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Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As colagenases são enzimas, obtidas a partir de procariotos e eucariotos, que
clivam a cadeia protéica do colágeno em pH e temperatura fisiológicos. Estas
enzimas são empregadas em diversas aplicações industriais com destaque para a
indústria farmacêutica, onde são aplicadas no tratamento médico de feridas,
cicatrizes e queimaduras. A proposta para a utilização do sistema de duas fases
aquosas (SDFA) é devido à alta relação custo-benefício, baixa tensão interfacial,
fácil escalonamento e a sua capacidade de purificar uma proteína em um ambiente
rico em água (80-90%), o que favorece a estrutura protéica e retém assim a sua
atividade biológica após purificação. Este trabalho visa à purificação de colagenase
produzida por Penicillium aurantiogriseum (URM-4622) utilizando SDFA PEG/fosfato.
O planejamento experimental (23) foi usado para selecionar as variáveis
significativas no processo de purificação, e a massa molar do PEG (MMPEG),
concentração do PEG (CPEG) e concentração do fosfato (CFOS) foram as variáveis
estudadas. O sistema de duas fases aquosas foi composto de PEG 550, 1500 e
4000 g/mol nas concentrações de 15, 17,5 e 20% (m/m) e concentrações de fosfato
de 12,5, 15 e 17,5% (m/m). As variáveis de resposta escolhidas foram: coeficiente
de partição (K), rendimento de atividade (Y) e fator de purificação (PF). Os dados e
gráficos obtidos passaram por análise estatística. Observou-se que PEG de massa
molar 550 (g/mol) em concentração de 20% (p/p), concentração de fosfato 17,5%
(p/p) e pH 6.0 foram as melhores condições para purificação de colagenase. Estas
condições geraram um coeficiente de partição de 1,01, um rendimento de atividade
de 242% e fator de purificação de 23,5. Os resultados mostraram que SDFA foi
seletivo para colagenase e esta enzima particionou para a fase rica em polímero
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1602 |
Date | 31 January 2009 |
Creators | Ubertino Rosso, Bruno |
Contributors | das Graças Carneiro da Cunha, Maria |
Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Portuguese |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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