<p>Flödescytometrisk cellsortering möjliggör att ur ett större cellmaterial separera en subpopulation celler för vidare analyser. Uppkomst av cytostatikaresistens beror på olika faktorer men där överuttryck av P-gp spelar stor roll. P-gp transporterar aktivt ut cytostatika ur cellen. I studier på AML-celler har man flödescytometriskt påvisat att JC-1 ackumulering speglar P-gp aktivitet. Därmed kan cytostatikaresistenta celler identifieras och sorteras.</p><p>Bröstcancer är den svenska kvinnans vanligaste cancerform där cytostatika ofta ingår i den postoperativa behandlingen. Trots att många patienter svarar på första behandlingen drabbas många ändå av återfall. Problematik med cytostatikaresistens är då vanligt förekommande.</p><p>Syftet med denna studie var att sätta upp en metod för att flödescytometrisk cellsortera avseende olika JC-1 ackumulering och därmed olika cytostatikakänslighet.</p><p>I studien användes färskt brösttumörmaterial och två subcellinjer av leukemicellinjen HL-60. HL-60 S som är känslig för cytostatika och HL-60 R5 som är resistent vid odling med 5 µM doxorubicin.</p><p>Resultaten visade att starkare fluorescensintensitet erhölls vid inkubation och förvaring i JC-1 jämfört med att efter JC-1 inkubation förvara cellerna i D-PBS. Det var möjligt att inkubera ett större antal celler med JC-1 i cellodlingsflaska. Resultaten visar dock att flödescytometrisk sortering kraftigt påverkade viabiliteten hos HL-60 S + R5 där endast två tredjedelar av cellerna var viabla efter sorteringen. Preparering av brösttumörmaterial med Medicon medförde att en betydande andel celler dog och materialet i studien var inte tillräckligt för cellsortering. Att cellsortera kräver kunskap och erfarenhet och det är av vikt att prepareringsmetoden och sorteringsinställningarna optimeras på det material som ska användas i studien.</p>
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA/oai:DiVA.org:oru-4948 |
| Date | January 2008 |
| Creators | Axelsson, Susanne |
| Publisher | Örebro University, School of Health and Medical Sciences |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | Swedish |
| Detected Language | Swedish |
| Type | Student thesis, text |
Page generated in 0.002 seconds