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Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Todos os fármacos atualmente em uso para o tratamento da leishmaniose apresentam restrições, como toxicidade, graves efeitos colaterais, custo elevado, administração parenteral ou teratogenicidade. Desta forma, o desenvolvimento de fármacos mais eficazes e seletivos é de suma importância e a identificação de vias metabólicas exclusivas do parasito que possam ser usadas como alvo pode ser um ponto de partida interessante. Acredita-se que a leishmania não dependa da utilização do colesterol exógeno para sua sobrevivência, uma vez que sintetiza seus próprios esteróis. Porém, apesar disso, um percentual expressivo de colesterol é encontrado em suas membranas sendo, em alguns casos, o esterol majoritário indicando um papel biológico para essa molécula. O presente trabalho visa estudar a importância para a L. amazonensis da utilização do colesterol proveniente do soro, em diversas situações, avaliando o potencial desse sistema como um possível alvo farmacológico. A atividade dos inibidores da biossíntese do ergosterol (cetoconazol, miconazol, terbinafina e sinvastatina) foi avaliada, na presença de soro normal ou deslipidado. Foi observada que a privação das lipoproteínas do soro potencializa o efeito dos inibidores do ergosterol. Os promastigotas tratados com esses inibidores mostraram diferenças na sua composição lipídica, com acúmulo de colesterol nas células tratadas, principalmente, com cetoconazol e miconazol, indicando um possível mecanismo de compensação da leishmania, para suprir a inibição do ergosterol. Experimentos com LDL-I125, no qual tanto a leishmania tratada com cetoconazol, quanto a tratada com sinvastatina, que inibe o início da via de biossíntese de ergosterol, aumentaram a captação da LDL
A suramina, um inibidor da captação de LDL, mostrou uma diminuição do conteúdo de colesterol da leishmania e, em associação com a sinvastatina, obteve um efeito sinérgico, mostrando que o conteúdo da LDL, principalmente colesterol, pode estar envolvido na manutenção da integridade da membrana da célula. Em adição, a resistência ao cetoconazol induzida in vitro foi estudada. Foi observada uma relação direta entre o aumento da expressão gênica da C14-desmetilase com o nível de resistência induzido em promastigotas de L. amazonensis, sugerindo que esse seja o principal mecanismo de resistência a essa classe de fármacos. De uma maneira geral, a análise dos resultados como um todo sugere que o colesterol desempenhe um importante papel na atividade dos inibidores da biossíntese do ergosterol e que o bloqueio da sua utilização pode ser um possível alvo farmacológico / All drugs currently in use for the treatment of lei
shmaniasis present restrictions, such
as toxicity, serious side effects, high cost, paren
teral administration or teratogenicity.
Thus, the development of more effective and selecti
ve drugs is a priority and the
identification of exclusive metabolic pathways of t
he parasite that can be used as a
target could be an interesting starting point. It i
s believed that leishmania is not
dependent on the use of exogenous cholesterol for s
urvival, since it synthesizes its
own sterols. But, nevertheless, a significant perce
ntage of cholesterol is found in its
membranes and, in some cases, as the major sterol,
indicating a biological role for this
molecule. This work aims to study the importance fo
r
L. amazonensis
of the use of
cholesterol from the serum in various situations, a
ssessing the potential of this system
as a possible drug target. The activity of the ergo
sterol biosynthesis inhibitors
(ketoconazole, miconazole, terbinafine and simvasta
tin) was evaluated in the presence
of normal or delipidated serum. It was observed tha
t the deprivation of the serum
lipoprotein potentiates the effect of inhibitors of
ergosterol. The promastigotes
treated with these inhibitors showed differences in
their lipid composition, with
accumulation of cholesterol in treated cells, mainl
y with ketoconazole and miconazole,
suggesting a compensation mechanism in leishmania,
which may overcome ergosterol
inhibition. Experiments with LDL-I
125
, indicated an increased uptake of LDL in
leishmania treated with either ketoconazole or simv
astatin, the latter inhibits an early
step in the ergosterol biosynthectic pathway. Suram
ine, an inhibitor of the uptake of
LDL, showed a decrease in cholesterol content of th
e leishmania and in combination
with simvastatin, had a synergistic effect, showing
that content of LDL, especially
cholesterol, could be involved in maintaining the c
ell membrane integrity. In addition,
resistance to ketoconazole induced
in vitro
was studied. There was a direct
relationship between increased gene expression of C
14-desmetilase and the level of
resistance induced in promastigotes of
L. amazonensis
, suggesting that this is the main
mechanism of resistance to this class of drugs. Tak
en together, these results suggest
that cholesterol plays an important role in the act
ivity of ergosterol inhibitors
biosynthesis and that the blocking of its use by le
ishmania may be a possible drug
target.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13347 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Andrade Neto, Valter Viana de |
| Contributors | Levy, Claudia Masini d'Ávila, Atella, Georgia Correa, Bergmann, Bartira Rossi, Cavalheiro, Marilene Marcuzzo do Canto, Amaral, Elmo Eduardo de Almeida, Santos, Eduardo Caio Torres dos |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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