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Previous issue date: 2008-08-05 / Several aspects of the bovine tuberculosis were analyzed in this study. The immunogenicity of recombinant MPT-51 (rMPT-51), Ag-85 and M. bovis-BCG were characterized in an immunosorbent assay, where 208 serum samples from positive intradermal tuberculin test (ITT) animals and 54 serum samples
from ITT negative animals where analyzed. M. bovis-BCG and Ag-85 were strongly recognized by antibodies from naturally infected cattle. Additionally, the clinical status of the animals were correlated with the ITT positivity, with the specific production of IL-4 by TCD4 and TCD8 positive lymphocytes, and with nitric oxide (NO) production by macrophages from naturally tuberculosis infected bovine peripheral blood. ITT positive animals showed TCD4+IL4+ cells specific to M. bovis-BCG extract. High background levels of TCD8+IL-4+ lymphocytes were observed in ITT positive animals independent of the stimuli. When cell cultures where stimulated with M. bovis-BCG protein extract, there
was no observed difference in NO production between the groups. Naturally tuberculosis infected bovine presented TCD4+IL4+ cells specific for M. bovis- BCG and a preserved NO production. Finnally, the immunogenicity of rMPT-51 use as a proteic sub-unit vaccine was evaluated in BALB/c mice, with two different adjuvants, incomplete Freund and CpG DNA. For this, mice were immunized and challenged with M. tuberculosis. Immunization with rMPT-51 antigen and either adjuvant induced, in the lungs, a migration increase of
TCD5+IFN + cells specific for rMPT-51, when compared to controls (P<0.05). rMPT-51 plus CpG DNA presented a better performance among the different vaccination schemes tested, in part due to the ability of stiulate TCD5+IFN + cells and hampering the bacterial load, thus preserving the functional integrity of challenged mice lungs / Nesta tese foram avaliados vários aspectos da tuberculose bovina e do Mycobacterium bovis. Primeiro caracterizou-se a imunogenicidade do MPT-51, Ag 85 e BCG em ensaio imunoenzimático, onde foram utilizadas 208 amostras
de soro de animais TTI positivo e 54 amostras de bovinos negativos. O BCG-M. bovis e o Ag 85 foram fortemente reconhecidos pelos anticorpos dos bovinos naturalmente infectados. Segundo correlaciounou-se o estado clínico do animal à positividade ao teste intradérmico, com a produção específica de IL-4 por linfócitos TCD4+ e TCD8+ e a produção de óxido nítrico por macrófagos do sangue periférico de bovinos naturalmente infectados com tuberculose. Foi
observado que os bovinos TTI positivos apresentaram células CD4+IL-4+ específicas para extrato protéico de M. bovis-BCG. Observaram-se altos níveis basais de linfócitos TCD8+IL-4+ independente de estímulos nos animais reatores. Quando as culturas foram estimuladas com extrato protéico de BCG,
não houve diferença quanto à produção de NO. Os bovinos tuberculosos, naturalmente infectados, apresentaram células TCD4+IL4+ específicas para M. bovis-BCG, preservando a produção de NO pelos macrófagos. Finalmente, a imunogenicidade do MPT-51 como vacina de sub-unidade protéica foi avaliada em camundongos BALB/c, testando o MPT-51 com dois adjuvantes, o incompleto de Freund e o CpG DNA. Os camundongos foram imunizados e posteriormente desafiados com M. tuberculosis. No pulmão, a imunização com
antígeno rMPT-51 a 20μg/ml + adjuvantes de Freund Incompleto e CpG DNA induziu aumento da migração de células TCD5+IFN- + específicas para o MPT-51 para o local da infecção, quando comparados com o controle (p<0,05). O
MPT-51+CpG DNA, apresentou melhor desempenho dentre os esquemas de vacinação adotados, devido a capacidade de estimular a produção de células TCD5+IFN- + e a diminuição da carga bacteriana, preservando assim a integridade funcional do pulmão dos camundongos, quando desafiados
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tde/1199 |
| Date | 05 August 2008 |
| Creators | SILVA, Ediane Batista da |
| Contributors | KIPNIS, Ana Paula Junqueira, KIPNIS, André |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Doutorado em Ciência Animal, UFG, BR, Ciências Agrárias |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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