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Previous issue date: 2000-07-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Estudou-se criopreservação do sêmen canino, utilizando dois diluidores e dois protocolos de resfriamento do sêmen, para avaliar o efeito desses sobre a qualidade espermática in vitro, após a congelação/descongelação. Os meios diluidores utilizados foram o Tris-citrato e o Tes-Tris e os procedimentos de resfriamento foram realizados em um congelador de células digital e em caixa de isopor. O experimento foi conduzido no Laboratório de Reprodução Animal - DVT-UFV, utilizando-se três machos, submetidos a uma coleta de sêmen por semana, durante cinco semanas, totalizando quinze amostras, em cada delineamento experimental. Os testes in vitro aplicados às amostras de sêmen foram os de: avaliação da motilidade espermática progressiva, vigor espermático, avaliação da integridade da membrana plasmática e do acrossoma, por meio dos testes hipo-osmótico (HOS-T) e câmara úmida, respectivamente e avaliação da longevidade espermática, por meio do teste de termo-resistência rápido (TTR). A análise comparativa entre os meios diluidores evidenciou que o meio diluidor Tris-citrato foi superior (P<0,05) ao meio Tes-Tris, por ter obtido nos resultados de todos os testes in vitro, valores em torno de 15% mais altos. Concluiu-se, portanto, que o Tris-citrato foi mais eficiente em conservar a qualidade espermática, por ter mantido viável uma maior porcentagem de espermatozóides, após a criopreservação. Houve correlação positiva entre vários testes, indicando coerência entre os resultados. A análise comparativa dos protocolos de resfriamento demonstrou que não houve diferença (P>0,05) entre a caixa de isopor e o biocool, logo após o resfriamento. Após a descongelação, os resultados demonstraram que houve igualdade entre os protocolos quanto ao vigor espermático, ao HOS-T e a condição de acrossoma, havendo diferença (P<0,05) apenas na motilidade espermática após a descongelação e durante o teste de termo-resistência, que foram superiores quando o sêmen foi resfriado na caixa de isopor. A curva de resfriamento na caixa de isopor foi de, aproximadamente, -0,45°C/min. e no biocool de -0,55°C/ min., porém, na caixa de isopor a queda de temperatura não foi constante durante os 60 minutos do resfriamento, sendo que nos primeiros dez minutos a temperatura diminuiu 13°C. Parece que o perfil dessa curva favoreceu a manutenção das reservas energéticas dos espermatozóides, por terem tido seu metabolismo mais rapidamente diminuído. Os resultados dos testes para ambos os diluidores e ambos protocolos de resfriamento são compatíveis com os considerados normais para o sêmen criopreservado na espécie canina. / A study on different extenders and cooling systems on the canine semen was taken, in order to evaluate the effects on in vitro characteristics of cryopreserved spermatozoa. The extenders studied were Tris-citrate and Tes-Tris and the cooling systems were accomplished in a programmable cells freezer and in a polystyrene container. The experiment took place at the Animal s Reproduction Laboratory-DVT-UFV, where three stud dogs were collected weekly for five weeks for each experiment protocol. The in vitro evaluations applied to the semen samples were sperm motility and forward progression, plasm membrane and acrosome integrity, through hypo-osmotic swelling test and phase contrast microscopy, respectively and semen longevity, through the thermo resistance test. A comparative analysis between the extenders has showed that Tris-citrate was superior (P<0,05) to Tes-Tris because the results of all the in vitro evaluations after cryopreservation were 15% higher for the first compared to the second extender. It was concluded, therefore, that Tris-citrate was more xivefficient in preserving spermatozoa quality because it has maintained the viability of a larger percentage of them, after cryopreservation. The results of the tests are in agreement with the standard values for the freezing semen in dogs and there was also positive correlation among several semen evaluations, showing relationship among the results. The comparative analysis of the cooling systems has showed that there was no difference (P>0,05) between the programmable freezer and the polystyrene container, immediately after cooling and equilibration time. However, after freezing and thawing the results of forward progression, HOS-T and acrosome integrity was equal for both cooling systems but the motility and thermo resistance test was better (P<0,05) at polystyrene container. The cooling rate at this system was approximately -0,45°C/min. and at the programmable freezer was -0,55°C/ min.. The temperature fall was not constant at the polystyrene container and dropped faster on the beginning of the cooling time, it seems that this cooling rate at the polystyrene container favored the maintenance of spermatozoa energy sources. The tests results for both procedures were close to the standard values for the freezing semen in dogs.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:123456789/10583 |
| Date | 07 July 2000 |
| Creators | Bueno, Regina |
| Contributors | Guimarães, José Domingos, Paula, Tarcísio Antônio Rego de, Costa, Eduardo Paulino da |
| Publisher | Universidade Federal de Viçosa |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFV, instname:Universidade Federal de Viçosa, instacron:UFV |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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