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Previous issue date: 2017-04-28 / Listeria monocytogenes is a food-borne bacterium that causes an infection called
listeriosis, Although rare, this infection can be lethal for immunocompromised, pregnant,
and stillborn. The objective of this work was to develop, characterize, evaluate the
stability, anti-Listeria monocytogenes activity, cytotoxicity and genotoxicity of
nanostructures (nanocapsules and nanoemulsion) containing Geranium essential oil
(OEG), as well as verify synergistic effects with the essential oils of Cinnamon,
Lemongrass And Thyme. The characterization of the essential oils was performed by GCMS.
The nanocapsules (NC) were prepared by the interfacial deposition method of the
preformed polymer while Geranium nanoemulsion (NEG) was prepared by
homogenization using an Ultra-Turrax T18. The analysis of the stability indicators was
performed by the evaluation of particle size, polydispersity index, zeta potential and pH
for 60 days. The bactericidal effect of the different concentrations of the essential oils,
pure or in combination and the synergism were determined by the serial microdilution
technique, the cytotoxicity was determined by the MTT assays and determination of the
LDH in VERO cells and the genotoxicity was evaluated by the GEMO test. Results: The
NCGs produced had mean nanometer diameters of (232.6 nm), polydispersity indices
below 0.053, pH 3.5 and zeta potentials of about -20.7 mV. The study demonstrated that
the stability of the formulations is temperature dependent, remaining more stable at
refrigeration temperatures (4 °C) or at stable temperatures (25
° C). The NEG had mean nanometer diameters of (136.2.6 nm), polydispersity indices
below 0.039, pH 3.4 and zeta potentials of about -8.1 mV. The MICs obtained for
Geranium, Cinnamon, Campi-lemon and Thyme oils were 10975 mg / ml, 0.05 mg / ml,
0.18 mg / ml and 0.35 mg / ml, respectively. The CIM of NEG was 0.0625 mg / ml and
the nanocapsules did not demonstrate antimicrobial activity in the test performed. It was
possible to observe at least one point of synergism between the OE of geraniums and the
tested EOs.the nanostructures did not show synergistic effect with OE. In the MTT assay
OEG and NEG showed increased cell viability at concentrations of 10, 100 and 1000 μg
/ μl as compared to the control, the LDH assay shows that both OEG and NEG at
concentrations of 0,1, 1, 10, 100 and 1000 μg / μl were not cytotoxic. In the GEMO test
the OEG had a genoprotective effect on lymphocytes at concentrations of 10, 100 and
1000 μg / μl. The study demonstrated that both OG and NEG do not present tocicity
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and genotoxicity but present very high MIC values to be used in food, and the synergism
and nanostructuring were a good alternative to reduce the amount of oil required for an
antimicrobial response. / A Listeria monocytogenes é um microrganismo contaminante de alimentos causador da
listeriose, uma infecção que embora rara pode ser letal para indivíduos imunodeficientes,
gestantes e neonatos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver, nanoestruturas contendo
óleo essencial de Gerânio (OEG), caracterizar, avaliar a atividade contra L.
monocytogenes, a cito e genotoxicidade, bem como verificar efeitos sinérgicos com os
óleos essenciais de Canela, Capim-limão e Tomilho. A caracterização dos óleos
essenciais foi realizada por GC-MS. As nanocápsulas (NC) foram preparadas pelo
método de deposição interfacial do polímero pré-formado enquanto a nanoemulsão de
Gerânio (NEG) foi preparada por homogeneização utilizando um T18 Ultra-Turrax. A
análise dos indicadores de estabilidade foi realizada pela avaliação do tamanho de
partícula, índice de polidispersão, potencial zeta e pH por 60 dias. O efeito bactericida
das diferentes concentrações dos óleos essenciais e o sinergismo foram determinados pela
técnica de microdiluição seriada, a citotoxicidade foi determinada pelos ensaios de MTT
e LDH e a genotoxicidade foi avaliada pelo teste GEMO. Resultados: As NCG produzidas
apresentaram diâmetros nanométricos médios de (232,6 nm), índices de polidispersão
abaixo de 0,053, pH de 3,5 e potenciais zeta de cerca de -20,7 mV. O estudo demonstrou
que a estabilidade das formulações são mais estáveis em temperatura ambiente (25 ºC).
A NEG apresentou diâmetros nanométricos médio de (136,2 nm), índices de
polidispersão abaixo de 0,039, pH de 3,4 e potenciais zeta de cerca de -8,1 mV. As CIM
obtidas para os óleos de Gerânio, Canela, Campi-limão e Tomilho foram de 10975 mg/ml,
0,05 mg/ml, 0,18 mg/ml e 0,35 mg/ml respectivamente. A CIM da NEG foi de 0,0625
mg/ml e as nanocápsulas não demonstraram atividade antimicrobiana no teste realizado.
Foi possível observar pelo menos um ponto de sinergismo entre o OEG os OE testados.
As nanoestruturas não apresentaram efeito sinérgico com os OE. No ensaio de MTT o
OEG e a NEG apresentaram um aumento da viabilidade celular nas concentrações de 10,
100 e 1000 μg/μl quando comparado com o controle. O ensaio de LDH mostrou que tanto
o OEG quanto a NEG nas concentrações de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 μg/μl não foram
citotóxicas. No teste GEMO o OEG apresentou um efeito genoprotetor sobre os linfócitos
nas concentrações de 10, 100 e 1000 μg/μl. O presente estudo demonstrou que tanto o
OEG quanto a NEG não apresentaram toxicidade e genotoxicidade porém apresentam
valores de CIM muito altos para poder serem utilizados em alimentos, podendo ser o sinergismo e a
nanoestruturação uma boa alternativa para reduzir a quantidade de óleo necessária para
uma resposta antimicrobiana.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.universidadefranciscana.edu.br:UFN-BDTD/566 |
| Date | 28 April 2017 |
| Creators | Fausto, Viviane Pedroso |
| Contributors | Vaucher, Rodrigo de Almeida, Santos, Roberto Christ Viana, Bochi, Guilherme Vargas, Rech, Virginia Cielo |
| Publisher | Centro Universitário Franciscano, Programa de Pós-Graduação em Nanociências, UNIFRA, Brasil, Biociências e Nanomateriais |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional Universidade Franciscana, instname:Universidade Franciscana, instacron:UFN |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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