Orientador: Helia Harumi Sato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T07:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2002 / Resumo: A linhagem 191, isolada previamente no laboratório de Bioquímica da FEA-UNICAMP e identificada como Cellulomonas cartae, é uma boa produtora da enzima 'beta' 1,3-glucanase envolvida na lise da parede celular de levedura. O objetivo deste trabalho foi o estudo da 'beta'-1,3-glucanase lítica produzida pela linhagem C. cartae 191; sua produção em meio de cultura, purificação e a clonagem molecular do gene que codifica essa enzima. A linhagem 191 foi crescida em meio contendo diferentes indutores e as condições de cultivo foram otimizadas através de planejamento experimental para o aumento da produção dessa enzima. A 'beta'-1,3-glucanase lítica foi purificada do sobrenadante do meio de cultura através de ultrafiltração (membrana de exclusão de 10 kDa), cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-Sepharose equilibrada em tampão acetato de sódio O,OIM, pH 5,5 e eletroforese em SDS-PAGE. A região N-terminal dessa proteína foi seqüenciada e o gene da 'beta'-1,3-glucanase foi isolado do genoma de C. cartae 191. O gene que codifica essa enzima foi seqüenciado e clonado em células de Escherichia coli DH5a ...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The strain Cellulomonas cartae 191, which was previously isolated by the Biochemistry laboratory at FEA-UNICAMP, shows a good 'beta' -1,3-glucanase production. The 'beta'-1,3-glucanase enzyme has an important role in yeast celllysis. The aim ofthis work was to study the lytic 'beta'-1,3-glucanase from C. cartae 191; its production, purification and
molecular cloning of this gene. The strain 191 was grown on a medium containing different carbon sources and the 'beta'-1,3-glucanase production was studied by experimental design. The lytic enzyme was purified from the crude supematant by ultrafiltration (10 kDa cut off membrane), ion exchange chromatography with a DEAE-Sepharose column, equilibrated in
0.01 M sodium acetate buffer at pH 5.5 and SDS-PAGE electrophoresis. The N-terminal sequence ofthe lytic enzyme was obtained and the 'beta'-1,3-glucanase gene was isolated from C. cartae 191 genome and subsequently cloned in Escherichia coli DH5a cells ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/254336 |
| Date | 10 August 2002 |
| Creators | Soares, Giselle Alessandra Martins |
| Contributors | UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Sato, Helia Harumi, 1952-, Teixeira, Marcelo Menossi, Filho, Francisco Maugeri, Alencar, Severino Matias de, Pastore, Glaucia Maria |
| Publisher | [s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia de Alimentos, Programa de Pós-Graduação em Ciência de Alimentos |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | 150p. : il., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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