A polifenoloxidase (PFO) é uma enzima cúprica que catalisa a oxidação de difenóis
em quinonas e tem ampla distribuição entre os vegetais. A atividade dessa enzima
foi medida para a construção de um biossensor, para determinação de adrenalina, e
os melhores resultados foram obtidos com a banana (Musa sp.). O cálculo da
atividade enzimática proporcionou um valor de 974 UA (Unidades de Atividade). O
biossensor foi construído com pasta de carbono, 50 UA em tampão fosfato (pH=
7,00) suportada em agulha de aço inoxidável ou tubo de polietileno.
Constatou-se morosidade no restabelecimento da linha base a qual foi corrigida
com a adição de H2O2 na solução diminuindo o tempo para 10 minutos. O
biossensor (com polietileno) apresentou resposta linear para adrenalina, em solução
tampão, entre 8,00x10-9 e 8,00x10-4 mol L-1 (LD = 8,00x10-9 mol L-1). Para amostras
de medicamentos os resultados obtidos com o método proposto e com o método
descrito na Farmacopéia Brasileira (1977) foram concordantes. Para amostras de
sangue, usando calibração por ajuste de matriz, a faixa linear foi de 8,00x10-7 a
8,00x10-3 mol L-1 (LD = 8,00x10-7 mol L-1). Obteve-se 89,4 % nos testes de
recuperação. Testes in vivo, onde os eletrodos foram inseridos na veia jugular de
ratos Wistar, apresentaram resultados promissores. / Polyphenoloxidase (PPO) is a cupric enzyme that catalyzes the oxidation of
diphenols in quinones and is widely distributed among the vegetables. The activity of
this enzyme was measured for a biosensor construction for adrenaline determination,
and the banana (Musa sp.) extract presented better results. The calculation of the
enzymatic activity provided a value of 974 UA (Units of Activity). It was constructed
biossensor with: carbon paste containing 50 UA in phosphate buffer (pH=7,00), into
stainless steel needles or polyethylene tube. Slow reestablishment of the baseline
was evidenced and it was corrected with the addition of H2O2 to the solution,
decreasing the return time to 10 minutes. The biosensor (with polyethylene) provides
a linear range from 8,00x10-9 to 8,00x10-4 mol L-1 (LOD = 8,00x10-9 mol L-1) in buffer
solution for adrenalin. The results obtained with the proposed method and the
Farmacopéia Brasileira (1977) was in agreement. For blood samples, using matrix
matching calibration, the linear range was from 8,00x10-7 to 8,00x10-3 mol L-1 (LOD =
8,00x10-7). In the recovery tests, 89,4% of the added value was obtained. In vivo
studies, electrodes were inserted in the jugular vein of the Wistar rat and showed
promising results.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/303 |
| Date | 21 December 2007 |
| Creators | MATAVELI, Lidiane Raquel Verola |
| Contributors | LUCCAS, Pedro Orival, http://lattes.cnpq.br/3672437413599685, TARLEY, César Ricardo Teixeira, SILVA, José Maurício Schneedorf Ferreira da |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Instituto de Ciências Exatas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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