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Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii é o agente causador da toxoplasmose, doença distribuída em grande parte do globo infectando vertebrados endotérmicos. T. gondii é um parasita intracelular obrigatório e não sintetiza colesterol, recrutando-o da célula hospedeira. Esse parasito é dividido em grupos, de acordo com a virulência, sendo a cepa RH e a cepa ME-49 representantes de parasitos de maior e de moderada virulência, respectivamente. Semelhante a outros parasitos protozoários, T. gondii expõem fosfatidilserina (PS) na membrana externa, sendo um exemplo do mimetismo apoptótico, o que tem sido sugerido como mecanismo de evasão. Corpúsculos lipídicos (CL) são organelas lipídicas comumente encontradas em uma gama de diferentes células, de plantas, parasitos e animais. CL são modulados positivamente por diferentes fatores, incluindo células apoptóticas, parasitos como Trypanosoma cruzi, Leishmania spp. e Plasmodium falciparum e citocinas, como o fator de transformação do crescimento (TGF-\03B2). Nosso trabalho visou investigar se a PS exposta na membrana plasmática de T. gondii pode induzir CL em macrófagos. Independente da virulência da cepa utilizada, T gondii foi capaz de induzir CL em macrófagos infectados. A indução foi maior com aumento da relação parasito/macrófago. Subpopulações de T. gondii, PS positivos (PS+) e PS negativo (PS-) foram obtidas e a subpopulação de PS + induziu mais CL em relação a subpopulação de PS-. A neutralização da PS dos parasitos PS+ ou da população total com anexina-V foi capaz de reduzir o número de CL nas células hospedeiras. Lipossomos contendo PS induziram mais CL em macrófagos quando comparados aos lipossomos sem PS
Curiosamente, parasitos PS- também foram capazes de aumentar o número de CL em macrófagos, sugerindo a participação de outros fatores nesse processo indutor. Após a interação de macrófagos com T. gondii, observamos aumento no número de CL tanto em células que continham o parasita quanto em células vizinhas não parasitadas. Esse achado sugere uma sinalização 18 parácrina entre as células. O TGF-\03B2 é descrito como sendo secretado após infecção por T. gondii, e sua neutralização causou inibição da formação de CL induzido por T. gondii, revelando sua participação nesse processo. Concluímos que T. gondii é capaz de induzir CL em macrófagos, e essa indução tem a participação da PS exposta em sua membrana. A indução dessas organelas ocorreu independente da virulência da cepa. Esse processo é potencializado pela ação parácrina do TGF-\03B2 / Toxoplasma gondii
is the causative agent of toxoplasmosis, a disease
largely
spread
across the globe infecting
almost any
endothermic vertebrates.
T. gondii
is an
obligatory intracellular
par
asite that
can
not synthesize cholesterol
thus relying on
recruiting
it from
the host cell. This parasite is divided into groups according to the
virulence, and the RH
strain and the ME
-
49
strain
representing
highly
and moderate
virulen
t
parasites, respect
ively. Similar to other protozoan parasites,
T. gondii
exposes phosphatidylserine (PS) on the outer membrane
,
an example of the
apoptotic mimicry
,
which
has been suggested as
a
mechanism
of evasion
,. Lipid
bodies (LB) are lipid organelles commonly found in
a range of different cells of plants,
animals and parasites. LB are positively modulated by different factors, including
apoptotic cells, parasites such as
Trypanosoma cruzi
,
Leishmania
spp. and
Plasmodium falciparum
and cytokines such as transforming gro
wth factor (TGF
-
β) .
Our study aimed to investigate whether the PS exposed on the plasma membrane of
T. gondii
in macrophages can induce
LB
.
T gondii
was capable of inducing LB in
infected macrophages,
i
ndependently of the virulence of
the
strain used
.
T
he
LB
induction was greater with increase in parasite / macrophage ratio. Subpopulations of
T gondii
posi
tive PS (PS
+) and negative (PS
-
) were obtained and PS+ subpopulation
induced
significantly greater
LB
formation compared to
PS
-
subpopulation. The
neutra
lization of PS with annexin
-
V was able to reduce the number of LB
o
n
PS+
parasites
or on the
total
parasite
population
, but not on
PS
-
parasites. Liposomes
containing PS induced more LB than liposomes without PS. Interestingly, PS
-
parasites induced LB
f
ormation
in macrophages, suggesting the involvement of other
factors.
After interaction of
T. gondii
with
macrophages
,
we observed
increased
LB
formation both in cells containing internalized
parasite
s as well as in bystander cells
without internalized par
asites
,
suggestive of
a paracrine signaling. TGF
-
β is
described as being secreted after infection with
T. gondii
and its neutralization
caused
inhibition of
T. gondii
-
induced
LB
formation
,
pointing to
TGF
-
β participation
in this process. We conclude that
T. gondii
is able to
induce
LB formation
in
macrophages
.
The induction of these
organelles
was independent of strain
virulence.
T. gondii
-
induced
LB
formation
occurs through
signaling triggered by
PS exposed on the
parasite
membrane. This process is
also amplified
by TGF
-
β
a
cting
in a paracrine fashion
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13515 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Roberto Neto, João |
| Contributors | Calabrese, Kátia da Silva, Wanderley, João Luiz Mendes, Calabrese, Kátia da Silva, Vallochi, Adriana, Bozza, Patricia Torres, DaMatta, Renato Augusto |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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