Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2018-06-19T18:25:16Z
No. of bitstreams: 1
DANIEL RODRIGUES DE BASTOS.pdf: 1922893 bytes, checksum: 51e3aa82ceb630f944c3c65627dcffaa (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-19T18:25:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1
DANIEL RODRIGUES DE BASTOS.pdf: 1922893 bytes, checksum: 51e3aa82ceb630f944c3c65627dcffaa (MD5)
Previous issue date: 2017-05-04 / Introduction: Breast cancer is the most frequent neoplasm among women worldwide
and represents the leading cause of death in this population. Important biomarkers
have been studied in order to better define the prognosis of patients affected by this
cancer. MicroRNAs are small molecules of non-coding RNAs composed of 21 to 25
nucleotides that play an important role in the post-transcriptional regulation of several
genes. Objective: The objective of this study was to evaluate the expression of
microRNAs (miRNAs: hsa-miR-7 and hsa-miR-10b) and BRCA1 protein in breast
cancer samples, as well as the possible associations between expression of these
markers with clinicopathological and prognostic aspects. Method: The study included
92 cases of breast carcinoma from Hospital Araújo Jorge, Associação de Combate
ao Câncer em Goiás. Formalin fixed paraphin embedded samples were used for the
analisis. MicroRNA was extracted from the samples and used for cDNA synthesis.
The cDNA samples were adjusted to the same concentration and submitted to
quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Samples were further evaluated by
immunohistochemistry for BRCA1 expression. Results: From a group of 234
immunohistochemical records, 56 cases of non-triple-negative and 36 triple-negative
breast carcinomas were selected. Five-year overall survival was significantly
associated to triple negative phenotype (p = 0.044), advanced stages (p = 0.005),
lymph node involvement (p = 0.038), presence of distant metastasis (p = 0, 0008)
and absence of BRCA1 expression (p = 0.039). Significant associations were
demonstrated between the absence of BRCA1 and the triple-negative phenotype (p =
0.0346), as well as the absence of estrogen receptor expression (p = 0.006) and
absence of progesterone receptor expression (p = 0.0163). The analysis by qRTPCR
demonstrated different levels of miR-10b and miR-7 expression in the tumors,
with significant associations with triple-negative phenotype (p = 0.021, p = 0.042) and
the absence of BRCA1 (p = 0.039, p = 0.006). The comparison between absence
and presence of human epidermal growth factor receptor expression showed a
significant difference for miR-7 (p = 0.031), and the expression of miR-10b in these
cases was not statistically different (p = 0.926). Conclusion: Significant associations
were demonstrated between the absence of BRCA1 and the triple-negative
phenotype. Five-year overall survival was reduced for the triple-negative phenotype
patients, clinical stages III and IV, the presence of lymph node metastasis, the
presence of distant metastasis and the absence of BRCA1 expression. This study
also demonstrated that hsa-miR-7 and hsa-miR-10b are significantly associated with
the absence of BRCA1 expression and triple-negative phenotype, with poorer
survival in these patient profiles. Studies with more cases and with cell lines should
be performed in order to confirm the role of hsa-miR-7 and hsa-miR-10b in the
modulation of BRCA1 expression. / Introdução: O câncer de mama é a neoplasia mais frequente entre as mulheres de
todo o mundo e representa a principal causa de morte nesta população. Importantes
biomarcadores têm sido estudados, a fim de definir melhor o prognóstico de
pacientes acometidas por esta doença. Os microRNAs são pequenas moléculas de
RNAs não codificantes, compostos por 21 a 25 nucleotídeos e desempenham
importante papel na regulação pós-transcricional de diversos genes. Objetivo: O
objetivo do estudo foi avaliar a expressão de microRNAs (miRNAs: hsa-miR-7 e hsamiR-
10b) e da proteína BRCA1 em amostras de câncer de mama, bem como as
possíveis associações entre a expressão desses marcadores e os aspectos
clinicopatológicos e prognósticos. Método: O estudo foi composto por 92 casos de
carcinoma de mama, provenientes do Hospital Araújo Jorge, da Associação de
Combate ao Câncer em Goiás. Foram utilizados fragmentos de tumores incluídos
em parafina. A extração de microRNA das amostras foi realizada e o produto gerado
foi utilizado para a síntese de cDNA. As amostras de cDNA foram ajustadas para
igual concentração e submetidas à PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR). As
amostras foram avaliadas ainda por meio de imuno-histoquímica para expressão de
BRCA1. Resultados: Um total de 234 registros de imuno-histoquímica foi avaliado,
resultando em 56 casos de carcinomas de mama apresentando fenótipo não triplonegativo
e 36 com fenótipo triplo-negativo. A sobrevida das pacientes em função das
características clinicopatológicas demonstrou associações com os casos triplonegativos
(p=0,044), estádios mais avançados (p=0,005), acometimento linfonodal
(p=0,038), presença de metástase à distância (p=0,0008) e ausência da expressão
de BRCA1 (p=0,039). Associações significativas foram demonstradas entre a
ausência de BRCA1 e o fenótipo triplo-negativo (p=0,0346), entre a ausência da
expressão do receptor de estrógeno e ausência da expressão de BRCA1 (p=0,006),
e entre o receptor de progesterona e a ausência da expressão de BRCA1
(p=0,0163). A análise por qRT-PCR demonstrou diferentes níveis de expressão de
miR-10b e de miR-7, com associações significativas ao fenótipo triplo-negativo
(p=0,021; p=0,042) e à ausência de BRCA1 (p=0,039; p=0,006). A comparação
entre ausência e presença da expressão do receptor do fator de crescimento
epidérmico humano demonstrou diferença significativa para miR-7 (p=0,031), sendo
que a expressão de miR-10b nestes casos não foi estatisticamente diferente
(p=0,926). Conclusão: Associações significativas foram demonstradas entre a
ausência de BRCA1 e o fenótipo triplo-negativo. A sobrevida em cinco anos foi
inversamente associada ao fenótipo triplo-negativo, aos estádios clínicos III e IV, à
presença de metástase linfonodal, à presença de metástase à distância e à ausência
da expressão de BRCA1. Este estudo demonstrou ainda que hsa-miR-7 e hsa-miR-
10b estão significativamente associados à ausência da expressão de BRCA1 e ao
fenótipo triplo-negativo, sendo observada pior sobrevida nestes perfis de pacientes.
Estudos com maior número de casos e com linhagens celulares devem ser
realizados para constatar o papel de hsa-miR-7 e hsa-miR-10b na modulação da
expressão de BRCA1.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:ambar:tede/3983 |
| Date | 04 May 2017 |
| Creators | Bastos, Daniel Rodrigues de |
| Contributors | Saddi, Vera Aparecida, Vilanova-Costa, Cesar Augusto Sam Tiago, Carneiro, Megmar Aparecida dos Santos |
| Publisher | Pontifícia Universidade Católica de Goiás, Programa de Pós-Graduação STRICTO SENSU em Ciências Ambientais e Saúde, PUC Goiás, Brasil, Escola de Ciências Médicas, Famacêuticas e Biomédicas::Curso de Biomedicina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_GOAIS, instname:Pontifícia Universidade Católica de Goiás, instacron:PUC_GO |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 182347147502304568, 500, 500, 600, -3419534730652026874, 8765449414823306929 |
Page generated in 0.0034 seconds