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Previous issue date: 2015-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Large amounts of wine by-products are produced as a result of processing grapes in Brazil. Considering the presence of bioactive pigments in this material, the aim of this work was to investigate the antioxidant potential and stability of anthocyanins from the grape juice pomace. The grape residue (Vitis labrusca, cv. Isabella) was ceded by an industry producing of pure grape juice, located in the region São Francisco Valley, in the city of Petrolina-PE. The anthocyanin content was determined using pH-differential method. The isolated anthocyanin were identified and quantified by chromatography analysis using a RP-HPLC-DAD system. The antioxidant activity of the purified anthocyanins were evaluated for their ability to scavenge free radicals DPPH• (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) and ABTS•+ [2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6sulfonic acid)], using gallic acid as standard. Purified anthocyanins were diluted in ethanol solution 95%: HCl 1.5N; 85:15 v/v (pH = 1.0) to evaluate the light stability, and distributed into test tubes, exposed and not exposed to light for a period of 840 hours (35 days) at 21°C ± 1°C, monitored by spectrophotometer readings. The effect of temperature on the stability of anthocyanins was evaluated using test tubes containing purified anthocyanins diluted into water, acidified with HCl (pH = 1.0), and subjected to temperatures of 50°C, 70°C and 90°C in thermostatic bath. Absorbance readings were made in the control sample (0h), and after 1, 3, 5 and 7 hours of heating. The absorbance data were used to calculate the rate constant (k) and half-life (t1/2) of anthocyanins through first-order kinetics equations. The average content of anthocyanins was 31.66 ± 0.63 mg. 100g-1 residue (expressed as malvidin-3-glucoside). A total of six majority different anthocyanins were identified: cyanidin-3-O-glucoside, delphinidin-3-O-glucoside, malvidin-3-O-glucoside, malvidin-3,5-O-diglucoside, pelargonidin-3-O-glucoside and peonidin-3-O-glucoside, with different concentrations. Malvidin 3-glucoside was the most abundant (61.66%) of the total observed, while malvidin-3,5-O-diglucoside (14.88%) was the second. The anthocyanin fraction showed high antioxidant potential against the radical DPPH• (EC50: 0.26 g. g DPPH•-1; TEC50: 1.37 minutes; AE: 2.79). After 5 minutes of reaction, at concentrations of 5-40 μg. mL-1, showed variations in the percentage scavenging between 48 and 94%, respectively, though there is a high correlation between anthocyanin content and antioxidant capacity (R = 0.93). Against the radical ABTS•+ anthocyanins exhibited significant action in capturing the radical with value of 199.35 uM Trolox. g-1. The half-life (t1/2) of the anthocyanin pigments, in the absence of light, was 3.320h (138 days) and in the presence of light was 505h (21 days), with the follows rate constants (k): 2.09 x 10-4 h-1 e 1.37 x 10-3 h-1, respectively, showing that presence of light contributed significantly to the instability of anthocyanins. In the study of heat stability, the rate constants (k) were: 1.84 x 10-2 h-1 (50°C); 7.82 x 10-2 h-1 (70°C); and 1.99 x 10-1 h-1 (90°C). The half-life of the samples occurred after 3.5h at 90°C and would occur after 8.9h and 37.7h for the samples at 70°C and 50°C, respectively, indicating the higher instability of anthocyanins to high temperatures. Anthocyanins from cv. Isabella grape juice residue are a promising source of natural dye which has antioxidant action with potential application in food products with an acidic pH, packaged in opaque packaging, and not subjected to severe heat treatment during processing. / Elevada quantidade de subprodutos vitivinícolas é produzida em decorrência do processamento de uvas no Brasil. Considerando a presença de pigmentos bioativos em sua composição, objetivou-se neste trabalho investigar o potencial antioxidante e a estabilidade das antocianinas do resíduo agroindustrial de suco de uva. O resíduo de uva (Vitis labrusca, cv. Isabel) foi cedido por uma indústria produtora de suco de uva integral, situada na região do Vale do São Francisco, Petrolina-PE. O teor de antocianinas totais foi determinado utilizando metodologia de pH diferencial. Para identificação e quantificação das antocianinas individuais, análises cromatográficas foram efetuadas por CLAE-DAD em fase reversa. A atividade antioxidante das antocianinas foi avaliada quanto à capacidade de sequestro dos radicais DPPH• (1,1-difenil-2-picrilhidrazil) e ABTS•+ (2,2’-azino-bis-3-etilbenzotiazolina-6-acido sulfônico), tendo o ácido gálico como composto de referência. Para avaliar a estabilidade à luz, as antocianinas foram diluídas em uma solução de etanol 95%: HCl 1,5N; 85:15 v/v (pH = 1,0) e distribuídas em tubos de ensaio, expostos à luz e ao abrigo da luz, a 21°C ± 1°C, durante um período de 840 horas (35 dias), monitorados por leituras em espectrofotômetro. O efeito da temperatura sobre a estabilidade das antocianinas foi avaliado utilizando tubos de ensaio contendo antocianinas diluídas em água acidificada com HCl (pH = 1,0) e submetidos a temperaturas de 50ºC, 70ºC e 90ºC, em banho termostatizado. Leituras de absorbância foram realizadas na amostra recém-preparada (0h) e após 1, 3, 5 e 7 horas de aquecimento. Os dados de absorbância foram utilizados para o cálculo da constante de velocidade (k) e do tempo de meia-vida (t1/2) das antocianinas por meio de equações cinéticas de 1ª ordem. O teor médio de antocianinas totais foi de 31,66 mg. 100g–1 de resíduo (expresso em malvidina-3-glicosídeo). Seis antocianinas majoritárias foram identificadas: cianidina-3-O-glicosídeo; delfinidina-3-O-glicosídeo; malvidina-3-O-glicosídeo; malvidina-3,5-O-glicosídeo; pelargonidina-3-O-glicosídeo; e peonidina-3-O-glicosídeo, em diferentes concentrações. Malvidina-3-O-glicosídeo foi a mais abundante (61,66%) seguida da malvidina-3,5-O-diglicosídeo (14,88%). A fração antociânica demonstrou elevado potencial antioxidante frente ao radical DPPH• (EC50: 0,26 g. g DPPH•-1; TEC50: 1,37 minutos; EA: 2,79). Aos 5 minutos de reação, nas concentrações de 5 a 40 μg. mL–1, apresentou variações no percentual de sequestro entre 48 e 94%, respectivamente, constatando uma alta correlação entre o teor de antocianinas e a capacidade antioxidante (R = 0,93). Frente ao radical ABTS•+ as antocianinas exibiram significativa ação na captura do radical com valor de 199,35 μM Trolox. g-1. Na ausência de luz, o tempo de meia vida dos pigmentos antociânicos foi de 3.320h (138 dias), e na presença de luz foi de 505h (21 dias), apresentando constantes de velocidade de 2,09 x 10-4 h-1 e 1,37 x 10-3 h-1, respectivamente, demonstrando que a luminosidade contribuiu para a instabilidade das antocianinas. No estudo de estabilidade ao calor, as constantes de velocidade foram: 1,84 x 10-2 h-1 (50°C); 7,82 x 10-2 h-1 (70°C); e 1,99 x 10-1 h-1 (90°C). O tempo de meia-vida ocorreu após 3,5h a temperatura de 90°C, e ocorreria após 8,9h e 37,7h, a 70°C e 50°C, respectivamente, constatando a maior instabilidade das antocianinas à altas temperaturas. As antocianinas do resíduo de suco de uva cv. Isabel são uma fonte promissora de corante natural que possui ação antioxidante, com potencial aplicação em produtos alimentícios que tenham pH ácido, sejam acondicionados em embalagens opacas, e não sejam submetidos à tratamentos térmicos severos durante o seu processamento.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede2/4886 |
| Date | 23 February 2015 |
| Creators | BASTOS, Rafaella da Silva |
| Contributors | LIMA, Vera Lúcia Arroxelas Galvão de, MELO, Enayde de Almeida, LIMA, Luciana Leite de Andrade |
| Publisher | Universidade Federal Rural de Pernambuco, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos, UFRPE, Brasil, Departamento de Ciências Domésticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE, instname:Universidade Federal Rural de Pernambuco, instacron:UFRPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -3168359563433608541, 600, 600, 600, 600, -395403402001511222, 138879504442384524, 2075167498588264571 |
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