Le neuroblastome pédiatrique à haut risque est incurable malgré l’intensification des traitements.
Chez le patient, les cellules de neuroblastome échappent à l’activité anticancéreuse des cellules
immunitaires Natural Killer (NK). Or, lorsque cultivées in vitro en monocouche (2D), les cellules
de neuroblastomes redeviennent sensibles à l’activité cytotoxique des cellules NK ce qui ne
reflètent pas leur résistance dans les tumeurs in situ. Nous faisons l'hypothèse que lorsque
cultivées en 3D sous forme de sphéroïdes, les cellules de neuroblastome pourraient retrouver
certaines caractéristiques qui les rendraient plus représentatives des tumeurs in situ au niveau
immunologique. Ainsi, un tel modèle préclinique pourrait mieux refléter la résistance aux cellules
NK et servir de modèle de criblage pour la découverte de médicaments potentialisant la
cytotoxicité des cellules NK. Pour répondre à cette question, nous avons développé un système
de culture cellulaire 3D utilisant plusieurs lignées cellulaires de neuroblastome. À ce système, une
co-culture en 3D avec une lignée de cellules Natural Killer (NK92) a été mise en place. Nous avons
mis en évidence que les sphéroïdes de neuroblastome présentent des changements d’expression
de certains gènes qui sont retrouvées chez les patients ainsi qu’une plus grande résistance à
l’activité cytotoxique des cellules NK92 en comparaison avec les lignées en monocouche. Les co cultures de sphéroïdes ont été exposées à des inhibiteurs de protéines impliquées à différents
niveaux de l’épigénome afin de découvrir des médicaments qui sensibiliseraient les cellules de
neuroblastome à l’activité cytotoxique des NK92. Une différence dans la sensibilité aux
médicaments entre les sphéroïdes et les cellules en 2D ainsi qu’en monoculture ou en co-culture
a été observée et certains composés ont été identifiés en vue de potentialiser l’activité des
cellules NK92. Ainsi, nos études ont permis de mieux comprendre les mécanismes impliqués dans
la résistance des cellules du neuroblastome à l’activité cytotoxique des cellules NK dans un
modèle plus représentatif de la tumeur in situ. / High-risk pediatric neuroblastoma remains incurable despite intensified treatments. In patients,
neuroblastoma cells evade the anti-cancer activity of Natural Killer (NK) immune cells. However,
when cultured in vitro in a monolayer (2D), neuroblastoma cells become sensitive to the cytotoxic
activity of NK cells, which does not reflect their resistance in tumors in situ. We hypothesize that
when cultured in 3D in the form of spheroids, neuroblastoma cells could regain certain
characteristics that would make them representative of tumors in situ at the immunological level.
Thus, such a preclinical model could better reflect NK cell resistance and serve as a screening
model for drug discovery to discover a treatment that can potentiate NK cell cytotoxicity. To
answer this question, we developed a 3D cell culture system using several neuroblastoma cell
lines. To this system, a 3D coculture model with a Natural Killer (NK92) cell line was set up. We
have shown that neuroblastoma spheroids develop changes in the expression of certain genes
that are found in patients as well as greater resistance to NK92 cells compared to monolayer cell
lines. Spheroid cocultures were exposed to inhibitors of proteins involved at different levels of
the epigenome to discover drugs that would sensitize neuroblastoma cells to the cytotoxic activity
of NK92. A difference in drug sensitivity between spheroids and cells in 2D as well as in
monoculture or coculture was observed and some compounds were identified to potentiate the
activity of NK92 cells. Thus, our studies have provided a better understanding of the mechanisms
involved in the resistance of neuroblastoma cells to the cytotoxic activity of NK cells in a more
representative model of the tumor in situ.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/28427 |
| Date | 08 1900 |
| Creators | Mardhy, Mohamed Walid |
| Contributors | Raynal, Noël J-M |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | fra |
| Detected Language | French |
| Type | thesis, thèse |
| Format | application/pdf |
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