IntroduÃÃo: O Ãcido ZoledrÃnico (AZ) à um bisfosfonato (BF) capaz de causar desregulaÃÃo imune-inflamatÃria estando associado à Osteonecrose dos Maxilares induzida por Bisfosfonatos (OMB). O objetivo deste estudo foi determinar o perfil celular e a imunoexpressÃo de marcadores inflamatÃrios do osso mandibular em modelo murino de OMB e nos tecidos gengival e osseodentÃrio de ratos tratados cronicamente com AZ. Materiais e MÃtodos: Ratos Wistar machos (180-220g) foram submetidos a quatro infusÃes venosas de soluÃÃo salina estÃril ou AZ nas doses de 0,04, 0,20 ou 1,00 mg/kg, sendo o lado esquerdo submetido a exodontia do primeiro molar inferior (dia 49). ApÃs 70 dias, realizou-se eutanÃsia e as mandÃbulas dos animais foram hemisseccionadas (lados esquerdo e direito) e submetidas a anÃlise histolÃgica e tÃcnica de imuno-histoquÃmica pelo mÃtodo da estreptavidina-biotina-peroxidase para CD68, Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α), Interleucina(IL)-1β, Ãxido nÃtrico sintase induzida (iNOS), Fator Nuclear kappa B (NF-kB) e IL-18 bp (bindding protein). No tecido Ãsseo do lado submetido à exodontia (lado esquerdo), contaram-se as lacunas de osteÃcitos (vazias e preenchidas), osteoclastos (normais e apoptÃticos), polimorfonucleares neutrÃfilos (PMN), mastÃcitos e cÃlulas com marcaÃÃo positiva para os marcadores supracitados. A polpa dentÃria e o periodonto do primeiro molar inferior direito (lado contralateral) foram analisados por microscopia de luz convencional quanto à presenÃa de animais exibindo vasos dilatados/ectÃsicos (somente polpa dentÃria) e cÃlulas inflamatÃrias. O estudo imuno-histoquÃmico foi realizado por meio da mesma tÃcnica atravÃs de escores. O experimento foi repetido (infusÃo de salina versus AZ 0,20 mg/kg) para dosagem de TNF-α, IL-1β, mieloperoxidase (MPO), malanoaldeÃdo (MDA) e glutationa (GSH) das gengivas excisadas cirurgicamente no dia da eutanÃsia dos animais. Resultados: a OMB foi observada nos animais tratados com 0,20 e 1,00 mg/kg de AZ com aumento do percentual de lacunas de osteÃcitos vazias (p<0.001) e osteoclastos apoptÃticos (p<0.001), nÃmero total de osteoclastos (p=0.003), PMN (p=0.009) e cÃlulas com positividade citoplasmÃtica para CD68 (p<0.001), TNF-α (p=0.001), IL-1β (p=0.001), iNOS (p<0.001) e NF-kB (p=0.006), e positividade nuclear NF-kB (p=0.011). A imunoexpressÃo de IL-18bp foi reduzida de forma dose-dependente (p=0.005). Na polpa dentÃria, houve incremento do nÃmero de mononucleares CD68+ (p=0.026) e imunoexpressÃo de TNF-α (p=0.020), IL-1β (p=0.027), iNOS (p=0.001) em odontoblastos e IL-1β (p=0.027) em cÃlulas nÃo odontoblastos. No periodonto, observaram-se, nos grupos tratados com AZ, um aumento do nÃmero de cÃlulas inflamatÃrias (p=0.001) e imunoexpressÃo citoplasmÃtica para TNF-α (p=0.003), IL-1β (p=0.004), iNOS (p=0.008) e NF-kB (p=0.025). Os nÃveis de MPO (p<0.001), TNF-α (p=0.002), IL-1β (p<0.001) e GSH (p=0.005) estavam significantemente aumentados na gengiva dos animais tratados com 0,20 mg/kg de AZ. ConclusÃo: Conclui-se que hà superexpressÃo de marcadores inflamatÃrios no sÃtio de exodontia nÃo cicatrizado e com instalaÃÃo da OMB. A infusÃo crÃnica de AZ mostrou-se capaz de aumentar a expressÃo de citocinas inflamatÃrias e do infiltrado inflamatÃrio nos tecidos gengival e osseodentÃrio de ratos. / Introduction: The Zoledronic Acid (ZA) is a bisphosphonate (BF) that can lead to immune-inflammatory dysregulation leading to Bisphosphonate-related Osteonecrosis of the Jaws (BRONJ). The objective of this study was to determine the cellular profile and the immune expression of inflammatory markers in mandibular bone of a BRONJ experimental model and in gingival and tooth of rats chronically treated with ZA. Materials and Methods: Male Wistar rats (180-220 g) were chronically infused (four times) venously with sterile saline or 0.04, 0.20 or 1.00 mg/kg of ZA and the left hemimandible was subjected to first molar exodontia (day 49). After 70 days we performed the euthanasia and the hemimandibles (right and left) were histologically and immunohistochemically analyzed (CD68, Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α), Interleukin(IL)-1β, inducible Nitric Oxide Synthases (iNOS), Nuclear Factor kappa B (NF-kB) and IL-18(bidding protein) bp). In bone subjected to exodontia (left hemimandible) we counted the viable and empty osteocyte lacunae, the viable and apoptotic osteoclasts, the polymorphonuclear neutrophils cells (PMN), mast cells and positive cytoplasmic cells for cited markers. Dental pulp and periodontium of first right molar (contralateral hemimandible) was histologically analyzed by presence of inflammatory cells, dilated/ectasic blood vessels (pulp only) and immunohistochemically by scores. We repeated the protocol (saline versus 0.20 mg/kg ZA) to dosage of TNF-α, IL-1β, myeloperoxidase (MPO), Malondialdehyde (MDA) e Glutathione (GSH) of gingiva of animals. Results: the BRONJ was observed in 0.20 mg/kg and 1.00 mg/kg ZA-treated animals that showed increase in percentage of empty osteocyte lacunae (p<0.001) and percentage of apoptotic osteoclast (p<0.001), total osteoclasts number (p=0.003), PMN (p=0.009), cytoplasmic positive cells for CD68 (p<0.001), TNF-α (p=0.001), IL-1β (p=0.001), iNOS (p<0.001) e NF-kB (p=0.006), and nuclear positivity for NF-kB (p=0.011). The immune expression of IL-18bp decreased dose dependently (p=0.005). In dental pulp there was augment in number of mononuclear CD68+ cells (p=0.026) and immunostaining for TNF-α (p=0.020), IL-1β (p=0.027), iNOS (p=0.001) in odontoblasts and IL-1β (p=0.027) in non odontoblasts dental pulp cells. In periodontium ZA treated animals showed an increase in number of animals showing inflammatory cells (p=0.001) and cytoplasmic immunostaining for TNF-α (p=0.003), IL-1β (p=0.004), iNOS (p=0.008) and NF-kB (p=0.025). MPO (p<0.001), TNF-α (p=0.002), IL-1β (p<0.001) and GSH (p=0.005) levels were significantly raised in 0.20 mg/kg ZA treated gingiva animals. Conclusion: There is overexpression of inflammatory markers in exodontia area with establishing of BRONJ. The chronic infusion of ZA raised the expression of inflammatory markers and cells in gingiva, periodontium and pulp tissue of rats.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:11691 |
| Date | 22 November 2016 |
| Creators | Paulo GoberlÃnio de Barros Silva |
| Contributors | Ana Paula Negreiros Nunes Alves, Roberto CÃsar Pereira Lima JÃnior, Raquel Carvalho Montenegro, AbrahÃo Cavalcante Gomes de Souza Carvalho, Danna Mota Moreira |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Odontologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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