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Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A pouco mais de uma década surgiu uma nova classe de marcadores
fluorescentes baseados em nanocristais de semicondutores do tipo II-VI conhecidos
como pontos quânticos (quantum dots). Neste trabalho, apresentam-se
metodologias de obtenção de pontos quânticos fluorescentes de semicondutores do
tipo core/shell de ZnSe/ZnS e CdS/Cd(OH)2 através de técnicas de química coloidal
em meio aquoso. O tamanho médio dos nanocristais (ZnSe = 3 nm e CdS = 6 nm)
foi estimado utilizando-se as técnicas de espectroscopia de absorção na região do
ultravioleta-visível, microscopia eletrônica de transmissão convencional e pela
técnica de difração de Raios-X. A caracterização das propriedades ópticas foi
realizada empregando-se espectroscopia de emissão e excitação eletrônica. Os
sistemas apresentam alta intensidade de luminescência com máximos observados
na região do azul para o ZnSe/ZnS e do verde para o CdS/Cd(OH)2. Para otimização
de sua emissão os pontos quânticos de ZnSe/ZnS foram submetidos a processo de
fotoativação, com radiação ultravioleta. Ambos sistemas foram bioconjugados à
proteína albumina sérica bovina (BSA), empregando-se agentes de comprimento
zero (carbodiimidas) para os pontos quânticos de ZnSe/ZnS e o crosslinker
glutaraldeído para o CdS/Cd(OH)2. Foram desenvolvidos e avaliados protocolos de
bioconjugação para os dois pontos quânticos, a fim de se estabelecer os mais
eficazes. Os bioconjugados foram caracterizados através de técnicas
espectroscópicas e confirmados pela detecção quantitativa da intensidade de
fluorescência, empregando-se microplacas de poliestireno como substrato. Foi
evidenciado por meio da técnica de dicroísmo circular, que a estrutura secundária da
proteína foi preservada. Os espectros de luz polarizada da biomolécula conjugada
aos pontos quânticos de CdS/Cd(OH)2, apresentaram alterações mínimas em
relação ao padrão não conjugado, enquanto que os conjugados aos pontos
quânticos de ZnSe/ZnS exibiram alterações estruturais significativas. Os
bioconjugados obtidos podem ser considerados protótipos na preparação de
imunocomplexos baseados em ligantes bioespecíficos, visando o desenvolvimento
de imunoensaios heterogêneos para o diagnóstico sorológico de doenças.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/2887 |
| Date | 31 January 2010 |
| Creators | Gonçalves Brasil Júnior, Aluizio |
| Contributors | Saegesser Santos, Beate |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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