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Investigating the role of human HAT (histone acetyltransferase) containing complexes, ATAC and SAGA, in living cells / Etude du rôle des complexes HAT (histone acetyltransferase) humains, ATAC et SAGA, dans les cellules vivantes

Les complexes acétyltransférases (HAT), SAGA et ATAC, sont des régulateurs de la transcription des gènes. Cependant, peu d’études ont été menées sur la dynamique de ces complexes au niveau cellulaire et sur les mécanismes régulant leur assemblage. Au cours de mes travaux de thèse, j’ai utilisé des approches d’imagerie sur cellules vivantes, afin de déterminer la mobilité de ces complexes en comparaison avec celle d’autres régulateurs transcriptionnels. Les résultats ont montré que les sous-unités de SAGA et ATAC interagissent de manière transiente avec la chromatine. En complément, nous avons montré que les sous-unités spécifiques de SAGA et ATAC (ADA2b et ADA2a) ont des propriétés dynamique intracellulaire différentes et que GCN5, affecte la distribution d’ADA2a. Des analyses protéomique menées sur le comportement de ces protéines au niveau endogène, ont permis de montrer que les voies d’assemblage de ces deux complexes étaient différentes au niveau cytoplasmique et nucléaire. / Human SAGA and ATAC, are histone acetyltransferase (HAT) containing complexes that share a set of subunits and facilitate RNA polymerase II (Pol II) transcription. Little is known for the dynamics of the complexes in living cells and the regulation of their assembly. In this work, we used live-cell imaging to characterise the mobility of the two complexes and compare it with other actors of Pol II transcription. All tested ATAC and SAGA subunits exhibit very transient interactions with chromatin, a property that explains certain aspects of the function of the complexes. Moreover, we showed that overexpressed ATAC- and SAGA-specific HAT-module subunits (ADA2a and ADA2b respectively) have different intracellular dynamics and that the abundance of the shared subunit GCN5, affects the distribution of ADA2a. Quantitative proteomic analysis expanded our findings on endogenous proteins and provided evidence that the cytoplasmic and nuclear assembly pathways of SAGA and ATAC are different.

Identiferoai:union.ndltd.org:theses.fr/2014STRAJ119
Date16 December 2014
CreatorsVosnakis, Nikolaos
ContributorsStrasbourg, Tora, Laszlo
Source SetsDépôt national des thèses électroniques françaises
LanguageEnglish
Detected LanguageFrench
TypeElectronic Thesis or Dissertation, Text

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