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Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A caveolina-1 (Cav-1), uma proteína essencial para a formação de cavéolas,
apresenta atividade na modulação da sinalização intracelular. Cav-1 é capaz de
interagir com diversas proteínas através de seu domínio CSD (caveolin scaffolding
domain) e, em geral, essa interação leva à inibição das proteínas associadas. O
peptídeo CSD tem sido utilizado como um mimético de Cav-1 em relação à sua
capacidade modulatória sobre a atividade de outras proteínas. Recentemente, tem
sido mostrado que Cav-1 é capaz de modular a resposta inflamatória em diversos
aspectos. Neste trabalho, examinamos o papel de Cav-1 na regulação da síntese de
mediadores inflamatórios por macrófagos. O lipopolissacarídeo (LPS) de E.coli, um
protótipo de estímulo inflamatório, foi capaz de induzir a expressão de Cav-1 e Cox-2
em macrófagos peritoneais in vitro. Estas proteínas são induzidas em um curso
temporal semelhante, sendo detectadas por Western blot a partir de 3h com níveis
de expressão crescentes até 18h. Por imunofluorescência, observamos que Cav-1 e
Cox-2 apresentam um padrão de expressão mutualmente exclusivo em macrófagos
estimulados com LPS. Mostramos por Western blot que a expressão de Cox-2 é
induzida por LPS e que o tratamento com CSD leva à inibição da expressão de Cox-
2, mas não de Cox-1. Observamos, também, a redução parcial dos níveis de PGE2
no sobrenadante de macrófagos estimulados com LPS e tratados com CSD. O
tratamento com o peptídeo CSD também foi capaz de reduzir os níveis de IL-1, IL-
6, e IL-12 induzidos por LPS. O LPS induz o aumento da expressão e fosforilação de
STAT-1. A fosforilação de STAT-1 foi diminuída após o tratamento com CSD,
indicando que Cav-1 modula negativamente a ativação de STAT-1. Estudos
posteriores são necessários para complementar os dados obtidos até o momento
para esclarecer os mecanismos de modulação da síntese de mediadores
inflamatórios por Cav-1. Em conclusão, Cav-1 apresenta uma atividade inibitória
sobre a expressão de Cox-2 e produção dos mediadores inflamatórios PGE2, IL1,
IL-6, e IL-12 em macrófagos estimulados com LPS in vitro. O mecanismo de inibição
possivelmente envolve inibição da ativação de STAT-1. / Caveolin-1 (Cav-1), a protein essential for the formation of caveolae, shows
activity in the modulation of intracellular signaling. Cav-1 can interact with several
proteins by its caveolin scaffolding domain (CSD) and, in general, this interaction
leads to inhibition of associated proteins. The peptide CSD has been used as a Cav-
1 mimetic in relation to its capacity on the modulatory activity of other proteins.
Recently, it has been shown that Cav-1 can modulate the inflammatory response in
several respects. We examined the role of Cav-1 in regulating the synthesis of
inflammatory mediators by macrophages. Lipopolysaccharide (LPS) from E. coli, a
prototype of inflammatory stimulus, was able to induce the expression of Cav-1 and
Cox-2 in peritoneal macrophages in vitro. These proteins are induced in a similar
time course, being detected by Western blot at 3 hours with increasing levels of
expression up to 18 hours. By immunofluorescence, we observed that Cav-1 and
Cox-2 have a mutually exclusive pattern of expression in macrophages stimulated
with LPS. Western blot analysis showed that the expression of Cox-2 is induced by
LPS and that treatment with CSD leads to inhibition of Cox-2 but not Cox-1. We also
observed the partial reduction of PGE2 levels in supernatants of macrophages
stimulated with LPS and treated with CSD. Treatment with CSD peptide was also
able to reduce the levels of IL1, IL-6 and IL-12 induced by LPS. LPS induces
increased expression and phosphorylation of STAT-1. The phosphorylation of STAT-
1 was decreased after treatment with the CSD, indicating that a Cav-1 negatively
modulates activation of STAT-1. Further studies are needed to supplement the data
obtained so far to clarify the mechanisms of modulation of the synthesis of
inflammatory mediators by Cav-1. In conclusion, Cav-1 shows an inhibitory activity on
Cox-2 expression and production of the inflammatory mediators PGE2, IL1β, IL-6 and
IL-12 in macrophages stimulated with LPS in vitro. The mechanism of inhibition
possibly involves inhibition of STAT-1 activation.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/7031 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Zampier, Carolina da Paz |
| Contributors | Moraes, Milton Ozório, Lima, Leila Mendonça, Silva, Adriana Ribeiro, Almeida, Patrícia Elaine de, Mermelstein, Cláudia dos Santos, Penido, Carmem, Mello, Christianne Bandeira de, Almeida, Cecília Jacques Gonçalves de, Bozza, Patrícia Torres |
| Publisher | Instituto Oswaldo Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | ZAMPIER, Carolina da Paz Papel de caveolina-1 na produção de mediadores inflamatórios. Rio de Janeiro, 2012. xv,69 f. : il. ; 30 cm. |
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