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Evaluation of antimicrobial activity and mechanism of action of essential oil extracted from the bark of fruits Hymenaea l. Courbail / AvaliaÃÃo da atividade antimicrobiana e do mecanismo de aÃÃo do Ãleo essencial extraÃdo da casca de frutos da Hymenaea courbail l.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Jatobà (Hymenaea courbaril l.) has an extensive history of use by natives of tropical forests, its fruits are composed of essential oils, tannins, bitter substances, resinous materials and pectic, starch and sugars. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of the essential oil extracted from the peel of fruits of Hymenaea courbaril l. (OEHc) and its mechanism of action on OSSA reference strains S. aureus (S. aureus ATCC 6538P and S. aureus 14458). For the evaluation of antimicrobial activity antimicrobial potential were determined from OEHc Inhibitory Concentrations (MIC) and Minimum Lethal (CLM) from OEHc, the effect of time of exposure to OEHc, OXA and OEHc associations-OXA, OEHc modulator effect on activity of antibiotics (ATB) for clinical use, and the OEHc action on exponential and stationary phases of growth and in growth stationary phase in the presence of chloramphenicol. The OEHc action mechanism was verified by crystal violet uptake, release of genetic material, determination of potassium ion efflux and for assessing the microbial morphology by atomic force microscopy. It was also evaluated the action of sub-inibitÃrias concentrations of OEHc on expression of virulence factors (catalase, coagulase, DNAse, lipase, and hemolysin) and stability of antimicrobial activity of OEHc at different pH. OEHc inhibited the growth of S. aureus strains ATCC 6538P (CIM = CLM = 2.5 mg/mL) and S. aureus ATCC 14458 (CIM = 2.5 mg/mL; CLM = 5 mg/mL). The CLM from OEHc was able to derail the OSSA strains tested in 8 (S. aureus ATCC 6538P) and 24 hours (S. aureus ATCC 14458) and the CIM inhibited the growth of S. aureus ATCC 14458 until 48 hours of exposure. The modulatory action of the antibiotic activity of OEHc clinical use ranged with the ATB and with the strain tested. OEHc associations-OXA tested was found a predominance of synergistic effects and indifferent to the OSSA strains tested. The OEHc was able to reduce the number of viable cells at all stages microbial growth. Its greater efficiency in the presence of CLO suggests a mechanism of action independent of the cellular metabolism. The OEHc was able to promote the increased uptake of crystal violet, the release of genetic material and the efflux of potassium ions, causing also changes in bacterial morphology, suggesting that its target of action is the cell wrap. However, the inhibition of the expression of virulence factors can indicate the participation of other targets on OEHc action, as the synthesis of macromolecules. The antimicrobial activity of OEHc about strains OSSA is potentized in alkaline pH. The results show that the OEHc has a good antimicrobial activity on the species Gram-positive S. aureus, with action mechanisms mediated by the occurrence of damage in microbial wrap with loss of intracellular material and inhibition of the synthesis of macromolecules, revealing its synergistic modulator effect when associated with oxacillin and other antibiotics of clinical use. / O Jatobà (Hymenaea courbaril L.) possui um amplo histÃrico de utilizaÃÃo pelos indÃgenas de florestas tropicais, seus frutos sÃo compostos por Ãleos essenciais, taninos, substÃncias amargas, matÃrias resinosas e pÃcticas, amido e aÃÃcares. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana do Ãleo essencial extraÃdo da casca de frutos da Hymenaea courbaril L. (OEHc) e o seu mecanismo de aÃÃo sobre cepas OSSA de referÃncia de S. aureus (S. aureus ATCC 6538P e S. aureus 14458). Para a avaliaÃÃo da atividade antimicrobiana foram determinados o potencial antimicrobiano do OEHc, as ConcentraÃÃes InibitÃria (CIM) e Letal MÃnimas (CLM) do OEHc, o efeito do tempo de exposiÃÃo ao OEHc, a OXA e as associaÃÃes OEHc-OXA, o efeito modulador do OEHc na atividade de antibiÃticos (ATB) de uso clÃnico, e a aÃÃo do OEHc na fases de crescimento exponencial e estacionÃrio e na fase de crescimento estacionÃrio na presenÃa de cloranfenicol. O mecanismo de aÃÃo do OEHc foi verificado por captaÃÃo do cristal violeta, liberaÃÃo de material genÃtico, dosagem do efluxo de Ãons potÃssio e pela avaliaÃÃo da morfologia microbiana por microscopia de forca atÃmica. TambÃm foi avaliada a aÃÃo de concentraÃÃes sub-inibitÃrias do OEHc na expressÃo de fatores de virulÃncia (catalase, coagulase, hemolisina, lipase e DNAse) e a estabilidade da atividade antimicrobiana do OEHc em diferentes pH. OEHc inibiu o crescimento das cepas de S. aureus ATCC 6538P (CIM = CLM = 2,5 mg/mL) e S. aureus ATCC 14458 (CIM = 2,5 mg/mL; CLM = 5 mg/mL). A CLM do OEHc foi capaz de inviabilizar as cepas OSSA testadas em 8 horas (S. aureus ATCC 6538P) e 24 horas (S. aureus ATCC 14458) e a CIM inibiu o crescimento de S. aureus ATCC 14458 atà 48h de exposiÃÃo. A aÃÃo moduladora do OEHc na atividade de antibiÃticos de uso clÃnico variou com o ATB e com a cepa testada. Para as associaÃÃes OEHc-OXA testadas foi encontrada uma predominÃncia de efeitos sinÃrgicos e indiferentes para as cepas OSSA testadas. O OEHc foi capaz de reduzir o nÃmero de cÃlulas viÃveis em todas as fases crescimento microbiano. Sua maior eficiÃncia na presenÃa de CLO sugere um mecanismo de aÃÃo independente do metabolismo celular. O OEHc foi capaz de promover o aumento da captaÃÃo do cristal violeta, da liberaÃÃo de material genÃtico e do efluxo de Ãons potÃssio, provocando tambÃm alteraÃÃes na morfologia bacteriana, sugerindo que seu alvo de aÃÃo seja o envoltÃrio celular. No entanto, a inibiÃÃo da expressÃo de fatores de virulÃncia pode indicar a participaÃÃo de outros alvos na aÃÃo do OEHc, como a sÃntese de macromolÃculas. A atividade antimicrobiana do OEHc sobre cepas OSSA à potencializada em pH alcalino. Os resultados encontrados mostram que o OEHc possui uma boa atividade antimicrobiana sobre a espÃcie Gram-positivo S. aureus, com mecanismos de aÃÃo mediados pela ocorrÃncia de danos no envoltÃrio microbiano com perda de material intracelular e inibiÃÃo da sÃntese de macromolÃculas, revelando seu efeito modulador sinÃrgico quando associados a oxacilina e outros antibiÃticos de uso clÃnico.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:7987
Date28 February 2014
CreatorsGleilton Weyne Passos Sales
ContributorsNadia Accioly Pinto Nogueira, RomÃlia Pinheiro GonÃalves Lemes, Gisele Medeiros Bastos
PublisherUniversidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em CiÃncias FarmacÃuticas, UFC, BR
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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