[pt] O principal objetivo deste estudo foi avaliar a formação de metabólitos de fenantrenos, parental e alquilados, em urina de caranguejos da espécie Ucides cordatus. Foram realizados dois bioensaios em laboratório com exposição dos organismos ao fenantreno (2 ug.kg-1 e 3 ug.kg(-1))e um bioensaio com exposição aos homólogos alquilados de fenantreno 1-metilfenantreno e 2,6,9-trimetilfenantreno (0,0125 ug.kg-1 e 0,025 ug.kg(-1), respectivamente). O tempo do experimento médio foi de 96 h e nos tempos 0, 24, 48, 72 e 96 h foram coletadas amostras (1) urina para avaliação da resposta biológica através da formação de metabólitos, (2) hemolinfa para realização do ensaio do micronúcleo para verificar a formação de mutações celulares e (3) hepatopâncreas para determinação de HPA totais, principalmente os compostos de interesse no presente trabalho. Foram desenvolvidas metodologias para medidas de metabólitos em urina de caranguejo utilizando como ferramentas a cromatografia líquida de alta eficiência com detector de fluorescência (CLAE/F) e cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por espectrometria de massas (CL/EM) com APCI. Foi identificada a formação dos metabólitos hidroxifenantreno (OHF) e, outros metabólitos de fenantreno di e tri hidroxilados em amostras de urina injetadas com fenantreno e trimetilfenantreno. Ambas as metodologias apresentaram boa sensibilidade (LQ = 0,001 e 0,01 ug.mL(-1), respectivamente) e boa linearidade (r2 =0.9998 e 0,9997, respectivamente). Não foi observada presença de mutações nas células presentes nas lâminas de hemolinfa em nenhum dos grupos dos bioensaios. As análises de HPA realizadas nas amostras de hepatopâncreas mostraram aumento na concentração de fenantreno naqueles grupos nos quais foi injetado o composto fenantreno, e não foi observada alteração nas concentrações dos metilados de fenantreno naqueles grupos injetados com 1-metilfenantreno e 2,6,9-trimetilfenantreno. Os métodos se mostraram eficiente para uma avaliação preliminar da formação de metabólitos de fenantreno e 2,6,9-trimetilfenantreno. Porém as baixas concentrações de 1-metilfenantreno e 2,6,9-trimetilfenantreno as quais os caranguejos foram expostos, não permitiram uma melhor avaliação dos dados. / [en] The main goal of this study was to evaluate the formation of phenanthrenes metabolites, parental and alkylated, in crabs Ucides cordatus urine. Laboratory experiments were carried out exposing organisms to phenanthrene (2 ug.kg-1 and 3 ug.kg-1), to the phenanthrene homologues alkylated, 1-methylphenanthrene and 2,6,9-trimethylphenanthrene (0,0125 ug.kg-1 and 0,025 ug.kg-1, respectively), to a Arabe oil and to a PAH contaminated sediment. The experiment maximum time was 96 h and at 0, 24, 48, 72 and 96 h were collected samples of: (1) urine to perform tests in order to evaluate the biological response about the formation of phenanthrene metabolites, (2) hemolymph to perform the micronucleus assay in order to verify cell mutations formation and (3) hepatopancreas to the determination of total PAH, especially this work’s interest compounds. Methodologies were developed to metabolites measurements in crab’s urine using kind of tools as the high performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC/F) and high performance liquid chromatography with mass spectrometry detection (LC/MS). Were identified the formation of hydroxyphenanthrene (OHF) and other metabolites of phenanthrene, di- and tri-hydroxylated in urine samples injected with phenanthrene and trimethylphenanthrene. Both methods showed good sensitivity (LOQ = 0,001 and 0,01 ug.mL(-1), respectively) and good linearity (r2 = 0,9998 and 0,9997, respectively). There was no presence of mutated cells in the hemolymph slides in either group of bioassays. Analysis of PAH in hepatopancreas samples showed an
increase in phenanthrene concentration in those groups of which the phenanthrene was the compound injected, and there was no concentrations change in methylphenanthrene on those groups injected with 1-methylphenanthrene and 2,6,9 - trimethylphenanthrene. The methods were showed to be effective in a preliminary assessment of phenanthrene and 2,6,9-trimethylphenanthrene metabolites formation. But the 1-methylphenanthrene and 2,6,9-trimethylphenanthrene low concentrations which the crabs were exposed, did not allow having a better evaluation of the data to this groups.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:puc-rio.br/oai:MAXWELL.puc-rio.br:16977 |
| Date | 25 February 2011 |
| Creators | CARLA BORGES SETTE |
| Contributors | ANGELA DE LUCA REBELLO WAGENER |
| Publisher | MAXWELL |
| Source Sets | PUC Rio |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | TEXTO |
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