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Previous issue date: 2012 / CNPq / Hemoderivados são medicamentos produzidos pelo fracionamento industrial do plasma
humano. O principal método para purificação de proteínas plasmáticas humanas é baseado
no método de precipitação com etanol desenvolvido por Cohn-Oncley. O uso de
metodologias simples, de baixo custo e eficientes constitui um avanço tecnológico para
obtenção desses hemoderivados. O objetivo deste trabalho foi imobilizar heparina
comercial em Sephadex G-25 revestido com polianilina e posteriormente utilizar o
derivado imobilizado como matriz de afinidade para purificação de proteínas do plasma
humano. Para síntese do derivado imobilizado, Sephadex G-25 foi revestido com
polianilina e tratado com glutaraldeído, em seguida, incubado com solução de heparina
ativada com 1-etil-3-(dimetilaminopropil) carbodiimida e N-hidroxisuccinimida. A fim de
determinar a influencia de variáveis na imobilização de heparina em Sephadex-polianilina,
foi realizado planejamento experimental fatorial fracionário (24-1) no qual se avaliou quatro
variáveis independentes: concentração e tempo de reação do glutaraldeído e concentração e
tempo de reação da heparina. Nas condições otimizadas desses níveis, a heparina
imobilizada em Sephadex-polianilina foi utilizada para purificação de proteínas do plasma
humano. As variáveis concentração de glutaraldeído e concentração de heparina foram
estatisticamente significativas na imobilização de heparina ao Sephadex-PANI e foi obtido
melhor rendimento de heparina imobilizada (6,88 μg mg-1 suporte, equivalente a 45,9% da
heparina ofertada) nas condições 1% (v v-1) de glutaraldeído, 1,5 h de reação com
glutaraldeído, 1,5 mg mL-1 de concentração de heparina e 2 h de reação com heparina.
Nessas condições obteve-se uma quantidade de proteínas plasmáticas de 25,02 – 27,06 μg
mL-1, nos eluatos de NaCl 0,5 a 2,0 mol L-1. A presença de proteínas foi confirmada
através da técnica eletroforética em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). O compósito
sephadex-polianilina-heparina foi eficiente para purificação de proteínas do plasma,
podendo ser usado como teste a antitrombina.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/12715 |
| Date | 31 January 2012 |
| Creators | MOURA, Rosemery Batista de |
| Contributors | CARVALHO JÚNIOR, Luiz Bezerra de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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