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Previous issue date: 1978 / CAPES / Fiocruz / FINEP / Um estudo citoquímico a nível de microscopia ótica e eletrônica foi feito para localizar enzimas mitocondriais do Trypanosoma cruzi em culturas de tecido usando miocárdio de embrião de pinto infectado pela cepa Y. As seguintes desidrogenases foram reveladas pelo uso de sais de tetrazolio como aceptores de hidrogênio da reação: Succinato Desidrogenase (E.C. 1.3.99.1), Isocitrato Desidrogenase (E.C. 1.1.42), a Glicerofosfato Desidrogenase (E.e. 1.1.2.1), B Hidroxibutirato Desidrogenase (E.C. 1.1.1.30) e NADPH tetrazolio Redutase (NADPH diaforase). A nível ótico a reação se revela intensa na forma de grãos de cor azul (sal NBT) localizados no citoplasma das células, em volta do núcleo e em todo o espaço citoplasmático útil nas células parasitadas. Nas formas intracelulares esferomastigotas (amastigotas) e epimastigotas a reação se revela na forma de 5 a 7 grãos e nas formas livres de 8 a 15 grãos para as enzimas Isocitrato e Succinato Desidrogenases e NADPH tetrazolio Redutase. A nível ultra-estrutural o produto eletrondenso (sal DS NBT) se localiza nas mitocôndrias da célula hospedeira na região das cristas e membrana interna mitocondriais. Nas formas intracelulares também a reação é de cristas e membrana interna em todas as regiões da mitocôndria do corpo celular. Para as enzimas da via dos lipídios a Glicerofosfato e B Hidroxibutirato Desidrogenases a reação se revelou de membrana interna mitocondrial. Raras cristas são vistas com reação. A atividade da Citocromo . oxidase (E.C. 1.9.3.1) foi melhor revelada utilizando-se Diaminobenzidina (DAB) como doador de hidrogênio da reação. A localização desta enzima na forma de grãos marrons no citoplasma celular e num produto eletron-denso nas cristas e membrana interna das mitocôndrias das células parasitos intracelulares se revelou semelhante às das enzimas descritas acima: Isocitrato e Succinato Desidrogenases e NADPH
tetrazolio Redutase. / In order to locate the activity of rnitochondrial enzymes in Trypanosoma cruzi in tissue cultures a cytochemical study at light and electron rnicroscopic levels was performed using chick embryo heart rnuscle cultures infected by the Y strain of the parasite. Tetrazolium salts were used as hidrogen aceptors of the reaction to locace Succinate Dehydrogenase (E.C. 1.3.99.1), Isocitrate Dehydrogenase (E. C. 1 . 1. 42 ) , a Glycerophosphate Dehydrogenase (E.C. 1. 1. 2. 1) , b Hydroxybutyrate Dehydrogenase (E.C. 1.1.1.30) and NADPH Tetrazolium Redutase. Light microscopy showed an intense reaction. Blue granules (NBT salt) were seen within the cytoplasm of the cells in the region of the nucleus. In parasitized cells they were seen throughout the cytoplasm not occupied by parasites. Isocitrate Dehydrogenase, Succinate Dehydrogenase and NADPH Tetrazoliurn Redutase activity was revealed as 5 to 7 granules in the spherornastigotes (amastigote) and epimastigotes and as 8 to 15 granules in the trypomastigotes. At the ultrastructural level the electrondense product (DS NBT salt) was concentrated in the host cell rnitochondria at the region of the cristae; and inner membrane. In the intracellular forms of the parasite the reaction also occurs at the cristae and inner rnembrane in all regions of the
mitochondria. For the lipid pathway enzymes a Glycerophosphate Dehydrogenase and B Hydroxybutyrate Dehydrogenase the reaction was mainly located at the inner membrane of the mitochondria. Few cristae were seen with the reaction. Cytochrome Oxidase (E. C. 1. 9. 31. 1) activity was best revealed with the use of diaminobenzidine (DAB) as hydrogen donor and sodium cacodylate ( 0. lM, pH 7. 2 ) as buffer. At the host cells and intracellular parasites the activity was observed in the form of brown granules in the cytoplasm and as an electrondense product at the cristae and inner membrane of the mitochondria.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:pantheon.ufrj.br:11422/2726 |
| Date | January 1978 |
| Creators | Meirelles, Maria de Nazareth Silveira Leal de Meirelles |
| Contributors | Meyer, Hertha |
| Publisher | Universidade Federal do Rio de Janeiro, Programa de Pós-Graduação em Zoologia, UFRJ, Brasil, Museu Nacional |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRJ, instname:Universidade Federal do Rio de Janeiro, instacron:UFRJ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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