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Cultivo in vitro e citogenética de Cyrtopodium saintlegerianum Rchb. f.(Orchidaceae: Cyrtopodiinae) / In vitro culture and Cytogenetic of Cyrtopodium saintlegerianum Rchb. f. (Orchidaceae: Cyrtopodiinae)

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Previous issue date: 2012-10-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / CyrtopodiumsaintlegerianumRchb. f is an epiphytic species typical of the Midwest, especially in
distributed Brazilian Central Plateau, and has a wide geographical distribution in Brazil. It is usually found in the
trunks of palm trees, forming large clumps. It has good features for ornamentation, for the beauty and size of its
inflorescence, however, are not found in the literature about its conservation, methods for its spread or that could be
used in floriculture and landscaping. Thus, this study aimed to establishing protocols for germination asymbiotic
effects of phytohormones and acclimatization and characterization of chromosomal species. In 2010, the establishment
of micropropagation protocols, capsules were collected in a pasture area in the municipality of Mossâmedes, GO, then
the part previously sterilized seeds were separated and tested in a 1% tetrazolium dye.. For cultivation was tested
asymbiotic different culture media and then tested after different concentrations and combinations in treatments BAP
16 / ANA, to finally evaluate the acclimatization substrates combined and fertilized with chemical fertilizers and
organic. For the karyotype of the species, the plant material is derived from plants grown in vitro in culture medium.
We tested four protocols, with differences in enzyme solution for softening the roots, dyes, anti-mitotic concentration
of the solution and hydrolysis, and the use of growth regulators for root induction in vitro. All protocols were in
common roots pretreated with anti-mitotic 8-hydroxyquinoline (0.002 M) in refrigerator for 24 hours. Then protocols
roots were fixed in Carnoy 3:1 for 18 hours the first and second and third and fourth protocol for 24 hours at room
temperature. After stored at -20 º C in the same fixative for further analysis (only the fourth protocol). The roots of the
protocols were stained with different dyes: hematoxylin, Schiff, acetic orcein and Giemsarespectively.The results of
germination was satisfactory in all culture media. For medium supplemented with auxin / cytokinin combined the best
concentrations for variable height were 0.2 mg L-1 NAA and BAP without adding control without addition of
regulators. The best means to induce large numbers of shoots were 4 mg L-1 BAP and 4 mg L-1 BAP / 0.2 mg L-1 NAA.
The number of leaves was rated best in the concentrations of BAP without NAA at concentrations of 1.0, 2.0 and 4.0
mg L-1. The treatments with the highest number of roots were control without added growth regulators at doses of 0.2,
0.5, 1.0 mg L-1 NAA without addition of BAP, as well as the length of roots was favored by the same treatments. The
largest number occurred in callus treatment with concentrations of 1.0 mg L-1 BAP without adding ANA. ForcytogeneticsC. saintlegerianum the best protocol was evaluated with the regulator which was obtained metaphases,
however chromosomes were condensed, and the number of chromosomes was found to be 2n = 48.
cides. / CyrtopodiumsaintlegerianumRchb. f é espécie epífita da região Centro-Oeste,
distribuída no Planalto Central brasileiro, e tem ampla distribuição geográfica no Brasil. É
encontrada em de troncos de palmeiras, formando grandes touceiras. Possui características para
ornamentação, pela beleza de sua inflorescência, contudo não são encontrados na literatura estudos
sobre sua conservação ou propagação. Assim, esse trabalho teve como objetivo o estabelecimento
de protocolos para germinação assimbiótica, efeitos de fitohormônios, aclimatização e a
caracterização cromossômica da espécie. Em 2010, para o estabelecimento de protocolos para a
micropropagação, cápsulas foram coletadas em uma área de pastagem no município de
Mossâmedes, GO, foram previamente desifestadas em seguida parte das sementes foram separadas
e testadas em corante tetrazólio a 1%. Para o cultivo assimbiótico, foram testados diferentes meios
de cultura e diferentes concentrações e combinações de BAP/ANA em 16 tratamentos. Foram
testados substratos combinados e adubação com fertilizante químico e orgânico para a
aclimatização das plântulas. Para o cariótipo da espécie, o material vegetal foi proveniente de
plantas cultivadas in vitro em meio de cultura. Foram testados quatro protocolos, com diferenças
quanto a solução enzimática para o amolecimento das raízes, os corantes, concentração do antimitótico
e solução de hidrólise, e o uso de regulador de crescimento para indução de raízes in vitro.
Todos os protocolos tiveram em comum raízespré-tratadas com anti-mitótico 8- hidroxiquinoleína
(0,002M) em geladeira durante 24 horas. Em seguida nos protocolos as raízes foram fixadas em
Carnoy 3:1 por 18 horas o primeiro e o segundo protocolo e o terceiro e o quarto por 24 horas em
temperatura ambiente. Depois estocados a -20ºC no próprio fixador, para posterior análise (apenas
o quarto protocolo). As raízes dos protocolos foram coradas com diferentes corantes: hematoxilina,
reativo de Schiff, orceína acética e Giemsa respectivamente. A germinação foi satisfatória em todos
os meios de cultura. Para o meio suplementado com auxina/citocinina combinadas as melhores
concentrações para a variável altura foi 0,2 mg L-1 de ANA sem adição de BAP e o controle sem
adição de reguladores. Os melhores meios que induziram grande número de brotações foram 4 mg
L-1 de BAP e 4 mg L-1 de BAP / 0,2 mg L-1 de ANA. O número de folhas foi melhor avaliado nas
concentrações de BAP sem ANA nas concentrações 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1. Os tratamentos com
maior número de raízes foram o controle sem adição de reguladores de crescimento, e nas
dosagens de 0,2, 0,5, 1,0 mg L-1 de ANA sem adição de BAP, assim como o comprimento da
maior raiz foi favorecido pelos mesmos tratamentos. O maior número de calos se deu no
tratamento com concentrações de 1,0 BAP mg L-1 sem adição de ANA. Para a citogenética de C.
saintlegerianumo melhor protocolo avaliado foi com regulador no qual foi obtido metáfases, no
entanto os cromossomos se encontravam condensados, e o numero de cromossomos encontrado foi
de 2n=48.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/9121
Date30 October 2012
CreatorsSilva, Daniella Mota
ContributorsSibov, Sérgio Tadeu, Sibov, Sérgio Tadeu, Takane, Roberto Jun, Faria, Ricardo Tadeu de
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Genética e Melhoramento de Plantas (EA), UFG, Brasil, Escola de Agronomia - EA (RG)
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess
Relation-6265679607231828330, 600, 600, 600, 600, -6046953723502374070, -3091138714907603907, 2075167498588264571

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