För att utreda anledningen till bland annat otit och sinuit tas prov från nasofarynx, som enligt nuvarande metod utodlas på två separata plattor med blod- och hematinagar för att identifiera patogena luftvägsbakterier. Diagnostiska antibiotikadiskar används för att förenkla differentiering mellan olika bakterier. Odling på blodagar med optochin-disk är en tillförlitlig metod för identifiering av Streptococcus pneumoniae. Metoden är tidskrävande och agglutinationstest är ett alternativ för mer tidseffektiv artidentifiering. Syftet med arbetet var dels att validera en ny provsättningsmetod för nasofarynx-prov samt att utvärdera ett nytt agglutinationstest för artidentifiering av S. pneumoniae. För att validera provsättningsmetoden jämfördes den tidigare metoden med en ny där analyserna kombineras på samma platta (biplate) (N=165). För validering av nytt agglutinationstest inokulerades hästblod och bakterieisolat i blododlingsflaskor. Agglutinationstest utfördes därefter med två kommersiella kit, Dryspot, som idag används på laboratoriet, och Immulex. Fynden från nasofarynx efter odling på nya kombinerade plattor bestod av S. pneumoniae, Haemophilus influenzae och Moraxella catarrhalis. Överensstämmelsen mellan odlingsmetoderna var god för nasofarynxodlingar. Vid mätning av bakteriefri zon kring optochin-disk erhölls 18 – 31 mm för biplates respektive 16 – 24 mm för originalmetoden med odling på två separata plattor. För två prov var den bakteriefria zonen på biplates ej mätbar. Vid agglutinationstest för identifiering av S. pneumoniae erhölls agglutination inom respektive tidsgräns för samtliga referensisolat. Ett α-streptokock- och ett enterokock-isolat agglutinerade vid test med Immulex. Slutsatsen av studien är att biplates bör fungera som rutinmetod för odling av nasofarynxprov. Däremot verkar agglutinationstest med Immulex vara mindre pålitligt än Dryspot som används idag. / To investigate the cause of otitis and sinusitis, samples are taken from nasopharynx. To find airway pathogens samples are cultivated on blood agar and hematin agar, for further differentiation diagnostic antibiotic disks are used. Cultivation on blood agar with optochin disks is a reliable method to identify Streptococcus pneumoniae, although it is time-consuming. Agglutination test is a rapid method for identification of Streptococcus pneumoniae. The aim of this study was to validate a new method for cultivation of nasopharynx-samples. Moreover a new agglutination test for identification of S. pneumoniae was evaluated. To validate the new method of cultivation, the original method was compared with the new where blood and hematin agar are combined on the same plate (biplate) (N=165). To validate the new agglutination test, blood culture bottles were inoculated with blood and suspensions of relevant bacterial species. Agglutination tests were performed using Dryspot and Immulex commercial kits. Bacterial findings from nasopharynx after cultivation on the new combined plates included S. pneumoniae, Haemophilus influenzae and Moraxella catarrhalis. The correlation between the methods was good for nasopharynx-cultivations. The inhibitory zones around the optochin disk were 18 – 31 mm for biplates and 16 – 24 mm for the original method. All S. pneumoniae agglutinated within the time limits when agglutination test were performed. One α-Streptococcus and one Enterococcus agglutinated when tests were performed with Immulex, hence giving false positive results. In conclusion, the new cultivation method of nasopharynx samples proved functional. Agglutination test with the kit presently used, Dryspot, performed better than Immulex.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:lnu-66826 |
| Date | January 2017 |
| Creators | Johansson Andersson, Rebecca |
| Publisher | Linnéuniversitetet, Institutionen för kemi och biomedicin (KOB) |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | Swedish |
| Detected Language | Swedish |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0026 seconds