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Giselle Calasans de Souza Costa. Investigação de Polimorfismos no gene humano da Glut1 - CPqGM - Dissertação de Mestrado - 2008.pdf: 901999 bytes, checksum: f8d18c6846f38a411006c2e451309767 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-19T20:54:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Giselle Calasans de Souza Costa. Investigação de Polimorfismos no gene humano da Glut1 - CPqGM - Dissertação de Mestrado - 2008.pdf: 901999 bytes, checksum: f8d18c6846f38a411006c2e451309767 (MD5)
Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / O HTLV-1 é o agente etiológico da Paraparesia Espástica Tropical/Mielopatia
Associada ao HTLV-1 (TSP/HAM) e da Leucemia/Linfoma das Células T do Adulto
(ATLL). No entanto, o desenvolvimento de manifestações clínicas associadas ao
HTLV-1 ocorre em 2-4% da população infectada e ainda não se sabe por que esta
infecção permanece assintomática na maioria dos portadores. Tem sido sugerido que o
desfecho da infecção pode ocorrer devido a variações (mutações) em genes do
hospedeiro e/ou do vírus. Recentemente, foi demonstrado que o HTLV é capaz de
utilizar a glicoproteína transportadora de glicose do tipo 1 (GLUT1) para infectar
linfócitos T CD4+. Diversos estudos têm demonstrado uma associação entre mutações
em regiões regulatórias de genes humanos e manifestação de doença. Polimorfismos no
gene da GLUT1 foram associados à susceptibilidade a nefropatia diabética, em
pacientes com diabetes mellitus dos tipos 1 e 2 em diferentes populações. Com o
objetivo de verificar possíveis correlações entre polimorfismos nas regiões regulatórias
e codificante do gene humano da GLUT1 com o desenvolvimento de TSP/HAM,
analisamos os polimorfismos -2841A>T, XbaIG>T e HaeIIIT>C em indivíduos
infectados pelo HTLV-1 e em indivíduos não-infectados de Salvador. Os SNPs
XbaIG>T e HaeIIIT>C foram verificados por PCR/RFLP e o SNP -2841A>T, por
seqüenciamento. Além disso, a carga proviral do HTLV-1 foi quantificada por PCR
quantitativo em tempo real. Com o intuito de verificar a freqüência dos polimorfismos
em GLUT1 na população brasileira com diferentes etnias, foi realizada a análise dos
polimorfismos XbaIG>T e HaeIIIT>C em Ameríndios da tribo Tiriyó; descendentes de
europeus da região Sul do Brasil; descendentes de japoneses, descendentes de europeus
e afro-descendentes da região Sudeste. As freqüências genotípicas para os
polimorfismos analisados estavam de acordo com o esperado pelo Equilíbrio de Hardy-
Weinberg. O polimorfismo HaeIIIT>C estava em desequilíbrio de ligação com os
polimorfismos XbaIG>T (χ2=37,555, p=0,003, 4 d.f.) e -2841A>T (χ2=∞, p=0,000, 4
d.f.). A freqüência do genótipo T/T do polimorfismo XbaIG>T foi mais elevada nos
indivíduos assintomáticos e com TSP/HAM do que nos indivíduos oligosintomáticos.
Em relação ao polimorfismo HaeIIIT>C, nós observamos uma maior freqüência do
genótipo T/C nos pacientes com TSP/HAM. Quanto ao polimorfismo -2841A>T, foi
verificada uma distribuição similar dos genótipos analisados em todos os grupos
estudados. Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes nas
distribuições genotípicas e alélicas entre os indivíduos infectados e não-infectados pelo
HTLV-1, assim como em relação ao status clínico dos pacientes infectados pelo HTLV-
1 nos polimorfismos XbaIG>T, HaeIIIT>C e -2841A>T. Em relação ao seqüenciamento
de 339pb da região promotora de GLUT1, foi observada uma nova mutação G>T na
posição -2807 em 6 indivíduos (1 assintomático, 2 com TSP/HAM e 3 não-infectados),
caracterizando esta mutação como um polimorfismo. Nossos resultados indicam que os
polimorfismos XbaIG>T, HaeIIIT>C e -2841A>T, apesar de, possivelmente, estarem
relacionados com a entrada de glicose na célula (XbaIG>T e -2841A>T) não estão
relacionados com a infecção pelo HTLV-1 nem com o desenvolvimento de TSP/HAM,
sugerindo que as diferentes atividades realizadas pela proteína GLUT1 (transporte de
glicose e recepção do HTLV-1) são mediadas por diferentes domínios da mesma.
Quanto ao estudo de base populacional, nós confirmamos que as freqüências alélicas
dos polimorfismos XbaIG>T e HaeIIIT>C variaram de acordo com a etnia. / The HTLV-1 is the etiological agent of Tropical spastic paraparesis/HTLV-1
associated mielopathy (TSP/HAM) and Adult T cell leukemia/lymphoma (ATLL).
However, the development of HTLV-1 associated clinic manifestations occurs in 2-4%
of the infected population and it is still an answered question why this infection remains
asymptomatic at the most of the infected carriers. It has been suggested that the
outcome of HTLV-1 associated disease manifestations may occur by individual and/or
viral genetic variations (mutations). Recently, it was demonstrated that HTLV is able to
use the Glucose transporter type 1 (GLUT1) to infect T CD4+ lymphocytes. Many
studies have demonstrating an association between mutations in regulatory regions of
human genes and disease manifestations. Polymorphisms in the GLUT1 gene were
associated with susceptibility to diabetic nephropathy in patients with types 1 and 2
diabetes mellitus in different populations. To evaluate the role of GLUT1 gene
polymorphisms in the development of TSP/HAM in HTLV-1 infected individuals, we
had analyzed the -2841A>T, XbaIG>T and HaeIIIT>C polymorphisms in HTLV-1
infected and non-infected individuals from Salvador. The XbaIG>T and HaeIIIT>C
SNP were analyzed by PCR/RFLP and the -2841A>T polymorphism, by sequencing.
The proviral load of the HTLV-1 infected patients was analyzed by Real Time
Quantitative PCR. We also analyzed the XbaIG>T and HaeIIIT>C polymorphisms in
distinct Brazilian populations with different ethnic backgrounds: Amerindians from
Tiriyó tribe, European descendants from Brazil South region; Japanese descendants,
Europeans descendants and African descendants from Southeast region. Genotypic
frequencies of the polymorphisms analyzed were in agreement with the expected by the
Hardy-Weinberg Equilibrium. The HaeIIIT>C polymorphism was in linkage
disequilibrium with the XbaIG>T (χ2=37.555, p=0.003, 4d.f.) and -2841A>T
polymorphisms (χ2=∞, p=0.000, 4d.f.). T/T genotypic frequency of the XbaIG>T
polymorphism was higher in asymptomatic and TSP/HAM individuals than in
oligosymptomatics. Concerned to the HaeIIIT>C polymorphism, we observed a higher
frequency of the T/C genotype in TSP/HAM patients. In relation to the -2841A>T
polymorphism, it was verified a similar distribution of the analyzed genotypes in all
studied groups. Genotypic and allelic frequencies of the three sites analyzed did not
differ significantly for controls and HTLV-1 infected individuals. There were no
differences in genotypic and allelic distribution among patients for either the presence
or absence of HTLV-1 associated clinic manifestations. In relation to the sequencing of
339 bp of GLUT1 promoter region, it was observed a new mutation G>T at -2807
position in 6 individuals (1 asymptomatic, 2 with TSP/HAM and 3 non-infected).
Regarding the quantification of the provirus load according to GLUT1 genotypes, we
did not observe any differences. These results suggest that the XbaIG>T, HaeIIIT>C
and -2841A>T polymorphisms, although possibly related with cell glucose entry
(XbaIG>T and -2841A>T), do not contribute to HTLV-1 infection and to the genetic
susceptibility of TSP/HAM in Brazilian HTLV-1 infected individuals, suggesting that
different activities performed by GLUT1 protein (glucose transport and HTLV-1 entry)
are mediated by its different domains. Concerned to the population study, we confirmed
that the allelic frequencies from the XbaIG>T and HaeIIIT>C are influenced by
ethnicity among the six Brazilian ethnic groups studied.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/4216 |
| Date | January 2008 |
| Creators | Costa, Giselle Calasans de Souza |
| Contributors | Alcantara, Luiz Carlos Júnior |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | Giselle Calasans de Souza Costa, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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