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Profesional de Médico Veterinario / La calcificación arterial es un importante factor de riesgo asociado a morbilidad y
mortalidad cardiovascular. La arterioesclerosis o esclerosis de Mönckeberg es un tipo de calcificación que involucra específicamente a la túnica media arterial, aumentando la rigidez de vasos de distinto calibre. Una situación clínica en que se observa un desarrollo
rápido y agresivo de complicaciones cardiovasculares es la insuficiencia renal crónica,
donde existe una alteración del metabolismo fosfo-cálcico y la presencia de
hiperaldosteronismo, lo que contribuiría a la calcificación arterial y daño cardiovascular.
Estudios recientes indican que la arterioesclerosis ocurre mediante la captación activa de
fosfato por el tejido vascular, mediada por un cotransportador de fosfato dependiente de sodio (NaPi), que utiliza el fosfato como sustrato para la formación de cristales de
hidroxiapatita. NaPi-III es el mediador de la captación de fosfato en los tejidos
cardiovasculares, en los que se expresan dos isoformas: Pit-1 y Pit-2. Al aumentar la captación de fosfato, las células de músculo liso de la pared arterial sufren un cambio
fenotípico, activando un programa de diferenciación de tipo osteocondrogénica. En el presente trabajo se estudió el efecto de aldosterona sobre la actividad y expresión del
cotransportador sodio-fosfato NaPi-III y la diferenciación osteocondrogénica en el tejido arterial. Ratas macho fueron sometidas a nefrectomía 5/6 y divididas en 3 grupos: SHAM
(control), NPX (nefrectomía 5/6) y NPXspi (NPX más tratamiento con espironolactona, un
antagonista del receptor de aldosterona, 15 mg/Kg/día). Se extrajeron aortas de ratas sanas, las que fueron incubadas durante 18 a 24 horas con aldosterona y/o
espironolactona, obteniendo los siguientes grupos experimentales: CONTROL (vehículo),
ALDO (aldosterona 10-9 a 10-7 M), SPI (espironolactona 5*10-6 M) y ALDO+SPI
(aldosterona 10-7 M más espironolactona 5*10-6 M). La actividad de NaPi-III en anillos
aórticos fue evaluada mediante captación de 32P sensible a arseniato de sodio (10 mM) o
ácido fosfonofórmico (1 mM). Las ratas urémicas presentaron un significativo aumento en la actividad NaPi (SHAM: 196±8; NPX: 437±128 cpm/mg tejido húmedo/10 min; P < 0,05
vs SHAM). Espironolactona previno el aumento de la actividad NaPi (NPXspi: 173±38
cpm/mg tejido húmedo/10 min). Se realizaron western blot con un anticuerpo específico
para Pit-1 en los grupos de ratas, observándose un aumento significativo en la expresión de esta proteína en el grupo NPX, comparado con SHAM y NPXspi (SHAM: 1,334+0,139; NPX: 2,205+0,337; NPXspi: 1,027+0,328 unidades arbitrarias (u.a.); P < 0,05 NPX vs
SHAM y NPXspi). La actividad NaPi también aumentó significativamente en los explantes
8 del grupo ALDO (10-7 M) respecto al CONTROL (CONTROL: 242±30; ALDO: 868±67
cpm/mg tejido húmedo/10 min; P < 0,01). Mediante western blot se demostró que los
explantes arteriales presentaron un aumento dosis dependiente de Pit-1 frente a concentraciones crecientes de aldosterona (CONTROL: 1; ALDO 10-9 M: 1,228±0,197;
ALDO 10-8 M: 1,653±0,299; ALDO 10-7 M: 2,051±0,440 u.a.; obteniéndose una diferencia
significativa en los dos últimos grupos con respecto al CONTROL, P < 0,05) como también se observó la inhibición del efecto positivo de aldosterona sobre Pit-1, a través de
espironolactona, sin diferencias importantes entre los grupos CONTROL, SPIRO y ALDO+SPIRO y un aumento significativo de Pit-1 en el grupo ALDO (10-7 M) (CONTROL: 1; SPI: 1,032±0,072; ALDO: 1,599±0,281; ALDO+SPI: 1,045±0,120 u.a.; P < 0,05). Se evaluó mediante RT-PCR la abundancia relativa de mRNA del gen Cbfa-1, factor de
transcripción típico de la diferenciación osteocondrogénica, observándose un aumento importante en la expresión de este gen en los explantes estimulados con aldosterona 10-7
M (ALDO), mientras que no existe una diferencia significativa entre los grupos CONTROL,
SPI y ALDO+SPI (CONTROL: 0,92±0,15; SPI: 0,76±0,27; ALDO: 2,20±0,71; ALDO+SPI: 1,04±0,25 ng; P < 0,05). Estos resultados demuestran una regulación de la actividad y expresión de Pit-1 en el tejido arterial por aldosterona y su relación en la
activación del programa de diferenciación osteocondrogénica que ocurre en la
calcificación arterial.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/130806 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Berczeller Najum, Kathia Yael |
| Contributors | Michea Acevedo, Luis, Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias, Departamento de Ciencias Biológicas Animales, Farías Roldán, Gustavo, Galleguillos Caamaño, Marco |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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