenos de Coccidioides posadasii sÃo comuns na literatura especializada, uma vez que, sÃo instrumentos relevantes para diagnÃstico e possÃvel efeito imunoprotetor em humanos. Diante do exposto, foi realizada caracterizaÃÃo bioquÃmica de antÃgeno protÃico oriundo de C. posadasii. busca ativa de casos humanos de coccidioidomicose no Estado do CearÃ, bem como, avaliaÃÃo da resposta imunolÃgica in vivo. Para concretizar tais objetivos, a caracterizaÃÃo bioquÃmica do antÃgeno foi realizada por meio de eletroforese (SDS-PAGE e 2D-PAGE), detecÃÃo de proteases, glicoproteÃnas e sequenciamento N-terminal e foram buscados, ativamente, quadros de coccidiodiomicose em trÃs caÃadores de tatu com a respectiva descriÃÃo clÃnica e avaliaÃÃo laboratorial. Ademais, foi descrito modelo murino de coccidioidomicose com testagem de possÃvel efeito imunoprotetor do antÃgeno in-house. Quanto a anÃlise bioquÃmica, observou-se delimitaÃÃo de bandas nas faixas de 45-67 kDa e 67-97 kDa (SDS-PAGE), detecÃÃo de glicoproteÃnas, proteases e sequenciamento N-terminal demonstrando serem as bandas uma β-glucosidase e uma glutamina sintetase. Nos casos clÃnicos, foram encontrados queixas pneumÃnicas, exame micolÃgico direto, cultivo de escarro, imunodifusÃo radial dupla (com antÃgeno in-house) e PCR positivos para C. posadasii. No modelo murino, o grupo infectado, na presenÃa de antÃgeno e adjuvante, apresentou, na anÃlise histopatolÃgica, menores alteraÃÃes pulmonares que os demais grupos, alÃm de maior estÃmulo linfÃide esplÃnico. No que concerne a dosagem de citocinas (IL-6, IL-12 e TNFα), nÃo se observou diferenÃa significativa entre os grupos, mas uma tendÃncia à resposta imunoprotetora. O grupo infectado, sem imunoproteÃÃo, apresentou maior perda ponderal. Na anÃlise macroscÃpica, o mÃximo comprometimento foi a presenÃa de 2 granulomas, neste Ãltimo grupo. Na anÃlise dos hemogramas, a sÃrie branca demonstrou maiores diferenÃas entre os grupos. Em conclusÃo, o antÃgeno in-house se mostrou tratar-se de uma β-glicosidase e uma glutamina sintetase que tenderam a estimular a imunidade celular em modelo murino. AlÃm disso, a descriÃÃo de casos humanos contribui para a difusÃo do diagnÃstico precoce da coccidioidomicose e requer investigaÃÃes laboratoriais complementares. / Scientific researches seeking to use Coccidioides posadasii antigens are common in the literature, as relevant instruments to diagnosis and possible immunoprotector effect in humans. Thus, we performed biochemical characterization of protein antigen derived from C. posadasii, an active search for human cases of coccidioidomycosis in CearÃ, as well as evaluation of immune response in vivo. To achieve these goals, the biochemical characterization of the antigen was performed by electrophoresis (SDS-PAGE and 2D-PAGE), detection of proteases, glycoproteins and N-terminal sequencing and we reported three human cases of coccidiodiomycosis in armadillo hunters with its clinical description and laboratory evaluation. Further, a murine model was described testing a possible imunoprotector effect with an in-house antigen. For biochemical analysis, it was observed delimitation bands in ranges 45-67 kDa and 67-97 kDa (SDS-PAGE), detection of glycoproteins, proteases and N-terminal sequencing demonstrating the bands being a β-glucosidase and a glutamine synthetase. In clinical cases, it was found pneumonic disease, direct mycological examination, sputum culture, double radial immunodiffusion (antigen in-house) and PCR positive for C. posadasii. In the murine model, the infected group, in the presence of antigen and adjuvant, showed, histologically, lung disorders smaller than the other groups, and increased splenic lymphoid stimulus. Regarding the cytokines (IL-6, IL-12 and TNF), there was no significant difference between groups, but a trend toward immunoprotective response. The infected group, without immunoprotection, showed greater weight loss. In the macroscopic analysis, the maximum commitment was the presence of 2 granulomas in the latter group. In the analysis of blood counts, the white run showed major differences between groups. In conclusion, the in-house antigen showed that it was a β-glucosidase and a glutamine synthetase which tended to stimulate cellular immunity in a murine model. Moreover, the description of human cases contributes to the spread of early diagnosis of coccidioidomycosis and requires additional laboratory investigations.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:6400 |
| Date | 26 November 2012 |
| Creators | Renato Evando Moreira Filho |
| Contributors | Raimunda SÃmia Nogueira Brilhante, Josà JÃlio Costa Sidrim, Maria Auxiliadora Bezerra Fechine, Maria Fatima da Silva Teixeira, Marcos FÃbio Gadelha Rocha |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Microbiologia MÃdica, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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