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Perfil de suscetibilidade e detec??o de marcadores gen?ticos de resist?ncia em Streptococcus Agalactiae isolados de amostras animais e humanas

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Previous issue date: 2008-10-09 / Streptococcus agalactiae, also referred as group B streptococci (GBS) are commensals
microorganisms adapted to asymptomatic colonization of the mammalians gut and
genitourinary tract. Initially, this specie was recognized as a major etiologic agent for bovine
mastitis but has becoming a leading cause of invasive infections in human neonates. The
reasons behind the prompt and persistent emergence of GBS neonatal disease have not been
completely elucidated, once human and bovine GBS populations are assumed be distinct and
unrelated by divergence on their own physiological characters. Aiming to contribute for the
characterization of the two S. agalactiae sub-populations that are in a proximal coexistence in
the Rio de Janeiro state, this study evaluated phenotypic and genotypic diversity aspects of
regional groups of GBS. The first made up of 50 isolates obtained from human specimens
whilst the other group was constituted of 36 isolates from milk of dairy cows presenting
clinical or sub clinical mastitis. Phenotypic characterization was based on physiological and
serological tests, antimicrobial susceptibility assays were carried out by the disk standard
procedure and microdilution method. The genetic aspect was assessed by PCR for detection of
genes associated with resistance to tetracycline. According to the results of physiologic tests,
β-hemolysis was a faculty shared by about 28% of bovine isolates and 100% of human
isolates. GBS bovine isolates also shows different profile of sensitivity to bacitracin, only
33% of them were susceptive to the antibiotic, regardless of the whole human isolates set had
demonstrated a 100% susceptive pattern to this substance. A 100% sensitivity percentual to
penicillin was shared by all isolates assayed in this study corroborating the general procedure
for antibiotic therapy of GBS infection. Otherwise, and in an overall view, bovine isolates
showed higher resistance rates to a set of antibiotics, including cephoxitin, erytromicin,
clyndamicin, sulphamethoxazole, azithromycin and ciprofloxacin than in their human
counterparts. In a similar sense, it was observed in this study that 13,9% of the animal GBS
isolates expressed cMLSB and 2,8 % M phenotypes. The M phenotype was expressed in 6%
of the human related isolates as the unique MLSB parameter. Genetical assays performed
detected 13,8% (5/36) and 14% (7/50) for tet (M), and 30,5% (11/36) and 10% (5/50) for de
tet (O), respectively, in bovine and human isolates. These genes are implicated in tetracycline
resistance by ribosome protection mechanism through enzymatic structural modification. / Os Streptococcus agalactiae, tamb?m designados como estreptococos do grupo B
(EGB), s?o microrganismos comensais adaptados para fazer a coloniza??o assintom?tica do
tubo digestivo, e do trato geniturin?rio de mam?feros. Inicialmente, reconhecida como um dos
mais importantes agentes etiol?gicos da mastite bovina, esta esp?cie foi tamb?m implicada
como uma das principais causas de infec??es invasivas em rec?m-nascidos humanos. As
raz?es para a r?pida e consistente evolu??o do EGB como importante agente causal de
infec??es neonatais ainda n?o foram completamente elucidadas, uma vez que as
subpopula??es de EGB nos isolados de humanos e bovinos s?o independentes e distintas com
base no reconhecimento da diversidade de suas caracter?sticas fisiol?gicas. Com o objetivo de
contribuir para a caracteriza??o das duas subpopula??es de S. agalactiae que coexistem no
Estado do Rio de Janeiro, este estudo avaliou aspectos da diversidade gen?tica e fenot?pica de
dois grupos de EGB regionais, sendo o primeiro composto por 50 isolados obtidos a partir de
esp?cimes cl?nicos humanos, e o segundo constitu?do por 36 isolados a partir de leite de vacas
leiteiras com ind?cios de mastite cl?nica ou subcl?nica. A caracteriza??o fenot?pica dos
isolados foi baseada em testes sorol?gicos e fisiol?gicos, testes de suscetibilidade
antimicrobiana realizados com t?cnica padronizada para utiliza??o de disco de difus?o e pelo
m?todo de microdilui??o. O aspecto gen?tico foi avaliado pela aplica??o de PCR para
detec??o de genes associados ? resist?ncia ? tetraciclina. Os testes fisiol?gicos demonstraram
que a capacidade de promover β-hem?lise era uma caracter?stica partilhada por cerca de 28%
dos isolados a partir do material de natureza bovina, mas que manifestava-se em todos os
isolados de origem humana. Os isolados de EGB bovinos tamb?m mostraram um perfil
diferente quanto ? sensibilidade ? bacitracina, uma vez que apenas 33% delas se revelaram
suscet?veis a esse antibi?tico contra 100% de sensibilidade para os isolados de origem
humana. O percentual de 100% de sensibilidade ? penicilina demonstrado por todos os
isolados analisados neste estudo, tamb?m corrobora a import?ncia do uso desse antibi?tico
como procedimento geral na terapia de infec??es por EGB. De uma forma geral, neste estudo
foi observado que os isolados originados de material bovino demonstraram percentuais de
resist?ncia ao conjunto de antibi?ticos analisados (cefoxitina, eritromicina, clindamicina,
sulfametoxazol, azitromicina e ciprofloxacina) superiores aos observados em isolados de
material humano. Foi tamb?m observado que 13,9% dos isolados de EGB animais
examinados expressaram o fen?tipo cMLSB e 2,8% o fen?tipo M. O fen?tipo M foi o ?nico
par?metro MLSB expresso entre os isolados de S. agalactiae humanos, com um percentual de
6%. Quanto ? presen?a de genes de resist?ncia a tetraciclina entre as subpopula??es de EGB,
detectou-se percentuais de 13,8% (5/36) e 14% (7/50) para tet(M), e 30,5% (11/36) e 10%
(5/50) para tet(O), respectivamente, nos isolados bovinos e humanos avaliados. Estes genes
est?o implicados na resist?ncia ? tetraciclina por um mecanismo prote??o ribossomal, pela
altera??o estrutural mediada por a??o enzim?tica.
Palavras-chave: Streptococcus agalactiae, caracteriza??o fenot?pica, gene tet

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:tede/870
Date09 October 2008
CreatorsCunha, Cleia Maria Monteiro da
ContributorsSouza, Miliane Moreira Soares de
PublisherUniversidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Programa de P?s-Gradua??o em Microbiologia Veterin?ria, UFRRJ, Brasil, Microbiologia Veterin?ria
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJ, instname:Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, instacron:UFRRJ
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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