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Previous issue date: 2010 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / No Brasil, estima-se que os rotavírus causem 3.352.053 episódios de diarreia, 655.853 ambulatoriais, 92.453 hospitalizações e 850 mortes envolvendo crianças menores de 5 anos de idade. Os rotavírus pertencem à família Reoviridae, gênero Rotavirus. A partícula viral é constituída por três camadas proteicas concêntricas e pelo genoma viral reunindo 11 segmentos de RNA com dupla fita. Reconhecem-se 23 genótipos G e 31 genótipos P. Dentre os genótipos G detectados até o momento, o G2 atua como um dos mais importantes, estando geralmente associado ao genótipo P[4]. Nos últimos três anos se tem observado em larga escala global a reemergência do genótipo G2, sendo um dos mais detectados nos anos que sucederam a implantação da vacina contra rotavírus, particularmente no Brasil. Este estudo teve como objetivo a caracterização molecular de amostras do tipo G2 obtidas de crianças participantes de estudos em gastroenterites virais na região amazônica, Brasil, no período de 1992 a 2008. Foram selecionadas 53 amostras
positivas para rotavírus genótipo G2 que foram sequenciadas para VP7 e 38 para VP4. Inicialmente, as amostras foram genotipadas por RT-PCR e seus produtos purificados, quantificados e sequenciados. As amostras também foram testadas quanto ao perfil de migração dos segmentos de RNA. As sequências obtidas dos genes VP4 e VP7 foram alinhadas e editadas no programa Bioedit (v.6.05) e comparadas a outras sequências de RV registradas no banco de genes utilizando o programa BLAST. A árvore filogenética foi feita utilizando o programa Mega 2.1. Do total de 53 amostras sequenciadas para o gene VP7, a análise filogenética revelou a
existência de duas linhagens (II e III) e três sublinhagens (IIa, IIc, IId) que circularam
em períodos diferentes na população. Amostras das sub-linhagem IIa e IIc
apresentaram mutação na posição no aminoácido da posição 96 (Asp/ Asn) . Essa modificação pode resultar em uma alteração conformacional dos epítopos reconhecidos por anticorpos neutralizantes. As linhagens de G2 que circularam em
Belém foram idênticas àquelas de outros Estados da região amazônica envolvidos no estudo. O gene VP[4] foi sequenciado na região da VP8*, sendo 36 pertencentes do genótipo P[4] e 3 ao P[6]. No genótipo P[4] foi identificada a circulação de duas
linhagens, P[4]-4 ocorrendo nos anos de 1998-2000, e P[4]-5 que circulou nos
períodos de 1993-1994 e 2006-2008. Nossos resultados reforçam dados de
ocorrência continental que evidenciam a reemergência do genótipo G2 com a
variante gênica IIc, a qual se estabeleceu na população em associação com o
genótipo P[4]-5. A grande homologia entre as cepas de G2 que circularam entre os diferentes estados envolvidos no estudo sugere que as mutações registradas ultrapassaram barreiras geográficas e temporais. / In Brazil it is estimated that rotavirus causes 3,352,053 episodes of diarrhea, 655 853 visits to emergency rooms, 92,453 hospitalizations and 850 deaths involving children
under 5 years of age. Rotavirus belongs to the family Reoviridae, genus Rotavirus.
The viral particle consists of three concentric layers of protein and the viral genome
of 11 segments making up a double-stranded RNA. Currently, 23 G genotypes and
31 P genotypes. have been recognized. Among the G genotypes detected so far, G2
represents one of the most important and it is usually associated with the genotype P
[4]. Over the past three years it has been observed on a continental scale the reemergence
of genotype G2, throughout the years following the introduction of
universal rotavirus vaccination, particularly in Brazil. This study aimed at the
molecular characterization of samples of G2 strains obtained from children
participating in several studies on rotavirus gastroenteritis in the Amazon region,
Brazil, from 1992 to 2008. We selected 53 rotavirus G2 samples which were
sequenced for VP4 and 38 samples for VP7. These samples were genotyped by RTPCR
and its products being purified, quantified and sequenced. Samples were also
subjected to electrophoresis of RNA segments. The obtained sequences of VP4 and
VP7 genes were aligned and edited using the program Bioedit (v.6.05) and
compared with other sequences registered in the RV gene bank using the BLAST
program. The phylogenetic tree was made using the program Mega 2.1. Of the total
53 samples sequenced for the VP7 gene, phylogenetic analysis revealed two
lineages (II and III) and three sublineages (IIa, IIc, IId) that circulated in different
periods in the population. Samples of sub-lineages IIa and IIc showed mutation at
amino acid position 96(Asp/Asn). This modification may result in a conformational
change of epitopes recognized by neutralizing antibodies. The G2 strains that
circulated in Belém were identical to those circulating in other states in the Amazon
region which were included in the study. The VP[4] gene was sequenced in the
region of VP8*, yielding 36 which-belonged to genotype P[4] and tree to P[6] we
could identify two strains: P[4]-4, occurring during 1998-2000 and the P[4]-5 during
1993-1994 and 2006-2008 periods. Our findings sustain recent findings indicating a
worldwide reemergence of G2 genotypes of variant IIc, which were established in the
population in combination with genotype P[4]-5. In our study, the high homology
among G2 strains in various states suggests that detected mutations have even
surpassed geographical and temporal barriers.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpa.br:2011/3856 |
| Date | 05 July 2010 |
| Creators | OLIVEIRA, Alessilva do Socorro Lima de |
| Contributors | LINHARES, Alexandre da Costa |
| Publisher | Universidade Federal do Pará, Programa de Pós-Graduação em Doenças Tropicais, UFPA, Brasil, Núcleo de Medicina Tropical |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPA, instname:Universidade Federal do Pará, instacron:UFPA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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