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Previous issue date: 2011-04-19 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O Antígeno de Ligação ao Eritrócito de 175kDa (EBA-175) é o ligante preferencial do P. falciparum
no processo de penetração em eritrócitos sendo considerado, portanto, um importante antígeno
candidato à vacina, O EBA-175 apresenta duas regiões bem caracterizadas: a região II - conservada,
imunogênica e com 2 segmentos ricos em cisteína (F1 e F2) que estão envolvidos na ligação do parasito
à glicoforina-A da superfície dos eritrócitos e, a região III – apresentando fragmentos C (cepa CAMP) e F
(cepa FCR3), que são mutuamente exclusivos, que definem as famílias alélicas do EBA-175.
Estudos realizados em áreas hiperendêmicas de malária na África mostraram uma forte associação
entre a forma clínica da doença e o dimorfismo da região III do EBA-175. As diferenças observadas entre
áreas endêmicas em relação aos parasitos circulantes são fatores importantes em termos de estratégias
de desenvolvimento de uma vacina visto que sua eficácia pode variar em diferentes cenários
epidemiológicos.
Neste estudo avaliou-se a diversidade genética das regiões II e III do EBA-175 apresentada pelos
isolados naturais de P. falciparum provenientes de Porto Velho (RO), área de transmissão instável como
são as áreas brasileiras, associando-a as variáveis de morbidade e exposição à malaria. Os isolados,
obtidos ao longo de 13 anos, foram divididos em grupos de acordo com o ano da coleta: PV94/1994 (n=
101), PV02/2002 (n= 57) e PV07/2007 (n=30). Após a extração do DNA o polimorfismo genético foi
analisado por PCR e seqüenciamento.
Observamos na região II apenas um tipo de fragmento, com 926 pb. Na região III, observamos o
clássico dimorfismo com uma freqüência maior do fragmento-C (84.3%). A infecção mista foi observada
em 1,6% dos isolados. O fragmento-C foi amplificado em maior freqüência nos isolados das três coletas
realizadas. Não observamos diferenças nas frequências dos fragmentos C e F entre os 3 grupos
estudados. A análise do seqüenciamento da região II revelou 5 alterações nucleotídicas em 3 dos 15
isolados. Essas alterações levaram a 2 trocas de aminoácidos. A análise do seqüenciamento da região III
evidenciou: no fragmento-C, 8 trocas de nucleotídeos em 3 das 45 amostras. Essas alterações levaram a
7 mudanças de aminoácidos; no fragmento-F, 2 alterações nucleotídicas foram reveladas em 2 das 11
amostras. Estas alterações levaram a 4 trocas de aminoácidos. Esses dados sugerem que não há
diferenças significantes nas porções gênicas que codificam as regiões II e III do EBA-175 entre os
isolados de P. falciparum circulantes em Porto Velho. Além disso, observamos que a frequência do
dimorfismo alélico do EBA-175 é temporalmente estável e ausência de associação entre o polimorfismo
encontrado e as variáveis de morbidade e exposição à malária. / P. falciparum Erythrocyte Binding Antigen 175 (EBA-175) plays a central role in erythrocytes
invasion being considered, therefore, a target for malaria vaccine development.This antigen
present to well characterized regions: the region II - conserved and immunogenic, that contains
two cysteine-rich segments (F1 and F2), which are involved in binding to glycophorin-A on the
surface of erythrocytes and, the region III – that contains mutually exclusive C (strain CAMP)
and F (strain FCR3) fragments, which defines the two allelic families of EBA-175.
Several studies performed in high endemicity malaria area in Africa have shown the
influence of this dimorphism on clinical disease and outcome. The differences observed between
different endemic areas in relation to exposed individuals and the circulating parasites are
important factors in terms of vaccine strategies since the efficacy of a potential vaccine may vary
in different epidemiological scenarios. The goal of this study was to evaluate the genetic
diversity of regions II and III of EBA-175 in P. falciparum isolates from Porto Velho (RO), a
region of malaria unstable transmission, and the influence of this diversity on malaria morbidity
and exposure variables. The blood samples were collected in three time points between 1994,
2002 and 2007 (PV94 group, n=101; PV02 group, n=57; PV07 group, n=30, respectively). The
genetic polymorphism was analyzed by PCR and sequencing.
We observed in the region II only one type of fragment with 926 bp. In the region III we
observed the classic dimorphism with a higher frequency of the C-fragment (84.3%). The mixed
infection was observed in 1.6% of isolates. There were no differences in the frequency of
fragments C and F among the 3 groups. Sequencing of region II revealed 5 nucleotide changes
in 3 of 15 isolates, leading to 2 amino acids replacements. Sequencing of region III revealed
that: in the C-fragment there were 8 nucleotide changes in 3 of 45 samples, leading to 7 amino
acids replacements; in the fragment-F there were 2 nucleotide changes , in 2 of 11 samples,
leading to 2 amino acids replacements.
Our results showed: reduced genetic diversity in P. falciparum EBA-175 isolates circulating
in Porto Velho; predominance of C-fragment and temporal stability of allelic dimorphism of the
EBA-175. Moreover, no association was observed between the EBA-175 dimorphism and
malaria morbidity and exposure variables.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/6908 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Silva, Daiana de Souza Perce da |
| Contributors | Ferreira, Joseli de Oliveira, Zalis, Mariano Gustavo, Luca, Paula Mello de, Mutiz, Martha Cecília Suarez, Banic, Dalma Maria |
| Publisher | Instituto Oswaldo Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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