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Previous issue date: 2009-05-11 / The pathogenic fungus Paracoccidioides brasiliensis causative of
Paracoccidioidomycosis (PCM), a pulmonary mycose acquired by inhalation of fungal
airborne propagules, which may disseminate to several organs and tissues leading to a
severe form of the disease. Adhesion and invasion to host cells are essential steps
involved in the internalization and dissemination of pathogens. Inside host, P.
brasiliensis use the glyoxylate cycle for intracellular survival. Here, we provide
evidence that malate synthase of P. brasiliensis (PbMLS) is localized on the cell wall,
and is secreted. PbMLS was overexpressed in Escherichia coli, and polyclonal antibody
against this protein was obtained. By using Confocal Laser Scanning Microscopy and
Western blot analysis, PbMLS was detected in the cytoplasm and the cell wall of the
yeast phase of P. brasiliensis of mother and bud yeast cells. PbMLSr and the respective
polyclonal antibody produced against this protein inhibited the interaction of P.
brasiliensis to in vitro cultured epithelial cells A549. These observations indicated that
cell wall-associated MLS of P. brasiliensis could be mediating the binding of fungal
cells, thus contributing to the adhesion of fungus to host tissues and to the dissemination
of infection. / O fungo de patogênico Paracoccidioides brasiliensis agente causador da
Paracoccidioidomicose (PCM), uma micose pulmonar adquirida pela inalação de
propágulos aéreos do fungo que pode se disseminar a vários órgãos e tecidos levando a
uma forma severa da doença. Dentro do hospedeiro, P. brasiliensis usa o ciclo do
glioxalato (CG) para sobrevivência intracelular. Adesão e invasão das células do
hospedeiro são passos essenciais envolvidos na internalização e disseminação do
patógeno. Aqui, nós evidênciamos que malato sintase de P. brasiliensis (PbMLS) é
secretada, e é localizada na parede da célula. PbMLS foi superexpressa em Escherichia
coli, e o anticorpo policlonal contra esta proteína foi obtido. Usando Microscopia Laser
Confocal (CLSM) e análise de Western blot, PbMLS foi encontrada no citoplasma e na
parede da célula na fase leveduriforme de P. brasiliensis nas células mãe e broto.
PbMLSr e o respectivo anticorpo policlonal produzido contra esta proteína inibiram a
interação de P. brasiliensis com células epiteliais A549 cultivads in vitro. Estas
observações indicariam que MLS associada à parede da célula de P. brasiliensis pode
estar mediando a ligação do fungo às células, contribuindo assim com a adesão do
fungo aos tecidos hospedeiros e para a disseminação da infecção.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tde/1295 |
| Date | 11 May 2009 |
| Creators | SILVA NETO, Benedito Rodrigues da |
| Contributors | PEREIRA, Maristela |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Mestrado em Biologia, UFG, BR, Ciências Biolóicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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