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Previous issue date: 2005-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O estudo detalhado do processo de formação dos embriões somáticos e sua comparação morfológica com embriões zigóticos pode fornecer informações relevantes para o aumento ou a manipulação da resposta embriogênica e uma melhor conversão dos embriões somáticos em plantas, uma vez que a análise comparativa da estrutura e morfologia dos embriões somático e zigótico podem apontar falhas do processo da embriogênese somática. Portanto, o presente trabalho teve como objetivo o estudo morfoanatômico e histoquímico dos embriões somáticos e zigóticos de jabuticaba- branca, a fim de determinar as possíveis causas da baixa conversão em plântulas de embriões somáticos de jabuticabeiras. Foram coletados frutos maduros de jabuticaba- branca, sendo as sementes retiradas manualmente. Depois de retirada a mucilagem, parte das sementes foi utilizada para extração do embrião zigótico para o estudo morfoanatômico e histoquímico e parte para obtenção de embriões somáticos. Estes embriões foram obtidos “in vitro”, a partir de cotilédones de embriões zigóticos. Para o estudo anatômico e histoquímico, o material vegetal foi fixado em FAA50% e estocado em etanol 70%. O material vegetal foi incluído em glicol-metacrilato e seccionado transversal e longitudinalmente, em micrótomo rotativo, com 6 μm de espessura. As lâminas com os cortes foram submetidas ao azul-de-toluidina para metacromasia e ao regente de lugol, para detecção de amido, e montadas em resina sintética. Os cortes foram analisados e fotografados em fotomicroscópio com sistema U-photo, câmera e microcomputador com o software Spot-Basic. Para a microscopia eletrônica de varredura, embriões somáticos foram fixados em glutaraldeído 3%, em tampão cocodilato de sódio 0,1 M a 4 oC, desidratados em série etanólica, seguida de secagem em ponto crítico de CO2 líquido. As amostras foram preparadas nos suportes, cobertas com ouro, observadas e fotografadas em microscópio eletrônico de varredura. Análises histológicas apontaram desenvolvimento dos pró-embriões, os quais dão origem a embriões somáticos morfologicamente semelhantes a embriões zigóticos, porém os embriões zigóticos apresentam um procâmbio bem mais desenvolvido e grande quantidade de material de reserva e tamanho 10 vezes maior que os embriões somáticos. Nas análises histológicas dos embriões somáticos, observaram-se diversas anomalias, o que impediu a conversão desses embriões em plântulas. Além dessas anomalias, a falta de meristema apical e o procâmbio bem menos desenvolvido do que nos embriões zigóticos também colaboraram com a baixa conversão em plântulas. As análises histoquímicas dos embriões somáticos e zigóticos comprovaram que o material de reserva de ambos é o amido, porém, nos embriões somáticos, a quantidade de amido é menor e de ocorrência esporádica, sendo uma das causas da baixa conversão em plântulas. Através das análises histológicas, observou-se que os embriões somáticos passam pelos diferentes estádios de desenvolvimento globular, cordiforme, torpedo e cotiledonar, à semelhança dos embriões zigóticos. Existem semelhanças na morfologia dos embriões somáticos e zigóticos, ambos com desenvolvimento de um par de cotilédones e eixo embrionário reduzido. / The detailed study of somatic embryo formation and its morphological comparison with zygotic embryos can elicit relevant information to the increase or manipulation of the embryogenic response and a better conversion of somatic embryos to plants, once the comparative analysis of the structure and morphology of the somatic and zygotic embryos can show defects in somatic embryogenesis. Therefore, the objective of the present work was the morphoanatomical and histochemical study of somatic and zygotic embryos of white-jaboticaba, in order to determine the possible causes of the low conversion of jaboticaba somatic embryos to plantlets. Ripe fruits were collected from white-jaboticaba trees, with seeds removed by hand. After removing the mucilage, part of the seeds was used for zygotic embryo extraction for morphoanatomical and histochemical studies, and part for obtaining somatic embryos. "In vitro" somatic embryos were obtained from cotyledons of zygotic embryos. The material was fixed in FAA50% and stored in 70% ethanol for anatomical and histochemical studies. The material was embedded in glycol methacrylate and 6 μm- thick sections were transverse and longitudinally cut using a rotating microtome. The sections collected on glass slides and stained in toluidine blue, and lugol for starch detection, were mounted in synthetic resin. The sections were analyzed and photographed in a U-photo system light microscope, camera and microcomputer with the Spot-Basic software. For scanning electron microscopy, somatic embryos were fixed in 3% glutaraldehyde in 0.1 M sodium cacodylate buffer at 4 oC, dehydrated through a graded ethanol series, followed by liquid CO2 critical point drying. The samples were mounted on the supports, coated with gold, observed and photographed in a scanning electronic microscope. The histological examination confirmed the development of pro- embryos, from which somatic embryos morphologically similar to zygotic embryos were produced, however the zygotic embryos presented a well developed procambium, a large amount of storage reserves and were tenfold larger than the somatic embryos. Histological analyses of somatic embryos showed several anomalies, which hindered the conversion of those embryos to plantlets. Besides the anomalies, the lack of apical meristem and the much less procambium developed than in the zygotic embryos also contribute to the low conversion to plantlets. The histochemical analyses of somatic and zygotic embryos proved that the storage reserves in both is starch, however, in somatic embryos, the amount of starch is smaller and of sporadic occurrence, being one of the causes of the low conversion to plantlets. Histological analyses showed that somatic embryos progress through different stages of development such as globular, heart shape, torpedo and cotyledonary, similar to zygotic embryos. The morphology of somatic and zygotic embryos is similar, both developing a pair of cotyledons and reduced embryonic axis.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:123456789/10712 |
| Date | 28 July 2005 |
| Creators | Silva, Crislene Viana da |
| Contributors | Ventrella, Marília Contin, Dias, Denise Fernandes Cunha dos Santos, Motoike, Sérgio Yoshimitsu |
| Publisher | Universidade Federal de Viçosa |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFV, instname:Universidade Federal de Viçosa, instacron:UFV |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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