FERNANDES, C. P. Detecção de streptococcus mutans e avaliação da expressão de marcadores teciduais em placas ateroscleróticas de pacientes com doença vascular e vasos sadios. 2017. 87 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by PPGO UFC (ufcppgo@gmail.com) on 2017-05-31T13:53:05Z
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Previous issue date: 2017-03-06 / Over the past few years, the association between oral bacteria and atherosclerosis has been
investigated, and studies have suggested that cariogenic bacteria are directly and indirectly
involved in the etiopathogenesis and progression of this disease. Streptococcus mutans (SM)
has demonstrated the ability to invade and cause damage to endothelial cells, favor the
adhesion of leukocytes in vascular endothelium and promote the transformation of
macrophages into foam cells, events directly related to the development of atherosclerosis.
This microorganism has been detected in atherosclerotic plaques with variable frequency, and
laboratory studies have investigated its role in the activation of inflammatory and
thrombogenic markers, which are indirectly associated with the pathogenesis of this disease.
However, the pathogenic mechanism of atherosclerosis is not yet fully elucidated, and the role
of oral bacteria needs to be extensively investigated. The present study aimed to evaluate the
association between the presence of SM and tissue and inflammatory alterations in vessels
with atherosclerosis. A total of 13 atherosclerotic plaques, collected from patients with carotid
stenosis or aortic aneurysm, and 10 control samples of healthy blood vessels (aortic and
carotid arteries) collected during necropsy procedure, were submitted to Real-time
Polymerase Chain Reaction (qPCR), histopathological analysis, histochemical analysis by
Giemsa staining (GS) and immunohistochemical analysis for SM, IL-1!, TNF-", CRP,
osteopontin, fibrinogen and CD61 (Streptavidin-biotin-peroxidase method). All
microscopically healthy control specimens were positive for SM only through qPCR, whereas
atherosclerotic plaque specimens were positive for SM through qPCR and
immunohistochemistry, and showed histopathological characteristics of severe atherosclerosis
(100%). Presence of fibrous tissue (100.0%) and calcification (92.3%) were the most frequent
features, followed by thrombus formation (84.6%), mononuclear inflammatory cells (76.9%)
and presence of core lipid (61.5%). GC showed that streptococcus colonized areas of core
lipid, fibrous tissue and calcification, and was not positive in vessels of the control group. All
13 atherosclerotic plaques, immunopositive for SM, were positive for the fibrinogen, IL-1!,
osteopontin and CD61 antibodies, whereas immunoexpression for CRP and TNF-" was
evidenced in 12 samples (92.3%). The reactivity to IL-1!, TNF-", osteopontin and CD61 was
not found in the control samples, immunonegative to SM, but in some cases,
immunoexpression of fibrinogen (60.0%) and PCR (50.0%) was observed. The detection of
SM in atherosclerotic plaques, in addition to the visualization of Streptococcus in areas of
tissue alteration, suggests that in these samples, microorganisms found a favorable
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environment for their proliferation. In addition, positive immunoexpression of TNF-", IL-1!,
fibrinogen, CRP, osteopontin and CD61 in atherosclerotic plaque samples immunopositive to
SM may suggest a possible association with atherosclerosis. / Nos últimos anos, a relação entre bactérias orais e aterosclerose tem sido investigada, e
estudos têm sugerido que bactérias cariogênicas participam direta e indiretamente da
etiopatogênese e progressão dessa doença. Streptococcus mutans (SM) tem demonstrado a
capacidade de invadir e causar dano às células endoteliais, favorecer a aderência de leucócitos
no endotélio vascular e promover a transformação de macrófagos em células espumosas,
eventos diretamente relacionados ao desenvolvimento da aterosclerose. Essa bactéria tem sido
detectada em placas ateroscleróticas com variável frequência, e estudos laboratoriais têm
pesquisado sua relação com a ativação de marcadores inflamatórios e trombogênicos, que são
indiretamente associados à patogênese dessa doença. Porém, o mecanismo patogênico da
aterosclerose ainda não está completamente elucidado, e o papel de bactérias orais precisa ser
amplamente investigado. O presente estudo teve por objetivo avaliar a relação entre a
presença de SM e alterações teciduais e inflamatórias em vasos com acometimento de
aterosclerose. Um total de 13 placas ateroscleróticas, coletadas de pacientes com estenose de
carótida ou aneurisma de aorta, e dez amostras-controle de vasos sadios (artérias carótida e
aorta), coletadas durante procedimento de necropsia, foram submetidas a Reação em Cadeia
da Polimerase em tempo real (qPCR), análise histopatológica, análise histoquímica por
coloração de Giemsa (CG) e análise imuno-histoquímica para SM, IL-1!, TNF-", PCR,
osteopontina, fibrinogênio e CD61 (método da estreptavidina-biotina-peroxidase). Todas as
amostras-controle, microscopicamente sadias, foram positivas para SM apenas através de
qPCR, enquanto que as amostras de placa aterosclerótica apresentaram positividade para SM
através de qPCR e imuno-histoquímica, além de exibirem características histopatológicas de
aterosclerose severa (100%). Presença de tecido fibroso (100,0%) e calcificação (92,3%)
foram as características mais frequentes, seguidas de formação de trombo (84,6%), células
inflamatórias mononucleares dispersas (76,9%) e presença de core lipídico (61,5%). A CG
mostrou que os Estreptococcus colonizaram áreas de core lipídico, tecido fibroso e
calcificação, não sendo positiva nos vasos do grupo controle. Todas as 13 amostras de placa
aterosclerótica, imunopositivas para SM, foram positivas para os anticorpos fibrinogênio, IL-
1!, osteopontina e CD61, enquanto que imunoexpressão para PCR e TNF-" foi evidenciada
em 12 amostras (92,3%). A reatividade para IL-1!, TNF-", osteopontina e CD61 não foi
encontrada nas amostras-controle, imunonegativas para SM, porém, em algumas, observou-se
imunomarcação para fibrinogênio (60,0%) e PCR (50,0%). A detecção de SM em placas
ateroscleróticas, além da visualização de Estreptococcus em áreas de alteração tecidual,
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sugere que nessas amostras, os micro-organismos encontraram ambiente favorável para sua
proliferação. Além disso, imunoexpressão positiva de TNF-", IL-1!, fibrinogênio, PCR,
osteopontina e CD61 em amostras de placa aterosclerótica imunopositivas para SM pode
sugerir uma possível relação com a aterosclerose.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.repositorio.ufc.br:riufc/22940 |
| Date | 06 March 2017 |
| Creators | Fernandes, Clarissa Pessoa |
| Contributors | Sousa, Fabrício Bitu |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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