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Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este trabalho trata da extração de uma lectina da entrecasca de Sideroxylon obtusifolium
utilizando planejamento fatorial completo seguido da purificação da lectina através de
fracionamento salino e cromatografia de afinidade em quitina, além da caracterização
parcial e avaliação da atividade antimicrobiana. Os resultados revelaram que as melhores
condições de extração, obtidas através do planejamento fatorial 24 + 4 pontos centrais, foi a
na temperatura de 4ºC, com tempo de extração de 4h, em pH 6,0 e com a concentração de
NaCl 0,15 M. A partir destes dados, extrações em tampão citrato fosfato e fosfato de sódio,
na faixa de pH (6,0 a 7,5) foram efetuados sendo selecionada a extração em tampão citrato
fosfato, pH 6,5; o qual apresentou melhor atividade hemaglutinante específica (AHE) com
eritrócitos de coelho. O fracionamento salino revelou que a fração 60-80% (F60-80) foi a
que apresentou a maior AHE, a qual foi parcialmente inibida por glicose e totalmente
inibida por N-acetil-D-glicosamina. A lectina denominada SoBL (Sideroxylon Obtusifolium
Bark Lectin) foi obtida da cromatografia em quitina após eluição com ácido acético 1 M.
SoBL é uma proteína termoestável, mantendo sua AH até 100ºC, após 30 min de
aquecimento. A avaliação da estabilidade frente a diferentes valores de pH indicou que a
lectina apresentou maior AH no pH de 5,0. SDS-PAGE mostrou que SoBL é uma lectina de
baixa massa molecular (6,0 kDa) e não glicosilada. SoBL (40μg) não inibiu o crescimento
das bactérias Bacillus subtilis, Streptococcus faecalis, Staphylococcus aureus,
pseudomonas aeroginosa e Klebsiela pneumoniae e dos fungos do gênero Fusarium. Em
conclusão, uma lectina termoestável e de baixa massa molecular foi obtida da entrecasca de
S. obtusifolium por cromatografia de afinidade em quitina, a qual aparentemente, não
apresentou atividade antimicrobiana
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1693 |
Date | 31 January 2010 |
Creators | Firmino de Santana, Mauricélia |
Contributors | Tereza dos Santos Correia, Maria |
Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Portuguese |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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