Memoria para optar al Título de Química Farmacéutica / Murtilla, Ugni molinae Turcz, es un arbusto autóctono que crece en forma silvestre y
abundante desde la VII hasta la X región, conocida principalmente por sus frutos
comestibles. La medicina popular le atribuye diversas propiedades tales como
aromática, astringente, estimulante, alivia dolencias de la vía urinaria, entre otras. Sus
hojas son utilizadas por la industria dermocosmética como regeneradora de la piel y
neutralizadora del estrés oxidativo.
Estudios previos realizados en nuestro laboratorio demostraron que las hojas de
esta especie son una rica fuente de triterpenoides pentacíclicos derivados de los
núcleos ursano, oleanano y lupano, a los cuales tanto en la literatura como estudios
realizados en el laboratorio han establecido que poseen propiedades analgésicas,
antiinflamatorias, antioxidantes e hipoglicemiantes. Siendo, esto último de relevancia,
pues darían cuenta de propiedades antidiabéticas en las hojas de esta planta
El objetivo de este trabajo fue aislar e identificar principios activos desde hojas de
murtilla y ensayar actividad inhibitoria de diferentes extractos sobre la enzima
glicógeno fosforilasa.
En el presente trabajo, se utilizaron las hojas de esta especie, las cuales fueron
secadas y trituradas para preparar distintos extractos por maceración hasta total
agotamiento con solventes de polaridad creciente, obteniéndose los extractos de
hexano (HEX), diclorometano (EDCM), acetato de etilo (EAE) y etanol (EET). Este
último fue purificado mediante dos técnicas: extracción líquido-líquido y extracción
sólido-líquido (Soxhlet) para así obtener una fracción rica en sapogeninas triterpénicas,
cuyos productos se denominaron F-AcEt y SAE. Estas fracciones fueron repurificadas mediante sucesivas columnas cromatográficas
de sílica gel y Sephadex® LH-20; y finalmente analizadas mediante placas
cromatográficas preparativas para aislar una nueva genina denominada U7 y una
mezcla de X y U7. U7 fue aislada e identificada como ácido madecásico (ácido 2α, 3β,
6β, 23 tetrahidroxi-urs-12(13)-eno-28-oico). En tanto que X aún no ha sido
completamente identificada. La caracterización de los compuestos se realizó mediante
espectroscopia de masa y espectroscopia de resonancia magnética nuclear
unidimensional.
El ensayo de inhibición de glicógeno fosforilasa a (GPa) fue realizado midiendo
colorimétricamente a 660 nm la liberación del ión fosfato como producto de la reacción
enzimática en dirección de la síntesis de glicógeno a partir de glucosa-1-fosfato. Las
muestras a evaluar fueron disueltas en DMSO a una concentración de 60 μg/mL. Los
resultados demostraron que un extracto estandarizado de Centella asiatica y sólo los
extractos EAE, EET y sub-extracto SAE poseen actividad, obteniéndose los siguientes
resultados de % inhibición frente a GPa ± SD: 53,8 ± 4,3; 45,9 ± 4,3; 92,2 ± 1,1 y 91,6 ±
1,2 respectivamente. La actividad de los extractos evaluados podría ser atribuida a los
triterpenoides pentacíclicos presentes en estos extractos bioactivos.
En síntesis se contribuyó a ampliar el conocimiento de la composición química de
esta especie autóctona y se logró evaluar su efecto sobre GPa, otorgando grandes
perspectivas en los estudios químicos-farmacológicos para esta especie nativa. / Murtilla, Ugni molinae Turcz is a native shrub that grows wild and abundant from VII
to X region and it is known for its edible fruits. Folk medicine attributes to it many
properties such as aromatic, astringent, stimulant, relieves ailments of the urinary tract,
among others. Its leaves are used by dermocosmetics industry as regeneration of the
skin and neutralizing oxidative stress.
Previous studies in our laboratory showed that the leaves of this species are a rich
source of pentacyclic triterpenoids derived from the ursane, oleanane and lupane
skeletons, to which both the literature and our studies have established that have
properties analgesic, inflammatory, antioxidant and hypoglycemic. Being the three latter
of relevance since it would be linked antidiabetic properties in the leaves of this plant
The aim of this study was to isolate and identify active ingredients from leaves of
murtilla and evaluate their inhibitory activity of different extracts on the glycogen
phosphorylase enzyme.
Dry and powdered leaves were used to prepare different extracts by maceration until
total exhaustion with solvents of increasing polarity obtaining the hexane (HEX),
dichloromethane (EDCM), ethyl acetate (EAE) and ethanol (EET) extracts. The latter
was purified by two techniques: liquid-liquid extraction and solid-liquid extraction
(Soxhlet) to obtain a fraction rich in triterpene sapogenins, whose products were called
F-AcEt and SAE.
These fractions were repurified by successive silica gel and Sephadex LH-20
chromatographic columns, and finally by preparative chromatographic plates, to isolate a new genin called U7 and a mixture of X and U7. U7 was isolated and identified as
madecassic acid (2α, 3β, 6β, 23 tetrahydroxy-urs-12(13)-ene-28-oic acid). While X has
not been completely identified. The characterization of the compounds was performed
by HPLC-ESI-MSn and 1H- and 13C-NMR .
The inhibition assay of glycogen phosphorylase a (GPa) was determined
colorimetrically at 660 nm by measuring the release of phosphate ion as a product of
the enzymatic reaction toward the synthesis of glycogen from glucose-1-phosphate.
The samples were dissolved in DMSO assessing a final concentration of 60 μg/mL. The
results showed that a standardized extract of Centella asiatica and only EAE, EET
extracts and SAE sub-extract possess activity with a inhibitory effect against GPa ± SD
of: 53.8 ± 4.3; 45.9 ± 4.3; 92.2 ± 1.1 and 91.6 ± 1.2 % respectively. The activity of the
evaluated extracts could be attributed to the bioactive pentacyclic triterpenoids present
in these extracts.
Briefly, this study allowed to increase the knowledge of the chemical composition of
Ugni molinae leaves and assessing their effect on GPa, releasing great prospects in the
chemical and pharmacological studies of this native species / Fondecyt
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/112090 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Queupil Carrasco, María José |
| Contributors | Delporte Vergara, Carla Luz, García Nannig, Lorena del Pilar, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas, Departamento de Química Farmacológica y Toxicológica, Laboratorio de Productos Naturales |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
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